土壤微生物總DNA經(jīng)試劑盒提取,使用CODEHOP引物進行木聚糖酶基因編碼區(qū)核心序列進行擴增,根據(jù)所擴增序列設計hiTAIL-PCR特異性引物,最終克隆了1個編碼區(qū)長度為1 284 bp的新穎木聚糖酶基因。生物信息學分析表明,該基因編碼蛋白質氨基酸序列長度為427 aa,分子量為47 398.91 Da,理論等電點（pI）為8.99,是一個不含跨膜區(qū)域的親水性蛋白。 

【文章來源】：生物化工. 2020,6(01)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

蛋白質跨膜區(qū)域分析

土壤中因富含腐殖酸、多酚等雜質，其高質量微生物總DNA的提取頗有困難困難較大。本研究使用試劑盒法提取總DNA。所提樣品經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，結果如圖1所示。發(fā)現(xiàn)其條帶單一，泳道內無彌散、降解現(xiàn)象，初步認為可滿足PCR擴增對模板質量的要求。為了進一步驗證模板質量，以微生物16S rRNA通用引物27F/1525R擴增，PCR產物經(jīng)電泳檢測，結果如圖2所示�？梢钥吹綌U增產物條帶清晰、符合預期大小，因此所提取DNA可滿足后續(xù)實驗要求。2.2 木聚糖酶基因核心序列的PCR擴增

16S rRNAPCR檢測

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3233250