發(fā)布時間：2021-01-30 05:43

　　紅樹林作為一個微生物資源寶庫,咸淡水規(guī)律交替的特殊環(huán)境,強酸性、強還原性、高鹽量的特性使其有可能存在許多具有特殊功能的細菌,其中不乏活的不可培養(yǎng)（viablebutnon-culturable,VBNC）狀態(tài)菌。但是目前傳統(tǒng)方法只能分離到環(huán)境中不到總量的0.01%-10%微生物,限制了人們對紅樹林微生物資源的認識并影響了對其機能的正確把握。本文利用藤黃微球菌產(chǎn)生的復蘇促進因子（resuscitation promoting factor,Rpf）和MPN（most probable number）培養(yǎng)體系相結(jié)合,分離紅樹林土壤中可復蘇培養(yǎng)的VBNC資源菌種,并篩選出對群體感應有抑制作用的菌株,嘗試探索微生物VBNC現(xiàn)象與群體感應之間的相關(guān)性。本次實驗共分離純化菌株144株,其中VBNC狀態(tài)菌83株,分別屬于4個門Actinobacteria、Firmicutes、Proteobacteria和Bacteroidetes,6個綱,12個目,12個科和22個屬�；诶靡褕蟮烙糜跈z測群體感應（quorum sensing,QS）的菌株CV026（Chromobacterium violac... 

【文章來源】：浙江師范大學浙江省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１?ＭＰＮ培養(yǎng)系圖??Ｆｉｇ．?２．１?ＭＰＮ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｓｙｓｔｅｍ??２．２．４．３Ｒｐｆ？效果評價與ＶＢＮＣ狀態(tài)菌的判斷??

在對土壤樣品的ＭＰＮ培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)過程中，Ｒｐｆ的復蘇促進效果會有許多??情況，但是主要有三種情況。??第一種（圖２．２），實驗組（１０％Ｒｐｆ）細菌生長渾濁段數(shù)明顯多于對照組（１０％??滅活Ｒｐｆ），并且Ｒｐｆ效果值ＶＲ＞５?（９５％置信度），這種情況下可以判斷出加入??Ｒｐｆ上清后實驗組多出來的渾濁段中的細菌為對Ｒｐｆ敏感的ＶＢＮＣ菌，該段渾濁??液分離純化得到的單菌落即為得到的可培養(yǎng)化的ＶＢＮＣ狀態(tài)菌，并且屬于土壤??中的優(yōu)勢菌。??第二種是Ｒｐｆ效果值ＶＲ＝１，即實驗組（１０％Ｒｐｆ）和對照組（１０％滅活Ｒｐｆ）??培養(yǎng)體系中細菌渾濁段數(shù)一致，兩組實驗培養(yǎng)體系中分離的細菌幾乎相同，但是??相同稀釋段中，實驗組的細菌明顯多于對照組。這種情況可以判斷為該類菌也屬??于ＶＢＮＣ菌，雖然Ｒｐｆ上清液不具備復蘇活化作用，但是Ｒｐｆ上清液能明顯促??進該類細菌的生長。??第三種是Ｒｐｆ效果值１＜ＶＲ＜５

?１??０．?０２??圖２．７紅樹林土壤分離ＶＢＮＣ狀態(tài)低ＧＣ革蘭氏陽性菌系統(tǒng)發(fā)育進化樹??Ｆｉｇ．２．７?Ｎｅｉｇｈｂｏｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ?ｔｒｅｅ?ｓｈｏｗｉｎｇ?ｔｈｅ

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3008357