叢枝菌根真菌14-3-3蛋白在共生信號傳導(dǎo)以及非生物脅迫反應(yīng)的作用研究
發(fā)布時間：2021-11-04 21:46
叢枝菌根（AM）真菌是一種土傳真菌,屬于古老的球囊菌門,是叢枝菌根的重要共生體,增強植物養(yǎng)分的獲取和對各種非生物逆境的抗性的重要來源。與其顯著的生理意義相反,所涉及的分子基礎(chǔ)尚不清楚,主要是由于它們的專性生物營養(yǎng)和復(fù)雜的遺傳學(xué)。14-3-3蛋白是一種高度保守的蛋白質(zhì)家族,它廣泛存在于真核細(xì)胞中,14-3-3的同源或異源二聚體可以通過與其它蛋白質(zhì)相互作用參與真核生物的信號傳導(dǎo)和代謝活性。本實驗以摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）的Fm201 EST Tag為起點,分別從摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）和根內(nèi)球囊霉（Rhizophagus irregularis）中分離和鑒定了三個編碼叢枝菌根真菌14-3-3 like蛋白的編碼基因,并分別命名為Fm201,Ri14-3-3和Ri BMH2。通過熒光定量分析,發(fā)現(xiàn)Fm201,Ri14-3-3和Ri RMH2的表達量在前共生（孢子萌發(fā)）和共生階段（附著胞形成,根內(nèi)菌絲形成,叢枝形成時期）中都出現(xiàn)了明顯的激增。因為缺乏有效的叢枝菌根真菌轉(zhuǎn)化系統(tǒng),為了Fm201,Ri14-3-3和Ri BMH2基因編...
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：74 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
叢枝菌根的形成過程
圖 2. 叢枝菌根真菌接受宿主信號的反應(yīng)通路模式圖Fig. 2 Abasic model of the AM fungi responses to the host signalsBrechenmar 等（2004）利用摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）和荷蘭芹（Petroselinum crispum）的共培養(yǎng)體系，構(gòu)建抑制差減雜交文庫研究附著胞形成時期真菌的基因表達差異，并推測其中有大約 200 個克隆是菌根共生體特異性的新基因，其中部分基因可能參與共生過程中鈣信號調(diào)控途徑(Magadalene and Natalia, 2004)。其中一個編號為 201 的 EST 序列，可能編碼一個 14-3-3-like 蛋白。此外，Porcel R等人(2006) 研究了在干旱環(huán)境下叢枝菌根真菌 R.irregularis 中 14-3-3 基因，并檢測了該基因共生時期的差異表達，推測叢枝菌根真菌可以通過調(diào)節(jié)該基因的表達，調(diào)節(jié)宿主植物的抗逆性反應(yīng)(Porcel et al., 2006)。Helber 等人（2008）在叢枝菌根真菌的轉(zhuǎn)化方面做了一個有意思的實驗。通過基因槍、根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)等方法將帶有叢枝菌根真菌基因的啟動子的外源報告基因GFP 和紅色熒光蛋白 DsRed 轉(zhuǎn)化到叢枝菌根真菌中，并在叢枝菌根真菌里面觀測熒
圖 3 gateway 技術(shù)示意圖Fig. 3 Gateway Technology1.4 14-3-3 蛋白家族介紹14-3-3 蛋白是一類高度保守、分布十分廣泛的多功能真核生物蛋白質(zhì)，最初源于 20世紀(jì) 60 年代對哺乳動物腦蛋白進行的分類研究(van Hemert et al., 2001a)。該蛋白有著多種亞型，模式生物擬南芥中含有 15 種亞型(Rosenquist et al., 2001)。這些亞型常以同源或者異源二聚體的形式存在，通過與磷酸化的蛋白質(zhì)相互作用，參與調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞代謝、離子轉(zhuǎn)運、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等生命活動過程(H., 2009)。X 射線晶體圖 4 14-3-3 蛋白 3D 結(jié)構(gòu)示意圖Fig. 4 14-3-3 protein 3D structure
【參考文獻】：
期刊論文
[1]基因表達與mRNA結(jié)構(gòu)的關(guān)系[J]. 王曉鳳,辛秀娟. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2010(06)
[2]真核生物mRNA 3′非翻譯區(qū)的功能[J]. 王海震,王瑩,劉定干. 生物化學(xué)與生物物理進展. 2008(09)
[3]AM真菌DNA的提取與PCR-DGGE分析[J]. 龍良鯤,羊宋貞,姚青,朱紅惠. 菌物學(xué)報. 2005(04)
[4]類黃酮對AM真菌及宿主植物的影響研究[J]. 董昌金,周盈,趙斌. 菌物學(xué)報. 2004(02)
本文編號：3476468
【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：74 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
叢枝菌根的形成過程
圖 2. 叢枝菌根真菌接受宿主信號的反應(yīng)通路模式圖Fig. 2 Abasic model of the AM fungi responses to the host signalsBrechenmar 等（2004）利用摩西球囊霉（Funneliformis mosseae）和荷蘭芹（Petroselinum crispum）的共培養(yǎng)體系，構(gòu)建抑制差減雜交文庫研究附著胞形成時期真菌的基因表達差異，并推測其中有大約 200 個克隆是菌根共生體特異性的新基因，其中部分基因可能參與共生過程中鈣信號調(diào)控途徑(Magadalene and Natalia, 2004)。其中一個編號為 201 的 EST 序列，可能編碼一個 14-3-3-like 蛋白。此外，Porcel R等人(2006) 研究了在干旱環(huán)境下叢枝菌根真菌 R.irregularis 中 14-3-3 基因，并檢測了該基因共生時期的差異表達，推測叢枝菌根真菌可以通過調(diào)節(jié)該基因的表達，調(diào)節(jié)宿主植物的抗逆性反應(yīng)(Porcel et al., 2006)。Helber 等人（2008）在叢枝菌根真菌的轉(zhuǎn)化方面做了一個有意思的實驗。通過基因槍、根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)等方法將帶有叢枝菌根真菌基因的啟動子的外源報告基因GFP 和紅色熒光蛋白 DsRed 轉(zhuǎn)化到叢枝菌根真菌中，并在叢枝菌根真菌里面觀測熒
圖 3 gateway 技術(shù)示意圖Fig. 3 Gateway Technology1.4 14-3-3 蛋白家族介紹14-3-3 蛋白是一類高度保守、分布十分廣泛的多功能真核生物蛋白質(zhì)，最初源于 20世紀(jì) 60 年代對哺乳動物腦蛋白進行的分類研究(van Hemert et al., 2001a)。該蛋白有著多種亞型，模式生物擬南芥中含有 15 種亞型(Rosenquist et al., 2001)。這些亞型常以同源或者異源二聚體的形式存在，通過與磷酸化的蛋白質(zhì)相互作用，參與調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞代謝、離子轉(zhuǎn)運、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等生命活動過程(H., 2009)。X 射線晶體圖 4 14-3-3 蛋白 3D 結(jié)構(gòu)示意圖Fig. 4 14-3-3 protein 3D structure
【參考文獻】：
期刊論文
[1]基因表達與mRNA結(jié)構(gòu)的關(guān)系[J]. 王曉鳳,辛秀娟. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2010(06)
[2]真核生物mRNA 3′非翻譯區(qū)的功能[J]. 王海震,王瑩,劉定干. 生物化學(xué)與生物物理進展. 2008(09)
[3]AM真菌DNA的提取與PCR-DGGE分析[J]. 龍良鯤,羊宋貞,姚青,朱紅惠. 菌物學(xué)報. 2005(04)
[4]類黃酮對AM真菌及宿主植物的影響研究[J]. 董昌金,周盈,趙斌. 菌物學(xué)報. 2004(02)
本文編號：3476468
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