七星瓢蟲Coccinella septempunctata L.是一種優(yōu)良的捕食性天敵昆蟲,在生物防治中具有重要作用。該瓢蟲能以成蟲進行兼性滯育越冬或越夏,通過調控其滯育,不僅能延長產品貨架期,提高產品防控作用效果,也可促進其大規(guī)模生產和應用。滯育七星瓢蟲可顯著積累脂質,脂質是昆蟲滯育發(fā)育過程中的重要營養(yǎng)和能源物質,研究脂質積累對揭示滯育調控的分子機制至關重要。脂肪酸合成是脂積累的重要組成部分,脂肪酸合酶（fatty acid synthase,FAS）和�；�-CoAΔ11去飽和酶（acyl-CoA Delta（11）desaturase,FADΔ11）是七星瓢蟲脂肪酸合成的關鍵調控酶。FAS是一種多功能復合酶,其催化產物軟脂酸以甘油三酯的形式儲存能量,還能參與合成磷脂、細胞膜構造等;FADΔ11能催化飽和脂肪酸氧化生成不飽和脂肪酸,也可在昆蟲性信息素合成中發(fā)揮作用,但這兩種酶在滯育中的功能及其調控機制等尚不明確。本研究以七星瓢蟲為試驗對象,克隆了七星瓢蟲2個Fas基因和1個FadΔ11基因全長,分析了這三個基因在七星瓢蟲滯育發(fā)育及解除過程中的表達模式,并利用RNA干擾技術驗證了脂肪酸... 

【文章來源】：中國農業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

昆蟲脂肪酸合成通路及參Fig.1.1Fattyacidsynthesispa脂肪是昆蟲體內重要的貯能和供能物質；脂不飽和酯酰輔酶Adesat

圖 2.1 七星瓢蟲滯育雌成蟲總 RNAig. 2.1 Total RNA extracted from Coccinella septempunctat果數(shù)據(jù)分析結果，分別以被注釋為脂肪酸合酶 FAcontig5526、contig7795 為模板設計 5 對特異性引14795）的序列片段 contig3704、contig2152、co釋為�；�-CoAΔ11 去飽和酶基因（gi|156549403物（引物信息見表）�？� RNA 提取后，通過 RT到目的基因中間序列，擴增結果如圖 2.2M 1 3 4 15

為模板設計 1 對特異性引物（引物信息見表）�？� RNA 提取后，通過 RT-PCR 合成 cDNA 第一條鏈，利用 PCR 方法擴增得到目的基因中間序列，擴增結果如圖 2.2圖2.2 七星瓢蟲CsFas2（A）、CsFas1（B）以及CsFadΔ11（C）基因中間序列PCR產物電泳圖Fig. 2.2 CsFas2（A）、CsFas1（B）and CsFadΔ11（C） intermediate sequences of Coccinella septempunctataobtained from amplication of PCR2.3.3 RACE 結果根據(jù)中間片段拼接所得序列設計了 CsFas2、CsFas1 和 CsFadΔ11 三個基因的 RACE 引物（具體信息見表）。利用 Clontech 公司的 SMARTerRACE5’/3’Kit 試劑盒擴增三個基因的 5’和 3’端，28s18s10025050075020001000M 1 3 2M2 34 1510005002000750250100MA BC

【參考文獻】：
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本文編號：2899282