本研究以轉Psc-AFP基因抗病煙草(T-PA)、轉LJAMP2基因抗病煙草(T-Lj)、野生型親本煙草(WT)和轉空載質粒煙草(T-Vi)根圍土樣為研究對象,研究煙草根際土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)目、土壤酶活性、理化性質和細菌群落多樣性的變化。同時,還探討了連作2年、10年和15年甘藍根圍土壤微生物的變化。其研究結果如下:1.轉抗病基因煙草對土壤微生態(tài)的影響1.1轉抗病基因煙草對土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)量、土壤酶活和理化性質的影響(1)轉抗病煙草對土壤可培養(yǎng)微生物的影響根際土壤微生物數(shù)量隨著煙草的生長發(fā)育而變化,在旺長期或者成熟期達到最大。同一時期不同處理煙草微生物數(shù)量有所不同。前三個時期,T-PA抗病煙草與WT煙草比較,細菌、真菌和放線菌的數(shù)量均未達到顯著性差異,只在成熟期達顯著性差異;T-Lj抗病煙草在旺長期達到顯著性差異,其他三個時期差異不大。表明T-PA、T-Lj抗病煙草對根際土壤可培養(yǎng)微生物數(shù)量具有影響,但是這種影響并不是持續(xù)不變的,會隨著生長發(fā)育的不同而發(fā)生改變。.(2)T-PA抗病煙草對根際土壤酶活性的影響過氧化氫酶、蔗糖酶、酸性磷酸酶和脲酶隨著煙草的生長發(fā)育時期不同而變化,在同一生...

【文章來源】： 西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

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【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 文獻綜述
    1.1 轉基因植物的發(fā)展概況
        1.1.1 轉基因技術
        1.1.2 轉基因作物種植現(xiàn)狀
        1.1.3 轉補骨脂植物的研究進展
        1.1.4 轉LJAMP2植物的研究進展
    1.2 轉基因植物的安全性研究
    1.3 轉基因植物對土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響
        1.3.1 GM植物對土壤理化性質的影響
        1.3.2 GM植物對土壤酶活性的影響
        1.3.3 GM植物對土壤微生物的影響
    1.4 植物連作障礙
    1.5 連作植物對土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響
    1.6 土壤微生物多樣性研究方法
        1.6.1 微生物平板培養(yǎng)法
        1.6.2 Biolog微平板法
        1.6.3 磷脂脂肪酸方法
        1.6.4 單鏈構象多態(tài)性
        1.6.5 變性梯度凝膠電泳
2 引言
    2.1 論文立題依據(jù)
    2.2 論文技術路線
    2.3 研究內容及目的意義
        2.3.1 研究內容
        2.3.2 研究目的及意義
3 轉Psc-AFP抗病煙草不同生長期對根際土壤環(huán)境的影響
    3.1 試驗材料
        3.1.1 煙草的種植
        3.1.2 土壤的采集與保存
    3.2 實驗方法
        3.2.1 煙草根際土壤微生物數(shù)量的測定
        3.2.2 煙草根際土壤酶活的測定
        3.2.3 煙草根際土壤理化性質的測定
        3.2.4 數(shù)據(jù)處理
    3.3 實驗結果與分析
        3.3.1 微生物數(shù)量的變化
        3.3.2 土壤酶活性變化
        3.3.3 土壤理化性質變化
    3.4 討論
    3.5 小結
4 PCR-DGGE分析轉Psc-AFP抗病煙草根際土壤細菌多樣性
    4.1 實驗方法
        4.1.1 土壤微生物總DNA的提取
        4.1.2 土壤細菌16S rRNA基因的PCR擴增
        4.1.3 變性梯度凝膠電泳DGGE
        4.1.4 染色
        4.1.5 DGGE條帶回收DNA片段并擴增
        4.1.6 16S rRNA V3區(qū)基因片段克隆
        4.1.7 16S rRNA V3區(qū)基因片段(陽性克隆)序列測定
        4.1.8 數(shù)據(jù)分析
    4.2 實驗結果與分析
        4.2.1 土壤微生物總DNA的檢測
        4.2.2 細菌16S rRNA V3基因的PCR擴增
        4.2.3 DGGE圖譜及特異條帶回收
        4.2.4 DGGE圖譜相關統(tǒng)計分析
    4.3 討論
    4.4 小結
5 PCR-SSCP分析轉LJAMP2抗病煙草對土壤微生物的影響
    5.1 實驗材料
    5.2 實驗方法
        5.2.1 煙草根際土壤微生物數(shù)量的測定
        5.2.2 土壤微生物總DNA的提取
        5.2.3 細菌16S rRNA及V3區(qū)基因的PCR擴增及檢測
        5.2.4 單鏈構象多態(tài)性(SSCP)
    5.3 實驗結果與分析
        5.3.1 土壤微生物數(shù)量的測定
        5.3.2 PCR-SSCP圖譜相關分析
    5.4 討論
    5.5 小結
6 PCR-DGGE分析武隆甘藍連作根際土壤細菌多樣性變化
    6.1 研究材料
    6.2 實驗結果和分析
        6.2.1 土壤理化性質
        6.2.2 甘藍連作對土壤酶活性的影響
        6.2.3 甘藍連作對土壤可培養(yǎng)微生物的影響
        6.2.4 甘藍連作土壤中細菌16S rDNA多態(tài)性分析
        6.2.5 細菌16S rDNA片段的序列分析
    6.3 討論
    6.4 小結
7 結論
    7.1 轉Psc-AFP抗病煙草對根際土壤環(huán)境及細菌多樣性的影響
    7.2 轉LJAMP2抗病煙草對根際土壤微生物的影響
    7.3 連作甘藍對根際土壤環(huán)境及細菌多樣性的影響
參考文獻
附錄
致謝
研究生期間發(fā)表論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同耕作處理結合施肥、秸稈還田對土壤微生物多樣性的影響 [J]. 呂春莎,王鴻斌,周薇.  安徽農學通報. 2013(24)
[2]轉基因(LJAMP2)煙草對紫色土根際微生物和酶的影響 [J]. 王兵,楊星勇,郭濤,張兵新,閆文慧,申鴻.  西南大學學報(自然科學版). 2013(05)
[3]除草劑丁草胺對高產(chǎn)水稻土微生物群落功能多樣性的影響 [J]. 張仕穎,夏運生,肖煒,崔曉龍,王永霞,史靜,張乃明.  生態(tài)環(huán)境學報. 2013(05)
[4]根癌農桿菌介導大豆轉Bt-cryIA抗蟲基因 [J]. 藍嵐,吳帥,申麗威,王志坤,孟凡立,宋波,拓云,劉珊珊.  中國油料作物學報. 2013(01)
[5]DGGE技術在土壤微生物多樣性分析上的研究進展 [J]. 劉權鋼,金東淳,劉敬愛.  延邊大學農學學報. 2012(02)
[6]花生連作對土壤酶活性的影響 [J]. 黃玉茜,韓立思,韓梅,肖亦農,楊勁峰,韓曉日.  中國油料作物學報. 2012(01)
[7]2011年全球生物技術/轉基因作物商業(yè)化發(fā)展態(tài)勢 [J]. Clive James.  中國生物工程雜志. 2012(01)
[8]非洲菊連作對土壤理化性狀與生物性狀的影響 [J]. 馬海燕,徐瑾,鄭成淑,孫霞,束懷瑞.  中國農業(yè)科學. 2011(18)
[9]轉抗菌肽基因毛白楊的培育及其對潰瘍病的抗性 [J]. 賈之春,孫一銘,秦志超,肖訓焰,齊代華,羅克明.  林業(yè)科學. 2011(07)
[10]轉雙價(Bt+CpTI)棉種植對土壤速效養(yǎng)分和酶活性的影響 [J]. 娜布其,趙建寧,李剛,楊殿林,紅雨,娜日蘇,劉玲.  農業(yè)環(huán)境科學學報. 2011(05)



本文編號：3544211