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叢枝菌根真菌14-3-3蛋白在共生信號(hào)傳導(dǎo)以及非生物脅迫反應(yīng)的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-11-04 21:46
  叢枝菌根(AM)真菌是一種土傳真菌,屬于古老的球囊菌門(mén),是叢枝菌根的重要共生體,增強(qiáng)植物養(yǎng)分的獲取和對(duì)各種非生物逆境的抗性的重要來(lái)源。與其顯著的生理意義相反,所涉及的分子基礎(chǔ)尚不清楚,主要是由于它們的專性生物營(yíng)養(yǎng)和復(fù)雜的遺傳學(xué)。14-3-3蛋白是一種高度保守的蛋白質(zhì)家族,它廣泛存在于真核細(xì)胞中,14-3-3的同源或異源二聚體可以通過(guò)與其它蛋白質(zhì)相互作用參與真核生物的信號(hào)傳導(dǎo)和代謝活性。本實(shí)驗(yàn)以摩西球囊霉(Funneliformis mosseae)的Fm201 EST Tag為起點(diǎn),分別從摩西球囊霉(Funneliformis mosseae)和根內(nèi)球囊霉(Rhizophagus irregularis)中分離和鑒定了三個(gè)編碼叢枝菌根真菌14-3-3 like蛋白的編碼基因,并分別命名為Fm201,Ri14-3-3和Ri BMH2。通過(guò)熒光定量分析,發(fā)現(xiàn)Fm201,Ri14-3-3和Ri RMH2的表達(dá)量在前共生(孢子萌發(fā))和共生階段(附著胞形成,根內(nèi)菌絲形成,叢枝形成時(shí)期)中都出現(xiàn)了明顯的激增。因?yàn)槿狈τ行У膮仓婢D(zhuǎn)化系統(tǒng),為了Fm201,Ri14-3-3和Ri BMH2基因編... 

【文章來(lái)源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

叢枝菌根真菌14-3-3蛋白在共生信號(hào)傳導(dǎo)以及非生物脅迫反應(yīng)的作用研究


叢枝菌根的形成過(guò)程

序列,宿主,基因,荷蘭芹


圖 2. 叢枝菌根真菌接受宿主信號(hào)的反應(yīng)通路模式圖Fig. 2 Abasic model of the AM fungi responses to the host signalsBrechenmar 等(2004)利用摩西球囊霉(Funneliformis mosseae)和荷蘭芹(Petroselinum crispum)的共培養(yǎng)體系,構(gòu)建抑制差減雜交文庫(kù)研究附著胞形成時(shí)期真菌的基因表達(dá)差異,并推測(cè)其中有大約 200 個(gè)克隆是菌根共生體特異性的新基因,其中部分基因可能參與共生過(guò)程中鈣信號(hào)調(diào)控途徑(Magadalene and Natalia, 2004)。其中一個(gè)編號(hào)為 201 的 EST 序列,可能編碼一個(gè) 14-3-3-like 蛋白。此外,Porcel R等人(2006) 研究了在干旱環(huán)境下叢枝菌根真菌 R.irregularis 中 14-3-3 基因,并檢測(cè)了該基因共生時(shí)期的差異表達(dá),推測(cè)叢枝菌根真菌可以通過(guò)調(diào)節(jié)該基因的表達(dá),調(diào)節(jié)宿主植物的抗逆性反應(yīng)(Porcel et al., 2006)。Helber 等人(2008)在叢枝菌根真菌的轉(zhuǎn)化方面做了一個(gè)有意思的實(shí)驗(yàn)。通過(guò)基因槍、根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)等方法將帶有叢枝菌根真菌基因的啟動(dòng)子的外源報(bào)告基因GFP 和紅色熒光蛋白 DsRed 轉(zhuǎn)化到叢枝菌根真菌中,并在叢枝菌根真菌里面觀測(cè)熒

示意圖,技術(shù),示意圖,亞型


圖 3 gateway 技術(shù)示意圖Fig. 3 Gateway Technology1.4 14-3-3 蛋白家族介紹14-3-3 蛋白是一類高度保守、分布十分廣泛的多功能真核生物蛋白質(zhì),最初源于 20世紀(jì) 60 年代對(duì)哺乳動(dòng)物腦蛋白進(jìn)行的分類研究(van Hemert et al., 2001a)。該蛋白有著多種亞型,模式生物擬南芥中含有 15 種亞型(Rosenquist et al., 2001)。這些亞型常以同源或者異源二聚體的形式存在,通過(guò)與磷酸化的蛋白質(zhì)相互作用,參與調(diào)節(jié)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞代謝、離子轉(zhuǎn)運(yùn)、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等生命活動(dòng)過(guò)程(H., 2009)。X 射線晶體圖 4 14-3-3 蛋白 3D 結(jié)構(gòu)示意圖Fig. 4 14-3-3 protein 3D structure

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基因表達(dá)與mRNA結(jié)構(gòu)的關(guān)系[J]. 王曉鳳,辛秀娟.  中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志. 2010(06)
[2]真核生物mRNA 3′非翻譯區(qū)的功能[J]. 王海震,王瑩,劉定干.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2008(09)
[3]AM真菌DNA的提取與PCR-DGGE分析[J]. 龍良鯤,羊宋貞,姚青,朱紅惠.  菌物學(xué)報(bào). 2005(04)
[4]類黃酮對(duì)AM真菌及宿主植物的影響研究[J]. 董昌金,周盈,趙斌.  菌物學(xué)報(bào). 2004(02)



本文編號(hào):3476468

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