禾谷鐮孢菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子FgCrz1A的鑒定和功能研究
發(fā)布時間：2021-06-21 21:26
鋅指轉(zhuǎn)錄因子Crz1是許多生物體中鈣依賴性信號傳導(dǎo)途徑的重要下游調(diào)節(jié)因子。Crz1具有C2H2鋅指基元,當細胞質(zhì)中Ca2+濃度升高時,Crz1p受到刺激,與下游基因的啟動子區(qū)結(jié)合調(diào)控下游基因轉(zhuǎn)錄,來響應(yīng)外界環(huán)境的刺激。目前Crz1在小麥赤霉病病原菌（Fusarium graminearum）中的功能尚不清楚。在這項研究中,我們使用同源重組的方法敲除禾谷鐮孢菌的FGSG01341、FGSG06311、FGSG10470、FGSG13711基因,通過Ca2+脅迫篩選出禾谷鐮孢菌中Crz1的同源基因FgCrz1A,通過southern雜交確認得到的是陽性單拷貝突變體。缺失突變體ΔFgCrz1A在PDA培養(yǎng)基上表現(xiàn)出菌絲生長速率降低,而且分支增多。ΔFgCrz1A不能產(chǎn)生分生孢子,qRT-PCR檢測ΔFgCrz1A在無性生殖過程中的相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平,其中AbaA和WetA的轉(zhuǎn)錄水平均有不同程度的降低。ΔFgCrz1A的有性生殖被阻斷,不能生成子囊殼,通過qRT-...
【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】：66 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
禾谷鐮孢菌中轉(zhuǎn)錄因子Crz1的鑒定
PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 在 PDA、CM 和 MM 培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)圖，（b）為菌落直（c）PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的菌落邊緣圖。Figure 3 Growth rate and colony edges of PH-1, ΔFgCrz1A and FgCrz1A-Colony morphology of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C on PDA, CM, and MM media, (b) colony dplots; (c) Colony borders of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C.果如圖 3-a、b 所示，相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，在三種培養(yǎng)基上ΔFgC速率都嚴重降低，在 MM 培養(yǎng)基中幾乎不能生長，菌落不規(guī)則，而A 的氣生菌絲非常少。 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 接在表面覆蓋 CM 培養(yǎng)基的玻片，25培養(yǎng) 14h，在顯微鏡下觀察菌落邊緣。果如圖 3-c，我們發(fā)現(xiàn)相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，ΔFgCrz1A 的菌落密，分支多，說明 FgCrz1A 不僅影響禾谷鐮孢菌氣生菌絲的極性生長長受到抑制后產(chǎn)生更多的分支。們懷疑是否在突變體中存在雙核現(xiàn)象，將ΔFgCrz1A 的隔膜和細胞核染光顯微鏡觀察。
圖 3 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的生長速率和菌落邊緣（a）PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 在 PDA、CM 和 MM 培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)圖，（b）為菌落直徑圖；（c）PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的菌落邊緣圖。Figure 3 Growth rate and colony edges of PH-1, ΔFgCrz1A and FgCrz1A-C(a) Colony morphology of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C on PDA, CM, and MM media, (b) colony diameterplots; (c) Colony borders of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C.結(jié)果如圖 3-a、b 所示，相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，在三種培養(yǎng)基上ΔFgCrz1A的生長速率都嚴重降低，在 MM 培養(yǎng)基中幾乎不能生長，菌落不規(guī)則，而且ΔFgCrz1A 的氣生菌絲非常少。將 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 接在表面覆蓋 CM 培養(yǎng)基的玻片，25℃恒溫保濕培養(yǎng) 14h，在顯微鏡下觀察菌落邊緣。結(jié)果如圖 3-c，我們發(fā)現(xiàn)相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，ΔFgCrz1A 的菌落邊緣非常致密，分支多，說明 FgCrz1A 不僅影響禾谷鐮孢菌氣生菌絲的極性生長，在極性生長受到抑制后產(chǎn)生更多的分支。
【參考文獻】：
博士論文
[1]禾谷鐮刀菌KIN1激酶的隔膜孔定位及功能[D]. 羅永平.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
碩士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子Crz1p調(diào)控光滑球擬酵母應(yīng)答酸脅迫的生理機制[D]. 閆冬妮.江南大學(xué) 2016
本文編號：3241433
【文章來源】：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】：66 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
禾谷鐮孢菌中轉(zhuǎn)錄因子Crz1的鑒定
PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 在 PDA、CM 和 MM 培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)圖，（b）為菌落直（c）PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的菌落邊緣圖。Figure 3 Growth rate and colony edges of PH-1, ΔFgCrz1A and FgCrz1A-Colony morphology of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C on PDA, CM, and MM media, (b) colony dplots; (c) Colony borders of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C.果如圖 3-a、b 所示，相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，在三種培養(yǎng)基上ΔFgC速率都嚴重降低，在 MM 培養(yǎng)基中幾乎不能生長，菌落不規(guī)則，而A 的氣生菌絲非常少。 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 接在表面覆蓋 CM 培養(yǎng)基的玻片，25培養(yǎng) 14h，在顯微鏡下觀察菌落邊緣。果如圖 3-c，我們發(fā)現(xiàn)相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，ΔFgCrz1A 的菌落密，分支多，說明 FgCrz1A 不僅影響禾谷鐮孢菌氣生菌絲的極性生長長受到抑制后產(chǎn)生更多的分支。們懷疑是否在突變體中存在雙核現(xiàn)象，將ΔFgCrz1A 的隔膜和細胞核染光顯微鏡觀察。
圖 3 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的生長速率和菌落邊緣（a）PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 在 PDA、CM 和 MM 培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)圖，（b）為菌落直徑圖；（c）PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 的菌落邊緣圖。Figure 3 Growth rate and colony edges of PH-1, ΔFgCrz1A and FgCrz1A-C(a) Colony morphology of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C on PDA, CM, and MM media, (b) colony diameterplots; (c) Colony borders of PH-1, ΔFgCrz1A, and FgCrz1A-C.結(jié)果如圖 3-a、b 所示，相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，在三種培養(yǎng)基上ΔFgCrz1A的生長速率都嚴重降低，在 MM 培養(yǎng)基中幾乎不能生長，菌落不規(guī)則，而且ΔFgCrz1A 的氣生菌絲非常少。將 PH-1、ΔFgCrz1A 和 FgCrz1A-C 接在表面覆蓋 CM 培養(yǎng)基的玻片，25℃恒溫保濕培養(yǎng) 14h，在顯微鏡下觀察菌落邊緣。結(jié)果如圖 3-c，我們發(fā)現(xiàn)相較于 PH-1 和 FgCrz1A-C，ΔFgCrz1A 的菌落邊緣非常致密，分支多，說明 FgCrz1A 不僅影響禾谷鐮孢菌氣生菌絲的極性生長，在極性生長受到抑制后產(chǎn)生更多的分支。
【參考文獻】：
博士論文
[1]禾谷鐮刀菌KIN1激酶的隔膜孔定位及功能[D]. 羅永平.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014
碩士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子Crz1p調(diào)控光滑球擬酵母應(yīng)答酸脅迫的生理機制[D]. 閆冬妮.江南大學(xué) 2016
本文編號：3241433
本文鏈接：http://sikaile.net/kejilunwen/nykj/3241433.html
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