紅樹林作為一個(gè)微生物資源寶庫,咸淡水規(guī)律交替的特殊環(huán)境,強(qiáng)酸性、強(qiáng)還原性、高鹽量的特性使其有可能存在許多具有特殊功能的細(xì)菌,其中不乏活的不可培養(yǎng)（viablebutnon-culturable,VBNC）狀態(tài)菌。但是目前傳統(tǒng)方法只能分離到環(huán)境中不到總量的0.01%-10%微生物,限制了人們對(duì)紅樹林微生物資源的認(rèn)識(shí)并影響了對(duì)其機(jī)能的正確把握。本文利用藤黃微球菌產(chǎn)生的復(fù)蘇促進(jìn)因子（resuscitation promoting factor,Rpf）和MPN（most probable number）培養(yǎng)體系相結(jié)合,分離紅樹林土壤中可復(fù)蘇培養(yǎng)的VBNC資源菌種,并篩選出對(duì)群體感應(yīng)有抑制作用的菌株,嘗試探索微生物VBNC現(xiàn)象與群體感應(yīng)之間的相關(guān)性。本次實(shí)驗(yàn)共分離純化菌株144株,其中VBNC狀態(tài)菌83株,分別屬于4個(gè)門Actinobacteria、Firmicutes、Proteobacteria和Bacteroidetes,6個(gè)綱,12個(gè)目,12個(gè)科和22個(gè)屬�；诶靡褕�(bào)道用于檢測群體感應(yīng)（quorum sensing,QS）的菌株CV026（Chromobacterium violac... 

【文章來源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１?ＭＰＮ培養(yǎng)系圖??Ｆｉｇ．?２．１?ＭＰＮ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｓｙｓｔｅｍ??２．２．４．３Ｒｐｆ？效果評(píng)價(jià)與ＶＢＮＣ狀態(tài)菌的判斷??

在對(duì)土壤樣品的ＭＰＮ培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)過程中，Ｒｐｆ的復(fù)蘇促進(jìn)效果會(huì)有許多??情況，但是主要有三種情況。??第一種（圖２．２），實(shí)驗(yàn)組（１０％Ｒｐｆ）細(xì)菌生長渾濁段數(shù)明顯多于對(duì)照組（１０％??滅活Ｒｐｆ），并且Ｒｐｆ效果值ＶＲ＞５?（９５％置信度），這種情況下可以判斷出加入??Ｒｐｆ上清后實(shí)驗(yàn)組多出來的渾濁段中的細(xì)菌為對(duì)Ｒｐｆ敏感的ＶＢＮＣ菌，該段渾濁??液分離純化得到的單菌落即為得到的可培養(yǎng)化的ＶＢＮＣ狀態(tài)菌，并且屬于土壤??中的優(yōu)勢菌。??第二種是Ｒｐｆ效果值ＶＲ＝１，即實(shí)驗(yàn)組（１０％Ｒｐｆ）和對(duì)照組（１０％滅活Ｒｐｆ）??培養(yǎng)體系中細(xì)菌渾濁段數(shù)一致，兩組實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)體系中分離的細(xì)菌幾乎相同，但是??相同稀釋段中，實(shí)驗(yàn)組的細(xì)菌明顯多于對(duì)照組。這種情況可以判斷為該類菌也屬??于ＶＢＮＣ菌，雖然Ｒｐｆ上清液不具備復(fù)蘇活化作用，但是Ｒｐｆ上清液能明顯促??進(jìn)該類細(xì)菌的生長。??第三種是Ｒｐｆ效果值１＜ＶＲ＜５

?１??０．?０２??圖２．７紅樹林土壤分離ＶＢＮＣ狀態(tài)低ＧＣ革蘭氏陽性菌系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹??Ｆｉｇ．２．７?Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ?ｔｒｅｅ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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