灰飛虱Laodelphax striatellus （Fallen）是水稻和小麥等農(nóng)作物上的一種重要害蟲,它的危害方式分為兩種：一是通過刺吸方式取食作物,造成組織損傷； 二是攜帶病毒至水稻、小麥等作物上引發(fā)病毒病。21世紀(jì)之前灰飛虱在我國幾乎沒有發(fā)生,未引起農(nóng)業(yè)生產(chǎn)者的足夠重視,只是在防治褐飛虱（Nilaparvata lugens）與白背飛虱（Sogatella furcifera）的過程中對(duì)其進(jìn)行協(xié)同兼治。近年來,灰飛虱在我國大部分稻區(qū)特別是江蘇、安徽等地頻繁暴發(fā)。面對(duì)其大面積發(fā)生,人們主要通過化學(xué)藥劑進(jìn)行防治。但由于農(nóng)藥的不合理使用,灰飛虱抗性得到不斷上升,灰飛虱頻繁大發(fā)生與其抗藥性的升高緊密相關(guān)。鑒于農(nóng)藥使用導(dǎo)致田間抗性水平不斷提高,以及過量使用農(nóng)藥帶來的一系列環(huán)境與社會(huì)問題,開辟害蟲防控新途徑是當(dāng)今植物保護(hù)領(lǐng)域迫在眉睫的一項(xiàng)科研任務(wù)。鑒于此,本文首先克隆分析潛在的靶標(biāo)基因,探索目標(biāo)基因的沉默是否導(dǎo)致灰飛虱死亡,從而挖掘重要的靶標(biāo)基因,為利用現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)防控灰飛虱提供重要的基因材料和方法啟示,為更好地進(jìn)行灰飛虱抗性治理和新藥開發(fā)提供新的依據(jù)。一、灰飛虱NADPH-細(xì)胞色素P4... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻(xiàn)綜述
    1 灰飛虱生物學(xué)特性
    2 灰飛虱的發(fā)生規(guī)律和防治方法
        2.1 發(fā)生世代和歷期
        2.2 田間發(fā)生規(guī)律
        2.3 危害特點(diǎn)
        2.4 灰飛虱大發(fā)生的原因
        2.5 化學(xué)防治在灰飛虱防控中的作用
    3 細(xì)胞色素P450酶系
        3.1 細(xì)胞色素P450
        3.2 NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶(CPR)
            3.2.1 CPR的功能
            3.2.2 CPR的物種間同源性分析
            3.2.3 細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的昆蟲抗性研究
    4 RNA干擾技術(shù)
        4.1 RNA干擾的定義
        4.2 RNA干擾的分子機(jī)理
        4.3 RNA干擾的應(yīng)用現(xiàn)狀
        4.4 RNAi在生命科學(xué)研究中的作用
        4.5 RNAi技術(shù)方法探討
            4.5.1 昆蟲攝入dsRNA的方式
    5 本文研究的目的和意義
第2章 灰飛虱NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶全長克隆及序列分析
    摘要
    前言
    1 試驗(yàn)材料
        1.1 供試?yán)ハx及飼養(yǎng)
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器設(shè)備
    2 試驗(yàn)方法
        2.1 灰飛虱總RNA提取
        2.2 RNA質(zhì)量的檢測
            2.2.1 引物設(shè)計(jì)
            2.2.2 cDNA第一鏈的合成及基因克隆
            2.2.3 PCR擴(kuò)增灰飛虱體內(nèi)LSCPR片段
        2.3 PCR產(chǎn)物純化回收
        2.4 連接反應(yīng)
        2.5 轉(zhuǎn)化反應(yīng)
        2.6 LSCPR的cDNA全長的獲得
            2.6.1 5’和3'RACE cDNA模板的合成
            2.6.2 NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶RACE引物
        2.7 RACE-PCR反應(yīng)體系及條件
        2.8 目標(biāo)序列的測定
    3 結(jié)果分析
    4 討論
第3章 灰飛虱NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶RNAI功能分析
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 供試?yán)ハx
        1.2 主要儀器及試劑
        1.3 試驗(yàn)方法
            1.3.1 RNA提取
            1.3.2 第一鏈cDNA的合成
            1.3.3 dsRNA合成引物
            1.3.4 PCR擴(kuò)增
            1.3.5 回收純化
            1.3.6 dsRNA合成
            1.3.7 dsRNA喂食實(shí)驗(yàn)
            1.3.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
    2 結(jié)果
        2.1 dsRNA雙鏈的合成
        2.2 灰飛虱NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶RNAi、定量檢測和表型分析
    3 討論
全文結(jié)論及創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3243471