昆蟲細胞培養(yǎng)對昆蟲細胞-桿狀病毒生物技術的應用以及對醫(yī)學、農(nóng)業(yè)、及生物學的各個領域的發(fā)展都起著重要作用。本文以鱗翅目（Lepidoptera）夜蛾科（Noctuidae）的棉鈴蟲（Helicoverpa armigera）卵為實驗材料,建立了一個新的棉鈴蟲胚胎細胞系。本實驗主要從棉鈴蟲胚胎細胞系的建立、培養(yǎng)、生物學特性以及昆蟲細胞系利用等方面進行了研究。新棉鈴蟲胚胎細胞系的建立不但為離體條件下進行相關的分子生物學等實驗研究提供了潛在材料,也為昆蟲細胞系的培養(yǎng)等相關研究奠定了一定的基礎。主要的研究結果如下:1.棉鈴蟲胚胎細胞系Ha168的建立使用含有10%的TNM-FH培養(yǎng)基對棉鈴蟲胚胎細胞體外培養(yǎng),歷時將近兩年的培養(yǎng),最終建立了一個生物學特性穩(wěn)定且生長良好且可以穩(wěn)定傳代的細胞系,命名為Ha168。2.棉鈴蟲胚胎細胞系Ha168的鑒定（1）細胞形態(tài)特征:Ha168細胞系為貼壁生長型細胞,以圓形,梭形細胞為主,還有少量的巨型細胞,其中圓形細胞約占77%,大小為14.30±2.804μm,n=100;梭形細胞約占20%,大小為12.04±2.928×47.09±12.674μm,n=100。... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術路線圖

鈴蟲胚胎細胞系的建立 2016 年 8 月開始進行棉鈴蟲胚胎細胞的培養(yǎng)，棉鈴蟲胚胎細胞培養(yǎng)初周后可以觀察到明顯的有長條形的細胞伸出，長到第二個多月的時候 25cm2的細胞培養(yǎng)瓶底部。細胞貼壁生長并呈圓形、梭形等，組織塊胞長出。培養(yǎng)一個月時便可以觀察到貼壁的細胞之間開始連接，并呈網(wǎng)些網(wǎng)狀生長的細胞會抽動，網(wǎng)狀生長的細胞周圍出現(xiàn)少量的分散細胞（到第二個月時，可以觀察到細胞團周圍開始有很多單個生長的細胞，以增殖(圖 2-2)。待細胞鋪滿瓶底時開始第一次傳代。隨著傳次數(shù)的增細胞團逐漸消失，細胞增殖現(xiàn)象明顯。傳到第 8 代時，觀察到 Ha168 團逐漸較少，分散的細胞占大多數(shù)（圖 2-3）。傳至第 16 代以后，Ha本上都是分散的單個細胞（圖 2-4）。到目前為止 Ha168 細胞系以經(jīng)

圖 2- 2 原代培養(yǎng)兩個月后的 Ha168 細胞形態(tài)（標尺=50um）. 2-2 Photomicrograph of Ha168 cells after 2 months of primary culture（Scale bar:50

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3394014