發(fā)布時間：2022-02-14 22:09

　　野油菜黃單胞菌（Xcc, Xanthomonas campestris pv campestris）通過Ⅲ型分泌系統(tǒng)分泌效應(yīng)蛋白到植物體內(nèi)來完成其在植物體內(nèi)的寄生。XopXccN是野油菜黃單胞菌Xcc8004的一個效應(yīng)蛋白,先前的研究表明,XopXccN對于Xcc8004在寄主蘿卜上的完整毒性是必須的,并且XopXccN可以干擾植物的光合系統(tǒng),降低Xcc8004在侵染過程中寄主體內(nèi)的活性氧產(chǎn)生和胼胝體沉積,然而,XopXccN在寄主體內(nèi)具體的作用機理和毒性靶標(biāo)還不清楚。本論文利用Xcc8004-擬南芥互作的模式系統(tǒng),通過將XopXccN在細菌Xcc8004里做基因敲除,接種發(fā)現(xiàn)XopXccN對于Xcc8004在擬南芥的葉肉細胞內(nèi)的完整毒性是必須的。進一步研究證實,XopXccN可以抑制鞭毛蛋白誘導(dǎo)的MAPK（Mitogen-activated protein kinase）激酶活性,并且可以抑制AtMEKK1和MKK5激活的MAPKs激酶活性,這表明XopXccN是通過影響寄主的MAPKs激酶通路來影響植物先天免疫反應(yīng)的。通過免疫共沉淀試驗,XopXccN可以與MKK5發(fā)生相互作用。熒... 

【文章來源】：海南大學(xué)海南省211工程院校

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
1 前言
    1.1 概述
    1.2 植物的先天免疫反應(yīng)
        1.2.1 PAMPs誘導(dǎo)的植物先天免疫反應(yīng)
        1.2.2 效應(yīng)子誘導(dǎo)的植物先天免疫反應(yīng)
    1.3 黃單胞菌的Ⅲ型分泌系統(tǒng)及效應(yīng)子
        1.3.1 黃單胞菌Ⅲ型分泌系統(tǒng)
        1.3.2 野油菜黃單胞菌及其效應(yīng)因子
    1.4 本研究的目的及意義
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 菌株
        2.1.2 植物品種
        2.1.3 抗生素
        2.1.4 質(zhì)粒載體
        2.1.5 培養(yǎng)基
        2.1.6 酶和試劑
    2.2 實驗方法
        2.2.1 質(zhì)粒的小量制備
        2.2.2 大量提取質(zhì)粒
        2.2.3 野油菜黃單胞菌基因組DNA的快速提取
        2.2.4 野油菜黃單胞菌基因組DNA的大量提取
        2.2.5 野油菜黃單胞菌Xcc 8004感受態(tài)細胞的制備
        2.2.6 野油菜黃單胞菌Xcc 8004感受態(tài)細胞的電擊轉(zhuǎn)化（采用BIO-RAD公司的Pluse Controller 儀）
        2.2.7 大腸桿菌DH5 α感受態(tài)細胞的制備
        2.2.8 大腸桿菌E)H5a感受態(tài)細胞的電擊轉(zhuǎn)化（采用BIO-RAD公司Pluse Controller儀）
        2.2.9 擬南芥基因組DNA的提取
        2.2.10 原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)化和蛋白提取
        2.2.11 Western雜交
        2.2.12 供試植物及菌株的培養(yǎng)條件
        2.2.13 植物接種方法
        2.2.14 熒光素酶雙報告系統(tǒng)分析
        2.2.15 MAPK激酶活性分析
        2.2.16 In-ge1激酶活性分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 在黃單胞菌Xcc8004里對基因XopXccN進行基因敲除
    3.2 XopXccN對于Xcc 8004在擬南芥上的完整毒性是必須的
    3.3 XopXccN可以抑制鞭毛蛋白誘導(dǎo)的MAPK激酶活性
    3.4 XopXccN可以抑制△MEKK1激活的MPK6和MPK3活性
    3.5 XopXccN對MAPK激酶活性的抑制發(fā)生在AtMKK5的下游
    3.6 XopXccN可以與MKK5在原生質(zhì)體內(nèi)發(fā)生相互作用
    3.7 XopXccN可以抑制鞭毛蛋白誘導(dǎo)的標(biāo)志基因FRK1表達，并且這種抑制依賴于XopXccN全長蛋白
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
致謝



本文編號：3625355