刺吸式口器害蟲是農(nóng)業(yè)和林業(yè)中的重要害蟲。這些害蟲通常具有繁殖力快,世代多,蟲口易反彈,抗藥性強和分布廣。昆蟲病原真菌從昆蟲體壁直接侵入的方式,使得其被認為在刺吸式口器害蟲的防治上可作為化學殺蟲劑的替代物。本文從安徽農(nóng)業(yè)大學安徽省微生物防治重點實驗室菌種庫中篩選出一株昆蟲病原真菌玫煙色棒束孢菌株Ifu-13-a,通過雙相發(fā)酵研究其發(fā)酵技術(shù)。每8h定期取樣,檢測其菌絲生物量和生長狀態(tài)。結(jié)果顯示,該菌株在SDY液體培養(yǎng)基中于25℃下液體發(fā)酵,在第104h菌絲生物量達到最大值,然后逐漸下降。此時顯微形態(tài)觀察也證實此時發(fā)酵液中出現(xiàn)大量形態(tài)清晰的長菌絲體及大量芽生孢子,因此確定Ifu-13-a在該培養(yǎng)條件下的最佳液體發(fā)酵時間為104h,并且此時的發(fā)酵液可以在隨后的固體發(fā)酵中用作液體種子。在固體發(fā)酵工藝研究中,前期通過罐頭瓶發(fā)酵對培養(yǎng)基配方進行了篩選,篩選獲得的最優(yōu)基礎培養(yǎng)基為11%麥麩、76%棉籽殼,其產(chǎn)孢量可達2.15×10~9孢子/g。在后繼的淺盤發(fā)酵工藝中,增加了江西天人生態(tài)的企業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)培養(yǎng)基進行對照比較,結(jié)果表明,篩選得到的最優(yōu)固體培養(yǎng)基其在產(chǎn)孢能力上要高于企業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基,單位面積的固體發(fā)酵效率提高了21.8%。另外,研究發(fā)現(xiàn)固體培養(yǎng)的堆量極大影響著培養(yǎng)基的料溫,2cm和4cm堆量有著完全不同的料溫曲線。在環(huán)境溫度18℃下,4cm堆量的淺盤發(fā)酵工藝中,其發(fā)酵溫度最高上升了5-6℃。從室內(nèi)生物測定結(jié)果來看,Ifu-13-a菌株對多目標刺吸式口器害蟲具有很高的毒力水平,但仍存在較明顯的寄主�；�。在1.0×10~6孢子/ml接種濃度下,Ifu-13-a菌株對溫室白粉虱、棉蚜和小綠葉蟬成蟲的累積死亡率均達100%,顯示出了Ifu-13-a菌株對這3種目標害蟲的高致病力;從致死中時LT_(50)來看,Ifu-13-a菌株對溫室白粉虱、小綠葉蟬和棉蚜成蟲的致死中時均在4-5d;而梨冠網(wǎng)蝽、繡線菊蚜和紫薇長斑蚜在1.0×10~8孢子/ml濃度下,累積死亡率才達到81.25%、61.4%和86.36%,致死中時在6-8d。在環(huán)境相對濕度低的溫室試驗中,采用1.0×10~7個孢子/ml的施用量通過低量噴霧來控制兩種目標害蟲:溫室白粉虱和棉蚜。試驗期間對照區(qū)的棉蚜的蟲口密度一直處于上升狀態(tài);初始蟲口密度為40頭/株,到第13d時,增長至118頭/株,而處理區(qū)蟲口密度則從40頭/株下降至36頭/株,校正防效為46.39%。與棉蚜不同,Ifu-13-a菌株對溫室白粉虱的防治使得蟲口密度下降明顯。溫室白粉虱在噴霧防治第4d時,其蟲口密度由150頭/株下降到36頭/株,然后就處于一定的蟲口波動狀態(tài);在第13d,其蟲口密度為78頭/株,校正防效為92.86%。玫煙色棒束孢Ifu-13-a菌株在環(huán)境相對濕度較高的的田間試驗中,在1.0×10~7孢子/ml濃度下噴霧防治棉蚜,棉蚜種群在第10d時的蟲口減退率和校正防效分別達到96.2%和95.9%,表現(xiàn)出優(yōu)異的田間防治效果。溫室試驗與田間開放地試驗的不同防治效果進一步確證了環(huán)境濕度是影響真菌侵染過程與防治效率的重要性。室內(nèi)生測和田間試驗驗證了玫煙色棒束孢Ifu-13-a菌株在對多種刺吸式害蟲表現(xiàn)出的高毒力水平,證明了其對粉虱、葉蟬、蚜蟲等多目標害蟲的巨大控制潛力,適合作為生物殺蟲劑開發(fā)。
【學位單位】：安徽農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S476.12
【部分圖文】：

圖 3-1 菌株室內(nèi)致病力測定Fig.3-1 Laboratory assessment on fungal pathogenicity注：左圖是人工氣候箱，右圖是聚乙烯盒。Note: The left picture is an artificial climate box, and the right picture is a polyethylene box.3.2.7 玫煙色棒束孢 Ifu-13-a 菌株的溫室試驗3.2.7.1 溫室試驗設計于九月中旬對棉蚜和溫室白粉虱成蟲進行溫室試驗。每個處理設置 6 組重復，分別對棉蚜、溫室白粉虱成蟲設置兩個處理組：對照組：噴灑 0.05%吐溫 80 作為空白對照（CK）。處理組：噴灑 1.0×107孢子/ml 孢子懸浮液。

圖 3-1 菌株室內(nèi)致病力測定Fig.3-1 Laboratory assessment on fungal pathogenicity注：左圖是人工氣候箱，右圖是聚乙烯盒。Note: The left picture is an artificial climate box, and the right picture is a polyethylene box.3.2.7 玫煙色棒束孢 Ifu-13-a 菌株的溫室試驗3.2.7.1 溫室試驗設計于九月中旬對棉蚜和溫室白粉虱成蟲進行溫室試驗。每個處理設置 6 組重復，分別對棉蚜、溫室白粉虱成蟲設置兩個處理組：對照組：噴灑 0.05%吐溫 80 作為空白對照（CK）。處理組：噴灑 1.0×107孢子/ml 孢子懸浮液。

繞每棵植株噴霧兩圈。噴霧接種后第二天開始每天觀察棉蚜和溫室白粉虱，記錄蟲口數(shù)，并將死蟲挑出，放在培養(yǎng)皿中保濕培養(yǎng)，以確定真菌侵染情在溫室內(nèi)放置溫濕度計，每天觀察并記錄溫度和濕度，記錄完畢后進行校零.8 玫煙色棒束孢 Ifu-13-a 菌株的田間試驗.8.1 田間試驗設計于九月下旬對棉蚜進行田間試驗。每個處理設置 10 組重復，每組 50 只棉對棉蚜成蟲設置兩個處理組：對照組：噴灑 0.05%吐溫 80 作為空白對照（CK）。處理組：噴灑 1.0×107孢子/ml 孢子懸浮液。
【參考文獻】

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本文編號：2851353