番茄灰霉病菌是由半知菌亞門灰葡萄孢屬（Botrytis cinerea）真菌侵染所引起對番茄危害較重的病害,影響果實產量和品質。篩選灰霉病拮抗菌并制備生物菌肥是生物防治植物病害的重要途徑。目前,對生物菌肥的研究大多數(shù)針對一種拮抗菌,單一菌株的防病效果較復合菌株低,防治效果不理想。鑒此,本研究從寧波番茄保護地健康植株根際土壤篩選出兩株對番茄灰霉病菌有高效抑制作用的菌株LM-Y和LM-N,對其進行鑒定,研究復合菌株對番茄灰霉病的抑菌特性及適宜發(fā)酵條件,以海藻液為載體制備復合生物海藻肥,通過室內盆栽試驗來初步探究海藻菌肥的防病和促生長效果,為生產復合微生物肥料提供依據(jù)。主要研究結果如下:1、番茄灰霉病拮抗菌的分離鑒定。采用稀釋涂布及平板劃線法分離純化菌株,平板對峙法初篩得到24株對番茄灰霉病菌具有拮抗作用的生防菌。以水稻赤霉病菌和油菜立枯絲核菌為指示菌,復篩選取對兩種病原菌均有拮抗作用的菌株最終得到2株高效抑制番茄灰霉病菌的菌株,分別命名為LM-Y和LM-N。結合形態(tài)特征、生理生化分析和16srDNA序列構建系統(tǒng)發(fā)育樹,鑒定LM-Y為解淀粉芽孢桿菌,LM-N為甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌。2、拮抗菌株... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上菌株的菌落形態(tài)??Ｆｉｇ．?２－１?Ｃｏｌｏｎｙ?ｆｏｒｍ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎｓ?ｏｎ?ｂｅｅｆ?ｅｘｔｒａｃｔ?ｐｅｐｔｏｎｅ?ｍｅｄｉｕｍ??

“＋”表示陽性；表示陰性?Ｎｏｔｅ：“＋”ｐｏｓｉｔｉｖｅ；“－”ｎｅｇａｔｉｖｅ。??２．３．２＿３菌株ＬＭ－Ｙ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列測定??ＰＣＲ產物凝膠電泳檢測菌株ＬＭ－Ｙ產物長度約為１５００ｂｐ左右（圖２－３），??擴增片段經測序獲知ＬＭ－Ｙ的１６Ｓ?ｒＤＮＡ序列長度為１４２３ｂ?（圖２－４），將該序??１８??

列用ＢＬＡＳＴ軟件與ＮＣＢＩ數(shù)據(jù)庫中的序列進行同源性比對發(fā)現(xiàn)，ＬＭ－Ｙ菌株１６??Ｓ?ｒＤＮＡ序列與解淀粉芽孢桿菌ａ７ｗ＿ｙ／ｏ／每的序列相似度高達９９．??９９％，在建立的系統(tǒng)發(fā)育樹上（圖２－５）也發(fā)現(xiàn)ＬＭ－Ｙ菌株與解淀粉芽孢桿菌具有??較高的同源性，遺傳距離緊密。結合以上形態(tài)學、生理生化特性及１６Ｓ?ｒＤＮＡ分??子生物學鑒定結果，確定ＬＭ－Ｙ屬于芽孢桿菌屬ｓｐ．）中的解淀粉芽孢桿??菌（加＾／心ａ—／〇％ｗ吻ｃ／ｅｒａ）。該菌株現(xiàn)保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會??普通微生物中心，保藏編號：ＣＧＭＣＣ?Ｎｏ．１３５４２。??１４２３ｂｐ?￣?１４３７ｂｐ??圖２－３拮抗細菌１６ＳｒＤＮＡＰＣＲ擴增結果??Ｆｉｇ．?２－３?Ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?１６Ｓ?ｒＤＮＡ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｗｏ?ｓｔｒａｉｎｓ??１９??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2973689