解磷解鉀特異菌株CX-7的篩選及其應(yīng)用試驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2021-04-24 03:11
該研究從8個(gè)省份的不同類型土壤分離到297株芽孢桿菌,從中篩選到一株解磷、解鉀特異菌株,對(duì)其解磷解鉀效應(yīng)、抑菌物質(zhì)的分離、發(fā)酵條件及其試驗(yàn)應(yīng)用效果進(jìn)行了評(píng)價(jià),主要研究成果如下:一、多功效芽孢桿菌的分離和篩選從全國(guó)8個(gè)省份分離到297株芽孢桿菌,其中89株具有解磷解鉀活性,從中篩選解磷解鉀強(qiáng)度高的菌株。1、解磷解鉀活性定量分析通過(guò)液體搖瓶解磷解鉀試驗(yàn),測(cè)定89株菌株培養(yǎng)液中水溶性磷和水溶性鉀的含量,以膠凍樣類芽孢桿菌K-7(ACCC10013)為參比菌株,遴選出解磷解鉀活性較高的BY-3、BY-4、CX-7、CX-14、NX-42、NX-43和SS-12菌株,其中CX-7菌株對(duì)磷酸三鈣和鉀長(zhǎng)石的分解能力分別為K-7菌株的1.84和2.53倍。2、病原微生物拮抗試驗(yàn)采用平板對(duì)峙法測(cè)定BY-3、BY-4、CX-7、CX-14、NX-42、NX-43和SS-12菌株及其培養(yǎng)液對(duì)小麥、棉花等病原微生物的拮抗作用試驗(yàn),證實(shí)各菌株均具有拮抗的功效,其中CX-7菌株抗菌譜較廣,對(duì)棉花黃萎病菌(Verticillium dahliae)、棉花立枯病菌(Rhizoctonia solani)、小麥赤霉病菌...
【文章來(lái)源】:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省
【文章頁(yè)數(shù)】:111 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 引言
1 我國(guó)的土壤類型
2 我國(guó)土壤的磷鉀概況
2.1 土壤中磷概況
2.2 土壤中鉀概況
3 土壤中微生物的作用
3.1 解磷微生物
3.1.1 解磷微生物的種類及分布
3.1.2 解磷微生物解磷機(jī)理研究
3.1.3 解磷微生物解磷能力研究
3.2 解鉀微生物
3.2.1 解鉀微生物的種類及分布
3.2.2 解鉀微生物解鉀機(jī)理探討
3.2.3 解鉀微生物解鉀能力研究
4 土壤微生物、礦物質(zhì)和土壤酶活力的相互關(guān)系
4.1 土壤酶的主要種類及作用
4.2 土壤微生物與土壤酶活性之間的聯(lián)系
4.3 土壤酶活性與土壤礦質(zhì)元素含量之間的關(guān)系
5 本研究的目的、意義和必要性
第二章 本研究的技術(shù)路線
第三章 不同土壤中解磷解鉀芽孢桿菌的分離
1 材料
1.1 土樣
1.2 培養(yǎng)基
1.2.1 分離培養(yǎng)基(g/L)
1.2.2 NA 斜面培養(yǎng)基和 NB 種子培養(yǎng)基
1.2.3 解鉀平板培養(yǎng)基(g/L)
1.2.4 解無(wú)機(jī)磷平板培養(yǎng)基(g/L)
1.2.5 解有機(jī)磷平板培養(yǎng)基(g/L)
1.3 試劑和儀器
1.3.1 試劑
1.3.2 主要儀器
2 方法
2.1 土樣采集
2.2 土壤芽孢桿菌的分離方法
2.3 解磷解鉀芽孢桿菌的篩選方法
2.4 土樣養(yǎng)分含量的測(cè)定
3 結(jié)果與分析
3.1 土壤養(yǎng)分含量的測(cè)定
3.2 土壤中芽孢桿菌的分離及含量測(cè)定
3.3 土壤中解磷解鉀芽孢桿菌的篩選
3.4 不同土壤中解磷解鉀芽孢桿菌比例
4 討論
第四章 高活性解磷解鉀芽孢桿菌的遴選
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 試劑和儀器
2 方法
2.1 解磷能力測(cè)定試驗(yàn)
2.1.1 磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.1.2 供試菌株解磷能力的測(cè)定
2.2 芽孢桿菌解鉀能力的測(cè)定
2.2.1 鉀標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.2.2 供試菌株解鉀能力的測(cè)定
3 結(jié)果與分析
4 討論
第五章 高活性解磷解鉀芽孢桿菌病原微生物拮抗試驗(yàn)
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 芽孢桿菌拮抗病原微生物試驗(yàn)
2.2 芽孢桿菌發(fā)酵液拮抗病原微生物試驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
3.1 芽孢桿菌菌株拮抗病原微生物的效果
3.2 芽孢桿菌菌株培養(yǎng)液對(duì)病原微生物的拮抗效果
4 討論
第六章 高活性解磷解鉀芽孢桿菌對(duì)玉米促生長(zhǎng)試驗(yàn)
1 材料
1.1 菌種和種子
1.2 土壤
1.3 主要儀器
2 方法
3 結(jié)果與分析
4 討論
第七章 芽孢桿菌對(duì)土壤酶活力及磷鉀養(yǎng)分的影響
1 材料
1.1 供試菌株
1.2 試劑
1.3 儀器
2 方法
2.1 玉米盆栽試驗(yàn)
2.2 土壤樣品的預(yù)處理
2.3 土壤理化性質(zhì)及酶活性的測(cè)定
3 結(jié)果與分析
3.1 土壤蔗糖酶活性的測(cè)定
3.2 土壤脲酶活性的測(cè)定結(jié)果
3.3 土壤磷酸酶活性的測(cè)定
3.4 土壤過(guò)氧化氫酶的測(cè)定
3.5 土壤速效磷含量的測(cè)定
3.6 土壤速效鉀含量的測(cè)定
4 討論
第八章 解磷解鉀特異菌株 CX-7 的分類鑒定
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 試劑
1.4 儀器
2 方法
2.1 芽孢桿菌 CX-7 菌株的菌落和菌體形態(tài)
2.2 芽孢桿菌 CX-7 菌株生理生化反應(yīng)
2.3 芽孢桿菌 CX-7 菌株 DNA 的提取
2.4 芽孢桿菌 CX-7 菌株 16S rDNA PCR 擴(kuò)增
2.5 芽孢桿菌 CX-7 菌株 16S rDNA 序列分析及系統(tǒng)發(fā)育樹
3 結(jié)果與分析
3.1 CX-7 芽孢桿菌菌株的菌落和菌體形態(tài)觀察
3.2 CX-7 芽孢桿菌菌株 16S rDNA PCR 擴(kuò)增
3.3 CX-7 芽孢桿菌菌株 16S rDNA 序列分析及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
3.4 生理生化反應(yīng)
4 討論
第九章 解磷解鉀特異菌株 CX-7 菌株代謝產(chǎn)物分析
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 主要試劑
1.4 主要儀器
2 方法
2.1 CX-7 菌株分泌的有機(jī)酸的測(cè)定
2.2 CX-7 菌株分泌多糖的測(cè)定
2.3 CX-7 菌株拮抗物質(zhì)的定性分析
2.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
2.5 CX-7 菌株抗菌蛋白活性測(cè)定
2.6 CX-7 菌株抗菌蛋白的性質(zhì)分析
2.7 CX-7 菌株抗菌蛋白的分離純化
3 結(jié)果與分析
3.1 CX-7 芽孢桿菌菌株產(chǎn)生的有機(jī)酸含量測(cè)定
3.2 CX-7 菌株產(chǎn)生的多糖的測(cè)定
3.3 CX-7 菌株拮抗物質(zhì)的性質(zhì)鑒定
3.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
3.5 CX-7 菌株抗菌蛋白最適作用溫度及對(duì)熱穩(wěn)定性
3.6 CX-7 菌株抗菌蛋白最適作用 pH 值及酸堿穩(wěn)定性
3.7 金屬離子對(duì) CX-7 菌株抗菌蛋白的影響
3.8 CX-7 菌株抗菌物質(zhì)的分離純化
3.9 抗菌蛋白組分的純度和分子質(zhì)量測(cè)定
4 討論
第十章 CX-7 菌株搖瓶發(fā)酵條件研究
1 材料
1.1 菌株
1.2 培養(yǎng)基
1.3 試劑
1.4 儀器
2 試驗(yàn)方法
2.1 CX-7 菌株的培養(yǎng)
2.2 CX-7 菌株的生長(zhǎng)曲線
2.3 CX-7 菌株生物量和芽孢形成率的測(cè)定
2.4 CX-7 菌株單因子試驗(yàn)和正交試驗(yàn)
2.5 CX-7 菌株最佳培養(yǎng)條件的確定
3 結(jié)果與分析
3.1 CX-7 菌株的生長(zhǎng)曲線
3.2 CX-7 菌株培養(yǎng)基的優(yōu)化
3.3 發(fā)酵條件對(duì) CX-7 菌株芽孢形成率的影響
4 小結(jié)
第十一章 CX-7 菌株發(fā)酵工藝條件研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果和討論
2.1 種子對(duì) CX-7 菌株發(fā)酵終點(diǎn)和芽孢生物量的影響
2.2 溶氧對(duì) CX-7 菌株生物量的影響
2.3 接種量對(duì) CX-7 菌株生物量的影響
2.4 培養(yǎng)溫度對(duì) CX-7 菌株芽孢生物量的影響
3 小結(jié)
第十二章 CX-7 菌株的后處理工藝研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果和討論
2.1 離心工藝參數(shù)的研究
2.2 不同輔料品種對(duì)菌粉生物量和保質(zhì)期的影響
2.3 閃蒸干燥工藝參數(shù)的確定
3 結(jié)論
第十三章 CX-7 菌株在煙草上的田間試驗(yàn)效果
1 材料和方法
1.1 供試菌株
1.2 供試作物
1.3 試驗(yàn)地基本情況
1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.5 物候期的調(diào)查及觀測(cè)
1.6 田間管理
2 結(jié)果與分析
3 討論
第十五章 CX-7 菌株在小麥上的田間試驗(yàn)效果
1 材料和方法
1.1 供試菌種
1.2 供試作物
1.3 試驗(yàn)地基本情況
1.4 試驗(yàn)地點(diǎn)
1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
2 結(jié)果與分析
3 討論
第十六章 結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的論文
作者簡(jiǎn)介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷的注意事項(xiàng)[J]. 程樂(lè)明,陳良,劉建雷,劉松峰,柳聽(tīng)海. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2009(03)
[2]乙酸銨浸提——火焰光度計(jì)法測(cè)定土壤速效鉀[J]. 孫蘭香. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2008(17)
[3]成都市郊區(qū)土壤芽孢桿菌的解磷、解鉀潛力[J]. 胡容平,鄧香潔,龔國(guó)淑,唐志燕,張世熔. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(02)
[4]解磷細(xì)菌(PSB)解磷機(jī)理及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 葉國(guó)平,梁錦鋒. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2007(09)
[5]油菜內(nèi)生生防菌BY-2在油菜體內(nèi)的定殖與對(duì)油菜菌核病的防治作用[J]. 江木蘭,趙瑞,胡小加,張銀波,王國(guó)平. 植物病理學(xué)報(bào). 2007(02)
[6]解磷微生物及其應(yīng)用研究綜述[J]. 馬春浩. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào). 2007(04)
[7]植物根際解磷菌的研究進(jìn)展[J]. 席琳喬,馮瑞章. 塔里木大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(04)
[8]根際解磷微生物研究進(jìn)展[J]. 覃麗金,王真輝,陳秋波. 華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2006(02)
[9]解磷微生物的研究進(jìn)展[J]. 金術(shù)超,杜春梅,平文祥,關(guān)洪宇,徐寶興. 微生物學(xué)雜志. 2006(02)
[10]土壤磷酸酶活性對(duì)施肥-種植-耕作制度的響應(yīng)[J]. 沈菊培,陳利軍. 土壤通報(bào). 2005(04)
本文編號(hào):3156557
【文章來(lái)源】:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省
【文章頁(yè)數(shù)】:111 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 引言
1 我國(guó)的土壤類型
2 我國(guó)土壤的磷鉀概況
2.1 土壤中磷概況
2.2 土壤中鉀概況
3 土壤中微生物的作用
3.1 解磷微生物
3.1.1 解磷微生物的種類及分布
3.1.2 解磷微生物解磷機(jī)理研究
3.1.3 解磷微生物解磷能力研究
3.2 解鉀微生物
3.2.1 解鉀微生物的種類及分布
3.2.2 解鉀微生物解鉀機(jī)理探討
3.2.3 解鉀微生物解鉀能力研究
4 土壤微生物、礦物質(zhì)和土壤酶活力的相互關(guān)系
4.1 土壤酶的主要種類及作用
4.2 土壤微生物與土壤酶活性之間的聯(lián)系
4.3 土壤酶活性與土壤礦質(zhì)元素含量之間的關(guān)系
5 本研究的目的、意義和必要性
第二章 本研究的技術(shù)路線
第三章 不同土壤中解磷解鉀芽孢桿菌的分離
1 材料
1.1 土樣
1.2 培養(yǎng)基
1.2.1 分離培養(yǎng)基(g/L)
1.2.2 NA 斜面培養(yǎng)基和 NB 種子培養(yǎng)基
1.2.3 解鉀平板培養(yǎng)基(g/L)
1.2.4 解無(wú)機(jī)磷平板培養(yǎng)基(g/L)
1.2.5 解有機(jī)磷平板培養(yǎng)基(g/L)
1.3 試劑和儀器
1.3.1 試劑
1.3.2 主要儀器
2 方法
2.1 土樣采集
2.2 土壤芽孢桿菌的分離方法
2.3 解磷解鉀芽孢桿菌的篩選方法
2.4 土樣養(yǎng)分含量的測(cè)定
3 結(jié)果與分析
3.1 土壤養(yǎng)分含量的測(cè)定
3.2 土壤中芽孢桿菌的分離及含量測(cè)定
3.3 土壤中解磷解鉀芽孢桿菌的篩選
3.4 不同土壤中解磷解鉀芽孢桿菌比例
4 討論
第四章 高活性解磷解鉀芽孢桿菌的遴選
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 試劑和儀器
2 方法
2.1 解磷能力測(cè)定試驗(yàn)
2.1.1 磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.1.2 供試菌株解磷能力的測(cè)定
2.2 芽孢桿菌解鉀能力的測(cè)定
2.2.1 鉀標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
2.2.2 供試菌株解鉀能力的測(cè)定
3 結(jié)果與分析
4 討論
第五章 高活性解磷解鉀芽孢桿菌病原微生物拮抗試驗(yàn)
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 主要儀器
2 方法
2.1 芽孢桿菌拮抗病原微生物試驗(yàn)
2.2 芽孢桿菌發(fā)酵液拮抗病原微生物試驗(yàn)
3 結(jié)果與分析
3.1 芽孢桿菌菌株拮抗病原微生物的效果
3.2 芽孢桿菌菌株培養(yǎng)液對(duì)病原微生物的拮抗效果
4 討論
第六章 高活性解磷解鉀芽孢桿菌對(duì)玉米促生長(zhǎng)試驗(yàn)
1 材料
1.1 菌種和種子
1.2 土壤
1.3 主要儀器
2 方法
3 結(jié)果與分析
4 討論
第七章 芽孢桿菌對(duì)土壤酶活力及磷鉀養(yǎng)分的影響
1 材料
1.1 供試菌株
1.2 試劑
1.3 儀器
2 方法
2.1 玉米盆栽試驗(yàn)
2.2 土壤樣品的預(yù)處理
2.3 土壤理化性質(zhì)及酶活性的測(cè)定
3 結(jié)果與分析
3.1 土壤蔗糖酶活性的測(cè)定
3.2 土壤脲酶活性的測(cè)定結(jié)果
3.3 土壤磷酸酶活性的測(cè)定
3.4 土壤過(guò)氧化氫酶的測(cè)定
3.5 土壤速效磷含量的測(cè)定
3.6 土壤速效鉀含量的測(cè)定
4 討論
第八章 解磷解鉀特異菌株 CX-7 的分類鑒定
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 試劑
1.4 儀器
2 方法
2.1 芽孢桿菌 CX-7 菌株的菌落和菌體形態(tài)
2.2 芽孢桿菌 CX-7 菌株生理生化反應(yīng)
2.3 芽孢桿菌 CX-7 菌株 DNA 的提取
2.4 芽孢桿菌 CX-7 菌株 16S rDNA PCR 擴(kuò)增
2.5 芽孢桿菌 CX-7 菌株 16S rDNA 序列分析及系統(tǒng)發(fā)育樹
3 結(jié)果與分析
3.1 CX-7 芽孢桿菌菌株的菌落和菌體形態(tài)觀察
3.2 CX-7 芽孢桿菌菌株 16S rDNA PCR 擴(kuò)增
3.3 CX-7 芽孢桿菌菌株 16S rDNA 序列分析及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
3.4 生理生化反應(yīng)
4 討論
第九章 解磷解鉀特異菌株 CX-7 菌株代謝產(chǎn)物分析
1 材料
1.1 菌種
1.2 培養(yǎng)基
1.3 主要試劑
1.4 主要儀器
2 方法
2.1 CX-7 菌株分泌的有機(jī)酸的測(cè)定
2.2 CX-7 菌株分泌多糖的測(cè)定
2.3 CX-7 菌株拮抗物質(zhì)的定性分析
2.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
2.5 CX-7 菌株抗菌蛋白活性測(cè)定
2.6 CX-7 菌株抗菌蛋白的性質(zhì)分析
2.7 CX-7 菌株抗菌蛋白的分離純化
3 結(jié)果與分析
3.1 CX-7 芽孢桿菌菌株產(chǎn)生的有機(jī)酸含量測(cè)定
3.2 CX-7 菌株產(chǎn)生的多糖的測(cè)定
3.3 CX-7 菌株拮抗物質(zhì)的性質(zhì)鑒定
3.4 CX-7 菌株抗菌蛋白的提取
3.5 CX-7 菌株抗菌蛋白最適作用溫度及對(duì)熱穩(wěn)定性
3.6 CX-7 菌株抗菌蛋白最適作用 pH 值及酸堿穩(wěn)定性
3.7 金屬離子對(duì) CX-7 菌株抗菌蛋白的影響
3.8 CX-7 菌株抗菌物質(zhì)的分離純化
3.9 抗菌蛋白組分的純度和分子質(zhì)量測(cè)定
4 討論
第十章 CX-7 菌株搖瓶發(fā)酵條件研究
1 材料
1.1 菌株
1.2 培養(yǎng)基
1.3 試劑
1.4 儀器
2 試驗(yàn)方法
2.1 CX-7 菌株的培養(yǎng)
2.2 CX-7 菌株的生長(zhǎng)曲線
2.3 CX-7 菌株生物量和芽孢形成率的測(cè)定
2.4 CX-7 菌株單因子試驗(yàn)和正交試驗(yàn)
2.5 CX-7 菌株最佳培養(yǎng)條件的確定
3 結(jié)果與分析
3.1 CX-7 菌株的生長(zhǎng)曲線
3.2 CX-7 菌株培養(yǎng)基的優(yōu)化
3.3 發(fā)酵條件對(duì) CX-7 菌株芽孢形成率的影響
4 小結(jié)
第十一章 CX-7 菌株發(fā)酵工藝條件研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果和討論
2.1 種子對(duì) CX-7 菌株發(fā)酵終點(diǎn)和芽孢生物量的影響
2.2 溶氧對(duì) CX-7 菌株生物量的影響
2.3 接種量對(duì) CX-7 菌株生物量的影響
2.4 培養(yǎng)溫度對(duì) CX-7 菌株芽孢生物量的影響
3 小結(jié)
第十二章 CX-7 菌株的后處理工藝研究
1 材料和方法
1.1 材料
1.2 方法
2 結(jié)果和討論
2.1 離心工藝參數(shù)的研究
2.2 不同輔料品種對(duì)菌粉生物量和保質(zhì)期的影響
2.3 閃蒸干燥工藝參數(shù)的確定
3 結(jié)論
第十三章 CX-7 菌株在煙草上的田間試驗(yàn)效果
1 材料和方法
1.1 供試菌株
1.2 供試作物
1.3 試驗(yàn)地基本情況
1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
1.5 物候期的調(diào)查及觀測(cè)
1.6 田間管理
2 結(jié)果與分析
3 討論
第十五章 CX-7 菌株在小麥上的田間試驗(yàn)效果
1 材料和方法
1.1 供試菌種
1.2 供試作物
1.3 試驗(yàn)地基本情況
1.4 試驗(yàn)地點(diǎn)
1.5 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
2 結(jié)果與分析
3 討論
第十六章 結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的論文
作者簡(jiǎn)介
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]碳酸氫鈉浸提-鉬銻抗比色法測(cè)定土壤有效磷的注意事項(xiàng)[J]. 程樂(lè)明,陳良,劉建雷,劉松峰,柳聽(tīng)海. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2009(03)
[2]乙酸銨浸提——火焰光度計(jì)法測(cè)定土壤速效鉀[J]. 孫蘭香. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2008(17)
[3]成都市郊區(qū)土壤芽孢桿菌的解磷、解鉀潛力[J]. 胡容平,鄧香潔,龔國(guó)淑,唐志燕,張世熔. 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(02)
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