發(fā)布時間：2021-09-12 09:53

　　昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)對昆蟲細(xì)胞-桿狀病毒生物技術(shù)的應(yīng)用以及對醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)、及生物學(xué)的各個領(lǐng)域的發(fā)展都起著重要作用。本文以鱗翅目（Lepidoptera）夜蛾科（Noctuidae）的棉鈴蟲（Helicoverpa armigera）卵為實(shí)驗(yàn)材料,建立了一個新的棉鈴蟲胚胎細(xì)胞系。本實(shí)驗(yàn)主要從棉鈴蟲胚胎細(xì)胞系的建立、培養(yǎng)、生物學(xué)特性以及昆蟲細(xì)胞系利用等方面進(jìn)行了研究。新棉鈴蟲胚胎細(xì)胞系的建立不但為離體條件下進(jìn)行相關(guān)的分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)研究提供了潛在材料,也為昆蟲細(xì)胞系的培養(yǎng)等相關(guān)研究奠定了一定的基礎(chǔ)。主要的研究結(jié)果如下:1.棉鈴蟲胚胎細(xì)胞系Ha168的建立使用含有10%的TNM-FH培養(yǎng)基對棉鈴蟲胚胎細(xì)胞體外培養(yǎng),歷時將近兩年的培養(yǎng),最終建立了一個生物學(xué)特性穩(wěn)定且生長良好且可以穩(wěn)定傳代的細(xì)胞系,命名為Ha168。2.棉鈴蟲胚胎細(xì)胞系Ha168的鑒定（1）細(xì)胞形態(tài)特征:Ha168細(xì)胞系為貼壁生長型細(xì)胞,以圓形,梭形細(xì)胞為主,還有少量的巨型細(xì)胞,其中圓形細(xì)胞約占77%,大小為14.30±2.804μm,n=100;梭形細(xì)胞約占20%,大小為12.04±2.928×47.09±12.674μm,n=100。... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

技術(shù)路線圖

鈴蟲胚胎細(xì)胞系的建立 2016 年 8 月開始進(jìn)行棉鈴蟲胚胎細(xì)胞的培養(yǎng)，棉鈴蟲胚胎細(xì)胞培養(yǎng)初周后可以觀察到明顯的有長條形的細(xì)胞伸出，長到第二個多月的時候 25cm2的細(xì)胞培養(yǎng)瓶底部。細(xì)胞貼壁生長并呈圓形、梭形等，組織塊胞長出。培養(yǎng)一個月時便可以觀察到貼壁的細(xì)胞之間開始連接，并呈網(wǎng)些網(wǎng)狀生長的細(xì)胞會抽動，網(wǎng)狀生長的細(xì)胞周圍出現(xiàn)少量的分散細(xì)胞（到第二個月時，可以觀察到細(xì)胞團(tuán)周圍開始有很多單個生長的細(xì)胞，以增殖(圖 2-2)。待細(xì)胞鋪滿瓶底時開始第一次傳代。隨著傳次數(shù)的增細(xì)胞團(tuán)逐漸消失，細(xì)胞增殖現(xiàn)象明顯。傳到第 8 代時，觀察到 Ha168 團(tuán)逐漸較少，分散的細(xì)胞占大多數(shù)（圖 2-3）。傳至第 16 代以后，Ha本上都是分散的單個細(xì)胞（圖 2-4）。到目前為止 Ha168 細(xì)胞系以經(jīng)

圖 2- 2 原代培養(yǎng)兩個月后的 Ha168 細(xì)胞形態(tài)（標(biāo)尺=50um）. 2-2 Photomicrograph of Ha168 cells after 2 months of primary culture（Scale bar:50

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號：3394014