根據(jù)寄主植物的不同將密執(zhí)安棒狀桿菌分為五個(gè)亞種：番茄細(xì)菌性潰瘍病菌（Cmm）,侵染引起番茄潰瘍��；馬鈴薯環(huán)腐病菌（Cms）,侵染引起馬鈴薯環(huán)腐病；苜蓿細(xì)菌性萎蔫病菌（Cmi）,侵染引起苜蓿細(xì)菌性萎蔫�。挥衩孜璨【–mn）,侵染引起玉米內(nèi)州萎蔫�。恍←溂�(xì)菌性花葉病菌（Cmt）,侵染引起小麥細(xì)菌性花葉病。這些病害常造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,其中番茄細(xì)菌性潰瘍病菌、苜蓿細(xì)菌性萎蔫病菌、玉米內(nèi)州萎蔫病菌為我國進(jìn)境檢疫性有害生物。目前,針對(duì)密執(zhí)安棒狀桿菌植物病菌還沒有快速可行的檢測(cè)方法,嚴(yán)重影響了口岸檢疫的效率。因此,針對(duì)該種植物病菌建立快速、靈敏的檢測(cè)方法對(duì)防止病害的發(fā)生、傳播與流行具有重要的意義。 本文針對(duì)密執(zhí)安棒狀桿菌（Clavibacter michiganensis）種內(nèi)五個(gè)病菌建立了交叉引物恒溫?cái)U(kuò)增（Cross Priming Amplification, CPA）檢測(cè)體系,并通過結(jié)合可視性膠體金檢測(cè)試紙條,建立了一種具有簡(jiǎn)單、快捷、靈敏特異、不需要昂貴儀器等優(yōu)點(diǎn)的新型檢測(cè)方法,可用于細(xì)菌性植物病害的快速篩查和檢測(cè)。 針對(duì)密執(zhí)安棒狀桿菌（Clavibacter michig... 

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 密執(zhí)安棒狀桿菌植物病菌概述
    1.2 主要檢測(cè)及鑒定方法
        1.2.1 血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)
        1.2.2 分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)
        1.2.3 免疫捕捉PCR
        1.2.4 實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)
        1.2.5 Rep-PCR分析法
        1.2.6 核酸分子雜交技術(shù)
        1.2.7 基因芯片技術(shù)
        1.2.8 其它檢測(cè)分類技術(shù)
    1.3 恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)
        1.3.1 交叉引物恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)原理
        1.3.2 CPA擴(kuò)增檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用前景
    1.4 密執(zhí)安棒狀桿菌種內(nèi)五個(gè)亞種介紹
        1.4.1 番茄細(xì)菌性潰瘍病菌
        1.4.2 玉米內(nèi)州萎蔫病菌
        1.4.3 馬鈴薯環(huán)腐病菌
        1.4.4 苜蓿細(xì)菌性萎蔫病菌
        1.4.5 小麥細(xì)菌性花葉病菌
    1.5 本研究目的及意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 參試菌株
        2.1.2 植物種子及材料
        2.1.3 培養(yǎng)基和主要試劑
        2.1.4 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 密執(zhí)安棒狀桿菌種植物病菌CPA法檢測(cè)體系的建立
        2.2.2 CPA法特異性檢測(cè)試驗(yàn)
        2.2.3 CPA法靈敏度檢測(cè)試驗(yàn)
        2.2.4 CPA檢測(cè)接種密執(zhí)安棒狀桿菌的植株
        2.2.5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR靈敏度檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 普通PCR靈敏度檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 普通PCR結(jié)果判定
        2.2.8 CPA法檢測(cè)種子樣品
3 結(jié)果與分析
    3.1 CPA法檢測(cè)密執(zhí)安棒狀桿菌(Cl.michiganensis)植物病菌
    3.2 CPA檢測(cè)接種密執(zhí)安棒狀桿菌的植株
    3.3 普通PCR靈敏度檢測(cè)試驗(yàn)
    3.4 實(shí)時(shí)熒光PCR靈敏度檢測(cè)試驗(yàn)
    3.5 CPA法檢測(cè)帶菌種子樣品
4 全文結(jié)論與討論
    4.1 結(jié)論
        4.1.1 CPA法檢測(cè)番茄細(xì)菌性潰瘍病菌(Cmm)
        4.1.2 CPA法檢測(cè)玉米內(nèi)州萎蔫病菌(Cmn)
        4.1.3 CPA法檢測(cè)苜蓿細(xì)菌性萎蔫病菌(Cmi)
        4.1.4 CPA法檢測(cè)小麥細(xì)菌性花葉病菌(Cmt)
        4.1.5 CPA法檢測(cè)馬鈴薯環(huán)腐病菌(Cms)
        4.1.6 CPA法檢測(cè)種子樣品
    4.2 討論
        4.2.1 CPA法檢測(cè)密執(zhí)安棒狀桿菌植物病菌
        4.2.2 CPA法檢測(cè)帶菌種子樣品
        4.2.3 CPA法在植物病菌檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用前景
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
致謝
作者簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]雙重PCR和競(jìng)爭(zhēng)性PCR檢測(cè)馬鈴薯環(huán)腐病菌和黑脛病菌技術(shù)體系建立[D]. 韓廣濤.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]玉米檢疫性種傳細(xì)菌免疫學(xué)及基因芯片檢測(cè)方法的研究[D]. 吳曉巍.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



本文編號(hào)：3702349