二化螟Chilo suppressalis（Walker）是水稻上的一種重要害蟲,在我國主要水稻產(chǎn)區(qū)常年暴發(fā)成災(zāi),給水稻生產(chǎn)造成嚴重危害。轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲水稻的成功研制為二化螟的防治提供了新策略。但二化螟對Bt水稻的抗性風險是制約其可持續(xù)應(yīng)用的關(guān)鍵因素。因此,明確害蟲抗性產(chǎn)生的分子機制,制定適宜的抗性治理策略己成為轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻生產(chǎn)應(yīng)用的當務(wù)之急。本文通過對二化螟中腸類鈣粘蛋白基因（Cadherin-like protein, CAD）序列的分析、類鈣粘蛋白多肽片段的體外表達、毒素與多肽片段的結(jié)合、多肽片段對Bt毒素的作用、抗體封閉及RNAi研究等明確了二化螟中腸類鈣粘蛋白基因的功能。主要研究結(jié)果如下：CsCad基因時空表達分析：利用qPCR分析了中腸類鈣粘蛋白基因在二化螟幼蟲不同齡期及不同組織內(nèi)的時空表達情況,發(fā)現(xiàn)在中腸組織中CsCad的表達量顯著高于其他組織；在幼蟲不同齡期中,以1齡幼蟲體內(nèi)的CsCad表達量最高,隨幼蟲齡期的增加,CsCad的表達量呈現(xiàn)先下降、后增長、再下降的趨勢。CsCad的體外表達及結(jié)合研究：通過大腸桿菌Rosseta進行體外表達,得到了大小為38kDa的CR1... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

麟翅目幼蟲中Cry毒素的作用模式（Bravo模型）

1.毒素的溶解；2.前毒素的釋放：3.與BT-R1的結(jié)合及ct-1螺旋解旋；4.形成預(yù)穿孔結(jié)構(gòu)；5.與APN結(jié)合；6.形成孔洞Fig.1-1 Model of the mode of action of Cry toxins in Lepidopteran larva1. Crystal solubilization; 2. Pro-toxin proteolytic activation; 3. Monomer binding to BT-Rl and cleavage of helixa-1; 4. Pre-pore oligomeric structure formation; 5. Oligomer binding to APN; 6. Pore formation二、Zhang模型，又稱為信號轉(zhuǎn)導模型（圖丨-2)，Zhang等（2005, 2006)認為Cry毒素的BT.R 慧.BT-R

最終引起細胞死亡。三、Jurat-Fuentes模型（圖1-3),又稱為滲透溶解和信號轉(zhuǎn)導共同作用模型，Jurat-Fuentes等（2004, 2006)在CrylAc作用于煙廚夜蛾//e//o丨的實驗中結(jié)合上述兩個模型提出的，他們認為活化的CrylAc毒素單體首先和煙廚夜蛾類韓粘蛋白HevCaLP結(jié)合，從而激活了細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導途徑，該途徑不僅受隣酸酶的調(diào)控還依賴于CiylAc毒素與肌動蛋白的直接作用(McNall et a!.’ 2003)；同時，結(jié)合作用促使CrylAc單體寡聚化，與膜上GPI錯定的APN和ALP結(jié)合，使Cry 1 Ac毒素在膜上聚集形成孔洞

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]二化螟和大螟對Bt水稻耐受性差異研究[D]. 韓超.南京農(nóng)業(yè)大學 2011
[2]二化螟Bt毒素受體蛋白—氨肽酶N和鈣粘蛋白基因的克隆及在昆蟲細胞系的表達[D]. 于宏坤.中國農(nóng)業(yè)科學院 2007



本文編號：3261230