長期以來,除草劑草甘膦普遍被認(rèn)為對動物是無毒的,因為草甘膦只會干擾植物和微生物中一種用于產(chǎn)生若干關(guān)鍵氨基酸的重要酶。但是,近年來的研究表明草甘膦對昆蟲的生存會產(chǎn)生消極的影響,尤其是草甘膦能夠通過干擾昆蟲的微生物群落多樣性或其組成結(jié)構(gòu),從而對宿主昆蟲的生長發(fā)育產(chǎn)生影響。轉(zhuǎn)基因作物推廣商業(yè)化種植促使了除草劑草甘膦用量的不斷攀升,占據(jù)了全球除草劑市場的一半。為了明確草甘膦對田間非靶標(biāo)生物的安全性,本研究以捕食性天敵異色瓢蟲為研究對象,以昆蟲共生菌為切入點,利用高通量測序以及分子生物學(xué)技術(shù)系統(tǒng)研究了草甘膦對異色瓢蟲幼蟲和成蟲共生菌群落組成和結(jié)構(gòu)的影響。主要研究結(jié)果如下:1.異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌的多樣性及其群落組成首先,為了明確異色瓢蟲的共生菌群落組成和結(jié)構(gòu),測定和分析了異色瓢蟲整個發(fā)育階段的細(xì)菌群落組成結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明,所有發(fā)育階段微生物的共生菌群落總共注釋到36個門、81個綱、212個目,410個科、900個屬。不同發(fā)育階段的細(xì)菌群落的多樣性及豐富度不同,其中,二齡幼蟲的共生菌群落的多樣性最低,而卵期和成蟲期的細(xì)菌群落的多樣性較高。在門水平上,異色瓢蟲的優(yōu)勢菌為厚壁菌門（Firmicut... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 研究問題的由來
    1.2 草甘膦概況
        1.2.1 草甘膦簡介
        1.2.2 草甘膦的作用機(jī)理
        1.2.3 草甘膦的應(yīng)用現(xiàn)狀及發(fā)展
    1.3 草甘膦的環(huán)境安全評價
        1.3.1 草甘膦脅迫對土壤動物的影響
        1.3.2 草甘膦脅迫對土壤微生物的影響
        1.3.3 草甘膦脅迫對水生生物和兩棲類動物的影響
            1.3.3.1 草甘膦脅迫對水生植物的影響
            1.3.3.2 草甘膦脅迫對水生動物的影響
        1.3.4 草甘膦脅迫對昆蟲的影響
    1.4 昆蟲共生菌的功能
        1.4.1 參與宿主昆蟲的代謝和營養(yǎng)物質(zhì)的供給
        1.4.2 免疫與保護(hù)
        1.4.3 影響昆蟲的行為
    1.5 瓢蟲共生菌的研究進(jìn)展
    1.6 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 供試材料
        2.1.1 供試?yán)ハx
        2.1.2 供試藥劑
        2.1.3 實驗儀器和設(shè)備
        2.1.4 試劑及試劑盒
    2.2 異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌的多樣性及其組成
        2.2.1 樣本收集
        2.2.2 DNA提取
        2.2.3 PCR擴(kuò)增
        2.2.4 Illumina Miseq高通量測序
        2.2.5 微生物多樣性的生物信息學(xué)分析
        2.2.6 異色瓢蟲優(yōu)勢菌群的絕對定量分析
            2.2.6.1 目的基因質(zhì)粒的構(gòu)建
            2.2.6.2 優(yōu)勢菌群的絕對定量
    2.3 草甘膦脅迫對異色瓢蟲幼蟲共生菌的影響
        2.3.1 草甘膦脅迫對異色瓢蟲幼蟲生長發(fā)育的影響
        2.3.2 草甘膦脅迫對異色瓢蟲幼蟲共生菌的影響
            2.3.2.1 樣本收集
            2.3.2.2 DNA的提取
            2.3.2.3 PCR擴(kuò)增
            2.3.2.4 Illumina Miseq高通量測序
            2.3.2.5 微生物多樣性的生物信息學(xué)分析
            2.3.2.6 優(yōu)勢菌群的絕對定量分析
    2.4 草甘膦脅迫對異色瓢蟲成蟲共生菌的影響
        2.4.1 草甘膦脅迫對異色瓢蟲成蟲發(fā)育的影響
        2.4.2 草甘膦脅迫對異色瓢蟲成蟲共生菌的影響
            2.4.2.1 樣本收集
            2.4.2.2 DNA的提取
            2.4.2.3 PCR擴(kuò)增
            2.4.2.4 Illumina Miseq高通量測序
            2.4.2.5 微生物多樣性的生物信息學(xué)分析
            2.4.2.6 優(yōu)勢菌群的絕對定量分析
    2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌的多樣性及其組成
        3.1.1 異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌測序數(shù)據(jù)的分析
        3.1.2 異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌的群落組成分析
        3.1.3 異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌的比較分析
        3.1.4 異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌的PICRUSt
    3.2 草甘膦脅迫對異色瓢蟲幼蟲生長發(fā)育及其共生菌的影響
        3.2.1 草甘膦脅迫對異色瓢蟲幼蟲生長發(fā)育的影響
        3.2.2 草甘膦脅迫對異色瓢蟲幼蟲共生菌的影響
            3.2.2.1 草甘膦脅迫下異色瓢蟲幼蟲共生菌OTU多樣性分析
            3.2.2.2 草甘膦脅迫下異色瓢蟲幼蟲共生菌組成分析
    3.3 草甘膦脅迫對異色瓢蟲成蟲繁育及其共生菌的影響
        3.3.1 草甘膦脅迫下異色瓢蟲成蟲的繁育分析
        3.3.2 草甘膦脅迫對異色瓢蟲成蟲共生菌的影響
            3.3.2.1 草甘膦脅迫下異色瓢蟲成蟲共生菌OTU多樣性分析
            3.3.2.2 草甘膦脅迫下異色瓢蟲成蟲共生菌組成分析
4.結(jié)論與討論
    4.1 異色瓢蟲不同發(fā)育階段共生菌的多樣性
    4.2 草甘膦脅迫對異色瓢蟲幼蟲生長發(fā)育及其共生菌的影響
    4.3 草甘膦脅迫對異色瓢蟲成蟲繁育及其共生菌的影響
5.總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]草甘膦和撲草凈對蚯蚓體內(nèi)SOD和AChE酶活性的影響[J]. 宋欣媛,吳培福,吳博,孫仕仙.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2018(02)
[2]龜紋瓢蟲幼蟲體內(nèi)主要共生菌種類分析[J]. 吳林珂,張帥,雒珺瑜,張利娟,呂麗敏,朱香鎮(zhèn),王麗,崔金杰.  中國生物防治學(xué)報. 2018(02)
[3]草甘膦對土壤微生物能量代謝的影響[J]. 吳雪楠,孫菁菁,羅園園,劉文娟,姚俊.  化學(xué)與生物工程. 2016(04)
[4]草甘膦對油茶林土壤微生物數(shù)量及酶活性的影響[J]. 陳隆升,陳永忠,彭映赫,李志剛,彭邵鋒,唐煒.  湖南林業(yè)科技. 2015(04)
[5]水環(huán)境中草甘膦對塔胞藻、塔瑪亞歷山大藻的毒性效應(yīng)[J]. 王洪斌,宋秀梅,丁媛,吳言,閻斌倫.  農(nóng)藥. 2014(01)
[6]草甘膦對草魚、鰱魚和鯽魚的毒性[J]. 傅建煒,史夢竹,李建宇,游泳,魏輝.  生物安全學(xué)報. 2013(02)
[7]草甘膦行業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀[J]. 鄭孝國.  河北化工. 2011(10)
[8]六斑異瓢蟲成蟲腸道細(xì)菌分離及鑒定研究[J]. 孟祥杰,劉玉升,崔俊,墨鐵路,張亮.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2008(02)
[9]除草劑草甘膦對中華大蟾蜍的慢性毒性[J]. 肖永紅,廖永強(qiáng),周昌旭,蔣平.  四川動物. 2007(02)
[10]桑粒肩天牛幼蟲腸道菌群的種類及分布[J]. 張偉,何正波,鄧新平,殷幼平.  西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2004(02)

博士論文
[1]暗黑鰓金龜不同發(fā)育階段腸道微生物及糖苷水解酶多樣性研究[D]. 圣平.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]華山松大小蠹腸道微生物群落多樣性與幼蟲腸道纖維素降解菌的研究[D]. 胡霞.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2014

碩士論文
[1]兩種捕食性瓢蟲腸道微生物多樣性的探究[D]. 閆裕.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019
[2]利用轉(zhuǎn)錄組和16S測序技術(shù)評價Bt蛋白對龜紋瓢蟲安全性的研究[D]. 吳林珂.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[3]水環(huán)境中低濃度草甘膦及制劑對鯽魚的毒性效應(yīng)研究[D]. 范瑾煜.南京大學(xué) 2013



本文編號：3199322