發(fā)布時間：2021-08-13 08:41

　　重金屬可通過作物根部吸收進入作物體內(nèi),蓄積到一定程度會對作物產(chǎn)生毒害；還可通過食物鏈富集進入人和動物體內(nèi),危害人畜健康。因此,對重金屬污染進行微生態(tài)風(fēng)險評估,建立相應(yīng)的風(fēng)險評估體系是一項重要的任務(wù)；與此同時,篩選優(yōu)良的重金屬修復(fù)菌株,為微生物修復(fù)重金屬污染提供支持也是十分關(guān)鍵的。本研究主要做了兩方面的工作：一,探討重金屬對植物生長的影響,綜合考察重金屬污染對土壤細菌群落的影響,并初步研究了重金屬、微生物和植物生長三者之間的相互影響；二,從重金屬污染土樣中篩選耐受細菌,研究其耐受能力及修復(fù)能力,為重金屬污染的微生物修復(fù)提供一定的支持。研究采用室內(nèi)盆栽試驗,土壤中添加不同濃度的Cr⁶⁺,移栽入辣椒植株,定期采集土樣及辣椒生長情況記錄,測量土壤pH值和土壤可培養(yǎng)細菌數(shù)量變化。揭示了重金屬Cr⁶⁺與辣椒生長的相關(guān)性：適當濃度的Cr⁶⁺會促進辣椒的生長,當濃度增加時抑制生長的作用逐漸明顯,達到一定濃度時辣椒無法生長,為農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中研究重金屬對農(nóng)作物的影響提供了基礎(chǔ)；Cr⁶⁺的加入對土壤pH基本沒有影響；而隨著C... 

【文章來源】：華東理工大學(xué)上海市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 前言
    1.1 重金屬污染的研究現(xiàn)狀
        1.1.1 重金屬污染對動植物的影響
        1.1.2 重金屬污染對微生物的影響
        1.1.3 重金屬污染修復(fù)措施
    1.2 分子生物學(xué)方法在微生物生態(tài)領(lǐng)域的應(yīng)用
        1.2.1 PCR-DGGE
        1.2.2 16S rDNA末端標記限制性片段長度多態(tài)性分析(T-RFLP)
        1.2.3 454焦磷酸測序
    1.3 本研究目的和意義
    1.4 研究內(nèi)容、技術(shù)路線
        1.4.1 研究內(nèi)容
        1.4.2 技術(shù)路線
第2章 重金屬Cr~(6+)對土壤理化性質(zhì)、可培養(yǎng)細菌數(shù)量的變化及植株生長的影響
    2.1 材料和方法
        2.1.1 培養(yǎng)基配制
        2.1.2 試驗設(shè)計
        2.1.3 土壤取樣
        2.1.4 土壤pH測定
        2.1.5 土壤可培養(yǎng)細菌數(shù)量的測定
        2.1.6 植株生長情況調(diào)查
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 不同濃度重金屬Cr~(6+)與土壤pH的變化關(guān)系
        2.2.2 不同濃度重金屬Cr~(6+)對土壤可培養(yǎng)細菌數(shù)量的影響
        2.2.3 植株(辣椒)生長情況
    2.3 討論
第3章 T-RFLP技術(shù)分析重金屬Cr~(6+)污染土壤細菌群落變化情況
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗藥品、試劑
        3.1.2 實驗溶液
        3.1.3 儀器設(shè)備
        3.1.4 土壤總DNA提取
        3.1.5 土壤總DNA檢測
        3.1.6 土壤細菌16S rDNA基因片段擴增
        3.1.7 PCR產(chǎn)物電泳檢測
        3.1.8 PCR產(chǎn)物回收純化及產(chǎn)物檢測
        3.1.9 PCR回收產(chǎn)物的酶切
        3.1.10 微衛(wèi)星(STR)分析
        3.1.11 T-RFLP數(shù)據(jù)處理及分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 土壤總DNA提取
        3.2.2 土壤細菌16S rDNA基因PCR擴增及純化回收
        3.2.3 T-RFLP圖譜分析
        3.2.4 重金屬Cr~(6+)對辣椒根圍土壤細菌群落的影響
            3.2.4.1 限制性內(nèi)切酶HhaⅠ酶切T-RFLP數(shù)據(jù)分析
            3.2.4.2 限制性內(nèi)切酶HaeⅢ酶切T-RFLP數(shù)據(jù)分析
        3.2.5 辣椒根圍土壤中主要細菌群落的種屬分析
        3.2.6 優(yōu)勢TRF片段相對含量變化分析
        3.2.7 Shannon-Wiener指數(shù)分析
    3.3 討論
第4章 454焦磷酸測序分析重金屬Cr~(6+)污染土壤細菌群落信息
    4.1 材料和方法
        4.1.1 主要試劑和儀器
        4.1.2 樣本準備
        4.1.3 Amplicon文庫的制備
        4.1.4 乳液PCR
        4.1.5 焦磷酸測序反應(yīng)
        4.1.6 生物信息學(xué)數(shù)據(jù)分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 PCR條件摸索
        4.2.2 樣本序列數(shù)目統(tǒng)計
        4.2.3 OTU分析
        4.2.4 稀釋曲線分析
        4.2.5 Alpha多樣性分析(0.97)
        4.2.6 樣本差異性分析
        4.2.7 樣本群落結(jié)構(gòu)分析
    4.3 討論
第5章 重金屬Cr~(6+)耐性細菌的篩選及修復(fù)能力研究
    5.1 實驗材料
        5.1.1 實驗培養(yǎng)基
        5.1.2 實驗儀器
    5.2 實驗方法
        5.2.1 菌株的分離
        5.2.2 菌種的形態(tài)學(xué)鑒定
        5.2.3 分離菌種的耐鉻能力測定
        5.2.4 耐受菌修復(fù)能力檢測
        5.2.5 菌種生理生化鑒定
        5.2.6 分子生物學(xué)鑒定菌種
            5.2.6.1 細菌基因組DNA的提取
            5.2.6.2 16S rDNA鑒定
        5.2.7 耐受菌與病原真菌的相互作用
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 菌種分離
        5.3.2 菌種形態(tài)鑒定
        5.3.3 菌種的耐鉻能力
        5.3.4 耐受菌修復(fù)能力
        5.3.5 生理生化試驗
        5.3.6 菌種分子生物學(xué)鑒定
            5.3.6.1 細菌DNA提取及PCR擴增
            5.3.6.2 測序結(jié)果
            5.3.6.3 系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
        5.3.7 抑菌試驗結(jié)果
    5.4 討論
第6章 總結(jié)與展望
    6.1 總結(jié)
    6.2 展望
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3340112