本實驗室前期獲得了灰葡萄孢致病基因BcPDR1,明確了該基因正調(diào)控病菌的生長、發(fā)育和致病力。為明確BcPDR1調(diào)控病菌致病力的分子機制,本研究利用PCR和Western blot技術(shù),檢測BcPDR1的編碼功能;利用Pull down和酵母雙雜交技術(shù),對BcPDR1蛋白的互作蛋白進(jìn)行了篩選與鑒定;利用數(shù)字基因表達(dá)譜、qRT-PCR技術(shù)以及酶活檢測試劑盒,對受BcPDR1影響的過氧化物酶家族基因和胞壁降解酶基因進(jìn)行了篩選與鑒定;利用qRT-PCR及雙基因突變技術(shù),明確了BcPDR1與病菌cAMP和MAPK信號途徑的關(guān)系。主要研究結(jié)果如下:1.灰葡萄孢BcPDR1基因的編碼功能研究。利用BcPDR1基因的特異性引物,對灰葡萄孢野生型菌株的cDNA和基因組DNA進(jìn)行PCR擴增,結(jié)果均獲得了單一條帶,初步確定了BcPDR1的轉(zhuǎn)錄功能;利用Western blot技術(shù),用GST Tag antibody、GFP Tag antibody、BcPDR1 antibody分別對體外誘導(dǎo)表達(dá)的BcPDR1-GST蛋白、回復(fù)突變體CE的總蛋白以及野生型菌株BC22和回復(fù)突變體CE的總蛋白進(jìn)行檢測。結(jié)果所... 

【文章來源】：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

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不同灰葡萄孢野生型


本文編號：3081536