農(nóng)藥對(duì)藻類毒性效應(yīng)的常用評(píng)價(jià)指標(biāo)是細(xì)胞生長(zhǎng),這一指標(biāo)簡(jiǎn)單便捷,能綜合反應(yīng)農(nóng)藥對(duì)藻細(xì)胞的毒性,卻不足以反應(yīng)出某種農(nóng)藥的特異性毒性效應(yīng)。從生化和分子水平探索新的毒性評(píng)價(jià)終點(diǎn),可以更有針對(duì)性地評(píng)價(jià)毒性,建立多層次反應(yīng)毒性效應(yīng)的評(píng)價(jià)體系,深入了解農(nóng)藥對(duì)藻類的毒性機(jī)制。本文采用細(xì)胞生長(zhǎng)、生化和分子指標(biāo)研究了常見農(nóng)藥莠去津?qū)ψ责B(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下蛋白核小球藻的毒性效應(yīng),分析了農(nóng)藥處理48和72 h后,與抗氧化系統(tǒng)相關(guān)的超氧化物歧化酶、過(guò)氧化物酶和丙二醛的生化指標(biāo),以及與光合作用有關(guān)的chlL基因（編碼原葉綠素酯還原酶的L亞基）、psbA基因（編碼光系統(tǒng)Ⅱ的D1蛋白）和rbcL基因（編碼Rubisco酶的大亞基）的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在自養(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下莠去津的處理都抑制了蛋白核小球藻的生長(zhǎng)。自養(yǎng)條件下在莠去津（0.0、1.0、2.0、3.0 mg/L）處理48和72 h后,胞內(nèi)抗氧化酶活性和丙二醛的含量不斷增加,在3.0 mg/L莠去津處理72 h后,超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶的活性分別提高了49.8%和27.3%,丙二醛的含量增加了109.3%；混合營(yíng)養(yǎng)（加入0.4%葡萄糖）條件下在莠去津（0.... 

【文章來(lái)源】：南京大學(xué)江蘇省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 莠去津概述
        1.1.1 莠去津的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)
        1.1.2 莠去津的使用價(jià)值
        1.1.3 莠去津的作用機(jī)理
        1.1.4 環(huán)境中莠去津的使用現(xiàn)狀
        1.1.5 環(huán)境中莠去津的危害
    1.2 小球藻概述
        1.2.1 生物學(xué)特征
        1.2.2 小球藻的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值
        1.2.3 在環(huán)境科學(xué)研究中的價(jià)值
    1.3 農(nóng)藥對(duì)藻類的作用
        1.3.1 農(nóng)藥對(duì)藻類生長(zhǎng)的影響
        1.3.2 農(nóng)藥對(duì)藻類的生物膜和光合作用的干擾
    1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)
        1.4.1 技術(shù)原理
        1.4.2 實(shí)驗(yàn)條件的確定
        1.4.3 應(yīng)用現(xiàn)狀與展望
    1.5 本課題的研究?jī)?nèi)容和意義
    參考文獻(xiàn)
第二章 生化水平上的毒性終點(diǎn)分析
    引言
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 培養(yǎng)條件
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
        2.2.2 藻細(xì)胞計(jì)數(shù)
50值的計(jì)算">        2.2.3 EC₅₀值的計(jì)算
        2.2.4 藻細(xì)胞的收集與破碎
        2.2.5 考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白濃度
        2.2.6 SOD活性的測(cè)定
        2.2.7 POD活性的測(cè)定
        2.2.8 MDA含量的變化
        2.2.9 數(shù)據(jù)處理和分析
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 葡萄糖對(duì)蛋白核小球藻生長(zhǎng)的影響
        2.3.2 莠去津?qū)Φ鞍缀诵∏蛟迳L(zhǎng)的影響
50值的確定">        2.3.3 自養(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下EC₅₀值的確定
        2.3.4 莠去津處理72小時(shí),自養(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下蛋白核小球藻抗氧化酶活性的變化
        2.3.5 莠去津處理72小時(shí),自養(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下蛋白核小球藻MDA含量的變化
        2.3.6 莠去津處理48小時(shí),自養(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下蛋白核小球藻抗氧化酶活性的變化
        2.3.7 莠去津處理48小時(shí),自養(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下蛋白核小球藻MDA含量的變化
    2.4 討論與結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
第三章 分子水平上的毒性終點(diǎn)分析
    引言
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 藻細(xì)胞的收集
        3.2.2 總RNA的抽提純化
        3.2.3 第一鏈cDNA的合成
        3.2.4 PCR擴(kuò)增目的基因和內(nèi)參基因
        3.2.5 PCR產(chǎn)物的檢驗(yàn)
        3.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析
        3.2.7 基因相對(duì)表達(dá)豐度的計(jì)算
        3.2.8 數(shù)據(jù)處理和分析
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 莠去津處理72小時(shí),自養(yǎng)和混合營(yíng)養(yǎng)條件下蛋白核小球藻基因表達(dá)豐度的變化
        3.3.2 莠去津處理48小時(shí),自養(yǎng)條件下蛋白核小球藻基因表達(dá)豐度的變化
    3.4 討論與結(jié)論
    參考文獻(xiàn)
論文的創(chuàng)新之處
碩士期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]溴氟菊酯對(duì)環(huán)境生物的安全評(píng)價(jià)研究[J]. 龔瑞忠,陳悅,陳良燕,蔡道基.  農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào). 2001(02)



本文編號(hào)：3154426