煙草是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物,由煙草疫霉侵染煙草引起的黑脛病是一種分布廣泛、危害嚴(yán)重的毀滅性土傳病害。目前該病害的防治措施主要有種植抗病品種、化學(xué)防治、農(nóng)業(yè)防治和生物防治等,其中拮抗放線(xiàn)菌在煙草病害生物防治上的應(yīng)用是研究熱點(diǎn)之一。為了明確洛陽(yáng)煙區(qū)煙株根圍土壤中拮抗放線(xiàn)菌的種類(lèi),探究土壤放線(xiàn)菌的多樣性及群落結(jié)構(gòu),試驗(yàn)采用改良平板對(duì)峙法與菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了篩選菌株及其發(fā)酵液對(duì)煙草疫霉的拮抗作用;通過(guò)形態(tài)學(xué)觀(guān)察、生理生化測(cè)定及16S rDNA序列分析鑒定了優(yōu)勢(shì)拮抗放線(xiàn)菌的種類(lèi);采用Illumina MiSeq測(cè)序技術(shù)探究了煙株根圍土壤中放線(xiàn)菌的多樣性及群落結(jié)構(gòu)。主要研究結(jié)果如下。（1）從煙株根圍土壤分離的放線(xiàn)菌稀釋涂布平板上共挑出放線(xiàn)菌單菌落496個(gè),進(jìn)一步分離純化獲得形態(tài)或顏色不同的放線(xiàn)菌單菌落227個(gè)。（2）15株拮抗放線(xiàn)菌的發(fā)酵液對(duì)煙草疫霉具有較強(qiáng)的拮抗作用,其中8個(gè)菌株的發(fā)酵液對(duì)煙草疫霉菌絲生長(zhǎng)的抑制率達(dá)100%。（3）從18株拮抗放線(xiàn)菌中鑒定得到12個(gè)種,分別為溫和鏈霉菌（Streptomyces moderatus）、教酒色鏈霉菌（S.chartreusis）、玫瑰黃鏈霉菌（S.r... 

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 放線(xiàn)菌的研究概述
        1.1.1 放線(xiàn)菌的分類(lèi)地位
        1.1.2 放線(xiàn)菌的分類(lèi)鑒定方法
        1.1.3 放線(xiàn)菌在植物病害防治上的應(yīng)用
        1.1.4 放線(xiàn)菌在煙草病害防治上的應(yīng)用
        1.1.5 放線(xiàn)菌的生物防治機(jī)制
    1.2 土壤微生物多樣性的研究概述
        1.2.1 土壤微生物多樣性的含義
        1.2.2 土壤微生物多樣性的研究方法
        1.2.3 Illumina MiSeq測(cè)序技術(shù)在土壤微生物多樣性研究中的應(yīng)用
    1.3 本研究的目的及意義
第2章 煙株根圍土壤中抗煙草疫霉放線(xiàn)菌的篩選
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 根圍放線(xiàn)菌的純化
        2.1.4 拮抗放線(xiàn)菌的初篩
        2.1.5 拮抗放線(xiàn)菌的復(fù)篩
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 根圍放線(xiàn)菌的純化
        2.2.2 拮抗放線(xiàn)菌的初篩
        2.2.3 拮抗放線(xiàn)菌的復(fù)篩
    2.3 小結(jié)與討論
        2.3.1 小結(jié)
        2.3.2 討論
第3章 拮抗放線(xiàn)菌的形態(tài)及生理生化特征
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 形態(tài)及培養(yǎng)特征觀(guān)察
        3.1.4 生理生化特征觀(guān)察
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 形態(tài)及培養(yǎng)特征
        3.2.2 生理生化特征
    3.3 小結(jié)與討論
        3.3.1 小結(jié)
        3.3.2 討論
第4章 拮抗放線(xiàn)菌的分子鑒定
    4.1 試驗(yàn)與材料
        4.1.1 試驗(yàn)材料
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 放線(xiàn)菌DNA提取方法
        4.1.5 放線(xiàn)菌16S rDNA的擴(kuò)增
        4.1.6 放線(xiàn)菌系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的構(gòu)建
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 待續(xù)菌株的比對(duì)
        4.2.2 待測(cè)菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)
    4.3 小結(jié)與討論
        4.3.1 小結(jié)
        4.3.2 討論
第5章 煙株根圍土壤放線(xiàn)菌的多樣性及群落結(jié)構(gòu)分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗(yàn)材料
        5.1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        5.1.3 樣品采集
        5.1.4 煙株根圍土壤中放線(xiàn)菌的檢測(cè)
    5.2 結(jié)果與分析
        5.2.1 樣品測(cè)序結(jié)果及取樣深度驗(yàn)證
        5.2.2 樣品稀釋度曲線(xiàn)分析
        5.2.3 Alpha多樣性指數(shù)分析
        5.2.4 OTU Rank曲線(xiàn)分析
        5.2.5 韋恩圖分析
        5.2.6 物種豐度分析
    5.3 小結(jié)與討論
        5.3.1 小結(jié)
        5.3.2 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
縮略語(yǔ)詞匯表
附錄 Ⅰ 拮抗放線(xiàn)菌對(duì)煙草疫霉的拮抗效果
附錄 Ⅱ 拮抗放線(xiàn)菌的鑒定
致謝
攻讀學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3676059