植物內(nèi)生菌及根際微生物產(chǎn)生的功能性代謝產(chǎn)物能為宿主植物提供一定的營養(yǎng),還可提高宿主的抗病性和抗逆性。實驗材料“川草2號”老芒麥、“川西”肅草、“阿壩”垂穗披堿草是3種優(yōu)良新品種牧草。通過平板分離法,從3種牧草分離獲得根際微生物和內(nèi)生菌共173種,其中真菌22種、細菌151種。對各菌株進行抗小麥赤霉病和促進生長功能評價結(jié)果表明,4株真菌及61株細菌可產(chǎn)生吲哚乙酸（IAA）,濃度范圍為0.02～14.75 mg/L,菌株P(guān)J81產(chǎn)量最高為14.75 mg/L;有8株真菌和93株細菌可產(chǎn)生赤霉素（GA₃）,濃度范圍為11.03～468.91 mg/L,其中PJ119產(chǎn)量最高為468.91mg/L;9株真菌及85株細菌可產(chǎn)鐵載體;有5株真菌和77株細菌能夠降解纖維素。不同菌株抑制病原菌效果存在差異,抑菌率范圍為:43.35%-82.76%。綜合分析分離各菌株能力表明,菌株P(guān)J22、PJ68、PJ73和PJ81均具上述的抗病和促生能力。真菌菌株中無同時具備促生及抗病能力的菌株,菌株P(guān)J161在真菌中產(chǎn)生IAA能力最強,達8.76 mg/L,PJ112真菌產(chǎn)生GA_3... 

【文章來源】：西華師范大學(xué)四川省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

實驗技術(shù)路線

第二章材料與方法9第二章材料與方法2.1試驗材料2.1.1樣品采集材料“川草2號”老芒麥，“阿壩”垂穗披堿草和“川西”肅草來自四川省阿壩藏族羌族自治州紅原縣（如圖2-1），由四川省草原科學(xué)研究院提供（海拔3472m）。樣品采集方式采取連根拔起的方式。樣品采集地點的海拔高度及經(jīng)緯度如表2-1所示。圖2-1材料采集點Figure.2-1Collectionpointsofplantmaterialsusedinthisstudy表2-1牧草樣品采集地點Table.2-1Thelocationofthesamplingpoints牧草海拔/m經(jīng)度/E緯度/N“川草2號”老芒麥3475102.5453°32.7775°“川西”肅草3470102.5454°32.7776°“阿壩”垂穗披堿草3472102.5456°32.7776°2.1.2實驗主要試劑本實驗主要采用蛋白胨、NaCl、瓊脂粉、葡萄糖、酵母膏、牛肉膏、酪蛋白、胰蛋白胨、MgSO4·7H2O、麥芽浸膏、萘啶酮酸、放線菌酮、鉻天青、FeCl3、Na2HPO4、KH2PO4、NH4Cl、哌嗪二乙磺酸等試劑。

塊CAS檢測培養(yǎng)基上點種菌餅，重復(fù)3次。分別置于30℃下恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)細菌3d；28℃下培養(yǎng)真菌7d。菌落周圍穿線黃色暈圈為陽性，無黃色暈圈則為陰性，測定并記錄水解圈大校2.2.5微生物抑菌效果采用平板對峙培養(yǎng)[123]。菌株培養(yǎng)及菌餅制備參照2.2.4.3），將菌餅（6mm）接種到中部接種了赤霉病病原菌菌餅(6mm)且培養(yǎng)了的PDA培養(yǎng)基（80mm）。進行對峙培養(yǎng)7d。以未加細菌的的接種了赤霉病原菌的培養(yǎng)基作為空白對照。對有抑菌效果的細菌測定其抑菌效果，抑菌效率=（對照組病原菌直徑-實驗組病原菌直徑）/對照組病原菌直徑。圖2-2離體拮抗實驗Figure.2-2Thediagramofantagonisticinvitro2.2.6目標(biāo)菌株系統(tǒng)發(fā)育地位分析2.2.6.1細菌DNA提取取3mL培養(yǎng)菌液，10000xg離心2min。倒掉上清液，加入180μLTE緩沖液，18μL50mg/mL溶菌酶、5μLRNA酶（20mg/L），30℃水浴30min。5000xg離心5min，取10μL上清液。加入25mgGlassBeads和200μLBufferTL，渦旋5min，靜置，取上清至1.5mL離心管。加25uL蛋白酶K，渦旋10s，瞬時離心。50℃水浴30min，每隔3min渦旋一次。10000xg離心2min，取上清至新離心管。加220uLBufferBL，混勻后于65℃水浴10min。加入220μL無水乙醇，渦旋20s。轉(zhuǎn)移混合液于吸附柱，10000xg離心1min。將吸附柱放入另一收集管，加500μLBufferKB，10000xg離心1min，倒掉廢液。加入650μLDNAWashBuffer，10000xg離心1min，倒掉廢液。加450μLDNAWashBuffer，

【參考文獻】：
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碩士論文
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本文編號：3575841