根瘤菌-豆科植物固氮體系的共生固氮量約占生物固氮總量的65%,是生物固氮中固氮量最多、效率最高的體系,開展根瘤菌菌種資源調(diào)查、遺傳多樣性及結(jié)瘤機(jī)制等研究對(duì)更好地了解該共生體系具有重要意義。成都平原肥沃土壤和適宜的氣候?yàn)榇蠖埂⑼愣�、蠶豆等植物提供了良好的生長(zhǎng)環(huán)境和條件。那么,多種豆科植物長(zhǎng)期輪作、套作會(huì)對(duì)土壤中根瘤菌的類群分布產(chǎn)生怎樣的影響。本研究從成都平原采集豌豆根瘤及其栽培土壤,并通過(guò)捕捉試驗(yàn)獲得了與蠶豆、苜蓿和大豆結(jié)瘤的根瘤菌,采用BOXAIR-PCR、16S rDNA PCR-RFLP、16S rDNA序列、持家基因序列和共生基因序列分析等方法對(duì)獲得的供試菌株進(jìn)行研究分析,獲得了以下結(jié)果：（1）研究區(qū)域內(nèi)的土壤中廣泛存在著能夠與豌豆、蠶豆、苜蓿和大豆等豆科植物共生結(jié)瘤的根瘤菌種群。（2） BOXAIR-PCR指紋圖譜將豌豆根瘤分離所得105株菌株分為6類,其中遺傳群ⅠⅡ包含的菌株最多為54株,16S rDNA PCR-RFLP分析則將供試菌株分為11種16S rDNA遺傳圖譜類型,兩種分析方法的結(jié)果顯示出一定相似性。在此基礎(chǔ)上選擇38株代表菌株采用16S rDNA序列分析,結(jié)果表... 

【文章來(lái)源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：89 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 引言
    1.2 根瘤菌分類研究進(jìn)展
        1.2.1 根瘤菌的發(fā)現(xiàn)與命名
        1.2.2 根瘤菌的傳統(tǒng)分類系統(tǒng)
        1.2.3 根瘤菌的現(xiàn)代分類系統(tǒng)
        1.2.4 根瘤菌系統(tǒng)中的命名爭(zhēng)議
    1.3 根瘤菌多樣性研究方法
        1.3.1 表型多樣性研究方法
        1.3.2 遺傳多樣性研究方法
        1.3.3 小結(jié)
    1.4 根瘤菌多樣性及基因轉(zhuǎn)移研究現(xiàn)狀
        1.4.1 根瘤菌多樣性研究現(xiàn)狀
        1.4.2 根瘤菌基因橫向轉(zhuǎn)移研究現(xiàn)狀
    1.5 本研究立題依據(jù)及主要研究?jī)?nèi)容
        1.5.1 立題依據(jù)
        1.5.2 研究?jī)?nèi)容
        1.5.3 技術(shù)路線
第二章 成都平原豌豆根瘤菌遺傳多樣性研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 樣品采集
        2.1.2 豌豆根瘤菌分離純化
        2.1.3 DNA的提取
        2.1.4 BOXAIR-PCR指紋圖譜分析
        2.1.5 16S rDNA PCR-RFLP分析
        2.1.6 代表菌株16S rDNA基因序列分析
        2.1.7 數(shù)據(jù)分析與處理
    2.2 結(jié)果分析
        2.2.1 供試菌株生長(zhǎng)特性及形態(tài)
        2.2.2 BOX-PCR指紋圖譜結(jié)果分析
        2.2.3 16S rDNA PCR-RFLP結(jié)果分析
        2.2.4 16S rDNA序列分析
    2.3 討論
第三章 成都平原土壤中四種豆科植物根瘤菌種群多樣性及基因橫向轉(zhuǎn)移研究
    3.1 材料與方法
        3.1.1 供試土壤
        3.1.2 盆栽豆科植物捕捉根瘤菌
        3.1.3 根瘤菌分離純化
        3.1.4 供試菌株的選取及DNA提取
        3.1.5 16S rDNA PCR擴(kuò)增
        3.1.6 持家基因（atpD,glnⅡ）擴(kuò)增測(cè)序
        3.1.7 共生基因（nodc,nifH）擴(kuò)增測(cè)序
        3.1.8 數(shù)據(jù)處理
    3.2 結(jié)果分析
        3.2.1 盆栽結(jié)瘤及菌株分離結(jié)果
        3.2.2 豌豆、蠶豆根瘤菌相關(guān)基因序列分析結(jié)果
        3.2.3 苜蓿根瘤菌相關(guān)基因序列分析結(jié)果
        3.2.4 大豆根瘤菌相關(guān)基因序列分析結(jié)果
    3.3 討論
        3.3.1 成都平原土壤中根瘤菌種群多樣性及系統(tǒng)發(fā)育地位
        3.3.2 成都平原土壤中根瘤菌基因橫向轉(zhuǎn)移初探
第四章 成都平原豌豆根瘤菌遺傳型地理分布與土壤理化性質(zhì)的相關(guān)性研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 土壤樣品制備
        4.1.2 土壤理化性質(zhì)測(cè)定
        4.1.3 數(shù)據(jù)處理
    4.2 結(jié)果分析
        4.2.1 土壤理化性質(zhì)分析結(jié)果
        4.2.2 土壤理化性質(zhì)與根瘤菌種群分布相關(guān)性分析
    4.3 討論
第五章 全文結(jié)論與研究建議
    5.1 結(jié)論
    5.2 研究建議
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄一：部分培養(yǎng)基及試劑配方
附錄二：部分已提交至GenBank的序列登錄號(hào)
附錄三：部分未提交序列
攻讀學(xué)位期間所獲得科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同農(nóng)業(yè)種植方式對(duì)土壤中硝態(tài)氮淋失的影響研究[J]. 徐力剛,王曉龍,崔銳,張奇.  土壤. 2012(02)
[2]豌豆品種比較和分析評(píng)價(jià)[J]. 辛元鳳.  種子. 2011(06)
[3]我國(guó)亞熱帶地區(qū)快生型大豆根瘤菌遺傳多樣性研究[J]. 楊成運(yùn),周俊初,楊江科,段廣才.  河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(01)
[4]黃土高原地區(qū)大豆根瘤菌的遺傳多樣性和系統(tǒng)發(fā)育[J]. 張紅俠,馮瑞華,李俊,關(guān)大偉,曹鳳明.  微生物學(xué)報(bào). 2010(11)
[5]豆科植物共生結(jié)瘤的分子基礎(chǔ)和調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 丑敏霞,魏新元.  植物生態(tài)學(xué)報(bào). 2010(07)
[6]遼寧豌豆生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展思路[J]. 趙秋,何偉鋒.  現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技. 2010(10)
[7]環(huán)境微生物多樣性研究方法進(jìn)展[J]. 竇敏娜.  環(huán)境研究與監(jiān)測(cè). 2010(01)
[8]生物多樣性國(guó)際研究態(tài)勢(shì)分析[J]. 王雪梅,曲建升,李延梅,張志強(qiáng).  生態(tài)學(xué)報(bào). 2010(04)
[9]系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建方法研究[J]. 馮思玲.  信息技術(shù). 2009(06)
[10]西北部分重金屬礦區(qū)天藍(lán)苜蓿根瘤菌生理生化特性及16S rDNA PCR-RFLP分析[J]. 位秀麗,付蕓蕓,韋革宏.  干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究. 2009(02)



本文編號(hào)：2991711