本研究以酚酸類物質(zhì)肉桂酸為研究對(duì)象,采用富集培養(yǎng)、稀釋涂布的方法,從連作黃瓜根際土壤中分離篩選肉桂酸降解菌株,并對(duì)其中兩株能夠高效降解肉桂酸的菌株進(jìn)行了生物學(xué)鑒定、降解能力、降解特性和生物功能測(cè)定,并通過降解液種子發(fā)芽試驗(yàn)和溫室土培試驗(yàn)驗(yàn)證了降解菌株對(duì)肉桂酸的降解效果。主要研究結(jié)果如下：（1）從連作黃瓜根際土壤中篩選得到1株肉桂酸降解真菌2-4和1株降解細(xì)菌42-3；通過形態(tài)學(xué)、生理生化及分子等多相分類法初步鑒定為黑曲霉（Aspergillus niger）和惡臭假單胞菌（Pseudomonas putida）,其在山東農(nóng)業(yè)微生物菌種資源保藏管理中心的保藏編號(hào)為AMCC300047、AMCC100141。（2）在含2.0mmol·L-1肉桂酸的無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下,運(yùn)用紫外分光光度法測(cè)定了降解真菌2-4和降解細(xì)菌42-3的降解率和菌體生長(zhǎng)量。在pH7.0、溫度30℃、轉(zhuǎn)速160r.min-1條件下,降解細(xì)菌能夠在12h內(nèi)達(dá)到99.35%的降解率,降解真菌72h達(dá)99.62%降解率。（3）通過單因素試驗(yàn)對(duì)降解菌進(jìn)行降解特性測(cè)定,結(jié)果表明：降解真菌2-4適宜降解的溫度條件為30℃-3... 

【文章來源】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 蔬菜連作障礙
    1.2 蔬菜連作障礙研究進(jìn)展
        1.2.1 化感物質(zhì)
        1.2.2 化感作用與自毒作用
    1.3 連作障礙的栽培技術(shù)防治研究
    1.4 連作障礙的生物防治研究
        1.4.1 生防功能有益微生物
        1.4.2 降解功能有益微生物
    1.5 降解微生物降解機(jī)理的研究
        1.5.1 生物降解
        1.5.2 降解代謝途徑
    1.6 本研究的立項(xiàng)依據(jù)、研究?jī)?nèi)容與技術(shù)路線
        1.6.1 立項(xiàng)依據(jù)
        1.6.2 研究?jī)?nèi)容
        1.6.3 技術(shù)路線
2 材料與方法
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 樣品的采集
        2.1.2 儀器設(shè)備
        2.1.3 生化試劑
        2.1.4 供試病原菌及黃瓜品種
        2.1.5 主要培養(yǎng)基的配置
            2.1.5.1 分離培養(yǎng)基
            2.1.5.2 鑒定培養(yǎng)基
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 肉桂酸降解菌的篩選濃度
        2.2.2 肉桂酸降解菌的篩選
            2.2.2.1 以肉桂酸為唯一碳源的微生物富集
            2.2.2.2 以肉桂酸為唯一碳源的微生物的分離及純化
            2.2.2.3 以肉桂酸為唯一碳源的微生物的馴化驗(yàn)證
        2.2.3 肉桂酸降解菌降解體系的建立
            2.2.3.1 肉桂酸標(biāo)準(zhǔn)吸光曲線的測(cè)定
            2.2.3.2 細(xì)胞懸液的制備
            2.2.3.3 分光光度法測(cè)定
            2.2.3.4 高效液相色譜分析
        2.2.4 肉桂酸降解菌的生物學(xué)鑒定
            2.2.4.1 形態(tài)學(xué)鑒定
            2.2.4.2 生理生化鑒定
            2.2.4.3 分子鑒定
        2.2.5 肉桂酸降解菌的降解特性測(cè)定
            2.2.5.1 培養(yǎng)初始pH
            2.2.5.2 培養(yǎng)溫度
            2.2.5.3 底物濃度
            2.2.5.4 底物專一性
        2.2.6 肉桂酸降解菌的生物功能測(cè)定
            2.2.6.1 降解真菌2-4對(duì)病原菌生長(zhǎng)的影響
            2.2.6.2 降解細(xì)菌42-3發(fā)酵液對(duì)黃瓜種子發(fā)芽的影響
            2.2.6.3 降解細(xì)菌42-3菌體對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)的影響
        2.2.7 肉桂酸降解菌的降解液對(duì)黃瓜種子發(fā)芽試驗(yàn)
            2.2.7.1 試驗(yàn)材料
            2.2.7.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            2.2.7.3 測(cè)定方法
        2.2.8 肉桂酸降解菌的溫室土培試驗(yàn)
            2.2.8.1 試驗(yàn)材料
            2.2.8.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
            2.2.8.3 測(cè)定方法
        2.2.9 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 肉桂酸降解菌篩選濃度的確定
    3.2 肉桂酸降解菌的篩選結(jié)果
    3.3 肉桂酸降解菌的降解體系
        3.3.1 肉桂酸的標(biāo)準(zhǔn)吸光曲線
        3.3.2 分光光度法測(cè)定降解率和菌體生長(zhǎng)
        3.3.3 高效液相降解圖譜
    3.4 肉桂酸降解菌的生物學(xué)鑒定
        3.4.1 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
            3.4.1.1 細(xì)菌形態(tài)特征
            3.4.1.2 真菌形態(tài)特征
        3.4.2 生理生化鑒定結(jié)果
        3.4.3 分子鑒定結(jié)果
    3.5 肉桂酸降解菌的降解特性
        3.5.1 最適pH
        3.5.2 最適溫度
        3.5.3 最適底物濃度
        3.5.4 降解廣譜性
    3.6 肉桂酸降解菌的生物功能
        3.6.1 降解真菌2-4對(duì)病原菌的平板對(duì)峙結(jié)果
        3.6.2 降解細(xì)菌42-3發(fā)酵液對(duì)黃瓜種子發(fā)芽結(jié)果
        3.6.3 降解細(xì)菌42-3菌體對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)結(jié)果
    3.7 肉桂酸降解菌的降解液對(duì)黃瓜種子發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)果
        3.7.1 種子發(fā)芽結(jié)果
        3.7.2 幼苗生長(zhǎng)量
        3.7.3 抗氧化酶活性
        3.7.4 可溶性蛋白及可溶性糖含量
        3.7.5 丙二醛含量
    3.8 肉桂酸降解菌的溫室土培試驗(yàn)結(jié)果
        3.8.1 不同處理對(duì)黃瓜株高的影響
        3.8.2 不同處理對(duì)黃瓜莖粗的影響
        3.8.3 不同處理對(duì)黃瓜葉面積的影響
        3.8.4 不同處理對(duì)黃瓜幼苗干鮮重的影響
4 討論
    4.1 肉桂酸降解菌的篩選
    4.2 肉桂酸降解菌的降解體系評(píng)價(jià)
    4.3 肉桂酸降解菌的降解特性
    4.4 肉桂酸降解菌的生物功能
    4.5 肉桂酸降解菌的降解液對(duì)黃瓜種子發(fā)芽的影響
    4.6 肉桂酸降解菌的溫室土培降解效果
    4.7 關(guān)于試驗(yàn)中存在的問題和進(jìn)一步研究的設(shè)想
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]環(huán)渤海灣蘋果產(chǎn)區(qū)再植障礙園與豐產(chǎn)園土壤細(xì)菌遺傳多樣性分析[D]. 張一.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]楊樹人工林連作酚酸生物降解的研究[D]. 王宗芹.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]黃瓜幼苗對(duì)苯丙烯酸脅迫的生理響應(yīng)及外源NO的緩解作用研究[D]. 王文.西南大學(xué) 2010
[4]草莓酚酸類自毒物質(zhì)降解菌篩選及對(duì)草莓防病促生作用研究[D]. 杜霄霞.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
[5]肉桂醛和肉桂酸生物降解及其轉(zhuǎn)化產(chǎn)物跟蹤分析[D]. 暴瑋.廣西大學(xué) 2008
[6]白腐菌對(duì)黃瓜連作障礙修復(fù)作用研究[D]. 尤曉顏.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[7]黃瓜根系分泌物中化感物質(zhì)的鑒定及其生物降解研究[D]. 杜國(guó)營(yíng).河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[8]嫁接黃瓜連作障礙的研究[D]. 戚建華.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2004



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