除草劑和殺蟲劑的使用不當(dāng)對(duì)生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生了一定程度的污染,并且一直以來(lái)都以混合應(yīng)用的方式應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,這使對(duì)農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境以及生物安全的評(píng)價(jià)更加復(fù)雜。阿特拉津（Atrazine）是三氮苯類農(nóng)藥,是常用的除草劑,而毒死蜱（Chlorpyrifos）是有機(jī)磷類農(nóng)藥,是常用的殺蟲劑,這兩種都是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的農(nóng)藥,大量的農(nóng)藥通過(guò)地表徑流、淋溶、干/濕沉降等方式進(jìn)入水體后不但對(duì)大型水生植物和浮游藻類產(chǎn)生毒害作用,同時(shí)也會(huì)對(duì)包括魚類在內(nèi)的大量水生動(dòng)物也有一定的毒理效應(yīng)。這兩種農(nóng)藥的大量使用對(duì)動(dòng)物表現(xiàn)出一定的毒性作用,因?yàn)槠錃埩羝陂L(zhǎng)并且在水體環(huán)境中檢出率高,所以近年來(lái)受到了廣泛的關(guān)注。本文以鯉魚為供試動(dòng)物,研究阿特拉津（4.28、42.8和428μg/L）、毒死蜱（1.16、11.6和116μg/L）以及二者聯(lián)合（1.13、11.3和113μg/L）亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟組織細(xì)胞因子基因（IL-6、IL-8、IL-10、TNF-a和TGF-β）表達(dá)和組織自噬相關(guān)基因（LC3、dynein和TOR）表達(dá)、頭腎和脾臟的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)及抗氧化酶（ASA, AHR、POD）、氧化氮（NO）和誘導(dǎo)型一... 

【文章來(lái)源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 細(xì)胞因子在毒理學(xué)中的應(yīng)用
    1.2 鯉魚頭腎和脾臟的形態(tài)學(xué)研究
    1.3 自噬與毒理學(xué)的研究
    1.4 抗氧化在免疫毒理學(xué)的作用
    1.5 目的與意義
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)魚的馴養(yǎng)及暴露環(huán)境
    2.2 試驗(yàn)的總體設(shè)計(jì)
        2.2.1 暴露試驗(yàn)
        2.2.2 恢復(fù)試驗(yàn)
    2.3 樣品的采集與處理
    2.4 主要儀器和試劑
        2.4.1 試驗(yàn)毒物
        2.4.2 主要儀器
        2.4.3 主要試劑
    2.5 檢測(cè)項(xiàng)目與方法
        2.5.1 組織抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)
        2.5.2 組織超微結(jié)構(gòu)的觀察
    2.6 鯉魚頭腎和脾臟中自噬和細(xì)胞因子相關(guān)基因mRNA表達(dá)的檢測(cè)
        2.6.1 引物的設(shè)計(jì)與合成
        2.6.2 總RNA的提取
        2.6.3 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
        2.6.4 實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增
        2.6.5 PfaffL法分析基因表達(dá)的相對(duì)差異
    2.7 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析與統(tǒng)計(jì)
3 結(jié)果與分析
    3.1 組織自噬體觀察結(jié)果
    3.2 鯉魚頭腎和脾臟自噬和細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的檢測(cè)結(jié)果
        3.2.1 實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)方法的建立
        3.2.2 鯉魚頭腎和脾臟自噬、細(xì)胞因子和β-actine real-time PCR擴(kuò)增結(jié)果
        3.2.3 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟LC3 mRNA表達(dá)影響檢測(cè)結(jié)果
        3.2.4 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟dynein mRNA表達(dá)影響檢測(cè)結(jié)果
        3.2.5 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟TOR mRNA表達(dá)影響檢測(cè)結(jié)果
        3.2.6 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟IL-6 mRNA表達(dá)影響檢測(cè)結(jié)果
        3.2.7 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟IL-8 mRNA表達(dá)影響檢測(cè)結(jié)果
        3.2.8 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟TNF-α mRNA表達(dá)影響檢測(cè)結(jié)果
        3.2.9 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟IL-10 mRNA表達(dá)影響檢測(cè)結(jié)果
        3.2.10 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟TGF-β mRNA表達(dá)影響結(jié)果
    3.3 鯉魚頭腎和脾臟組織抗氧化功能的檢測(cè)結(jié)果
        3.3.1 頭腎和脾臟中抗超氧陰離子活力的檢測(cè)結(jié)果
        3.3.2 鯉魚頭腎和脾臟中抗羥自由基活力的檢測(cè)結(jié)果
        3.3.3 鯉魚頭腎和脾臟中過(guò)氧化物酶活力的檢測(cè)結(jié)果
        3.3.4 鯉魚頭腎和脾臟中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶活性的檢測(cè)結(jié)果
        3.3.5 鯉魚頭腎和脾臟中一氧化氮水平的檢測(cè)結(jié)果
4 討論
    4.1 ATR和CFP單一及聯(lián)合亞慢性暴露后對(duì)鯉魚頭腎和脾臟細(xì)胞因子的影響
        4.1.1 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟IL-6、IL-8和TNF-αmRNA表達(dá)影響
        4.1.2 ATR和CFP亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟IL-10和TGF-p mRNA表達(dá)的影響
    4.2 ATR和CFP單一及聯(lián)合亞慢性暴露后對(duì)鯉魚頭腎和脾臟自噬體和相關(guān)基因影響
    4.3 ATR和CFP單一及聯(lián)合亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟抗氧化功能的影響
        4.3.1 ATR和CFP單一及聯(lián)合亞慢性暴露后對(duì)鯉魚頭腎和脾臟組中抗超氧陰離子,抗羥自由基和過(guò)氧化物酶活力的影響
        4.3.2 ATR和CFP單一及聯(lián)合亞慢性暴露后對(duì)鯉魚頭腎和脾臟組中對(duì)NO含量和iNOS活性的影響
    4.4 ATR和CFP單一及聯(lián)合亞慢性暴露對(duì)鯉魚頭腎和脾臟自噬和抗氧化功能的影響
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：3569415