氨氧化過程是硝化過程中的限速步驟,在氮循環(huán)中起著至關(guān)重要的作用。氨氧化古菌（ammonia oxidizing archaea, AOA）的發(fā)現(xiàn)讓人們認識到氨氧化細菌（ammonia oxidizing bacteria, AOB）并不是唯一在氨氧化過程中起作用的微生物。厭氧氨氧化菌（anearobic ammonia oxidizing bacteria, anammox bacteria）能夠在缺氧或者厭氧的條件下將氨氮和亞硝酸鹽直接轉(zhuǎn)化成N2,而且有文獻報道這類微生物在土壤環(huán)境中也是普遍存在。本課題利用克隆基因文庫、熒光定量等分子生物學技術(shù),對黑龍江玉米農(nóng)田土壤中AOA、AOB、Anammox菌群落多樣性、系統(tǒng)發(fā)育和豐度等進行了研究,并探索了AOA、AOB的amoA基因數(shù)量和環(huán)境因素之間的關(guān)系。本次試驗選取的樣品來自于黑龍江省農(nóng)科院某玉米試驗農(nóng)田土壤。本次試驗針對7個不同的氮肥施加（0-250%優(yōu)化施肥量）玉米地試驗田的三個不同時期（5月播種期、7月生長期、10月收割期）進行研究。通過熒光定量分析（RT-PCR）結(jié)果可知,各個時期、各個氮肥處理間AOA的amoA基因數(shù)量差異并不大... 

【文章來源】：大連理工大學遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻綜述
    1.1 土壤氮素循環(huán)綜述
        1.1.1 氮的存在形式
        1.1.2 土壤氮素循環(huán)
    1.2 氨氧化細菌概述
        1.2.1 氨氧化細菌多樣性研究
        1.2.2 生態(tài)因子對AOB群落結(jié)構(gòu)的影響
    1.3 氨氧化古菌概述
        1.3.1 氨氧化古菌多樣性研究
        1.3.2 AOA在環(huán)境中的分布及環(huán)境因子對其分布的影響
    1.4 厭氧氨氧化細菌概述
        1.4.1 厭氧氨氧化細菌生化反應機理
        1.4.2 厭氧氨氧化細菌多樣性研究
    1.5 微生物多樣性研究方法
        1.5.1 克隆基因文庫法
        1.5.2 RT-PCR
2 研究目的、內(nèi)容和技術(shù)路線
    2.1 研究目的
    2.2 研究內(nèi)容
    2.3 研究的技術(shù)路線
3 實驗材料和方法
    3.1 實驗材料
        3.1.1 樣品采集
        3.1.2 土壤樣品理化指標的測定
        3.1.3 實驗主要試劑盒
        3.1.4 實驗主要試劑
        3.1.5 實驗主要培養(yǎng)基
        3.1.6 實驗主要引物
        3.1.7 實驗主要儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 amoA基因文庫的構(gòu)建
        3.2.2 土壤中amoA基因和Anammox菌16S rRNA基因定量分析
        3.2.3 amoA基因序列分析
        3.2.4 統(tǒng)計學分析方法
4 黑龍江玉米農(nóng)田土壤氨氧化微生物基因數(shù)量研究
    4.1 土壤理化指標性質(zhì)初步研究
    4.2 土壤氨氧化微生物基因定量分析
        4.2.1 amoA基因定量分析
        4.2.2 Anammox細菌16S rRNA基因定量分析
    4.3 土壤中amoA基因數(shù)量與環(huán)境因素之間的關(guān)系（RDA分析）
    4.4 本章小結(jié)
5 黑龍江玉米農(nóng)田土壤氨氧化微生物群落多樣性研究
    5.1 壤宏基因組DNA提取結(jié)果與分析
    5.2 氨氧化古菌amoA基因擴增結(jié)果與系統(tǒng)發(fā)育分析
        5.2.1 氨氧化古菌amoA基因PCR擴增結(jié)果與分析
        5.2.2 氨氧化古菌amoA基因系統(tǒng)發(fā)育樹的建立與分析
    5.3 氨氧化細菌amoA基因擴增結(jié)果與系統(tǒng)發(fā)育分析
        5.3.1 氨氧化細菌amoA基因PCR擴增結(jié)果與分析
        5.3.2 氨氧化細菌amoA基因系統(tǒng)發(fā)育樹的建立與分析
    5.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
附錄A
附錄B
攻讀碩士學位期間發(fā)表學術(shù)論文情況
致謝



本文編號：3087909