細(xì)菌揮發(fā)物在“細(xì)菌-線蟲”互作中發(fā)揮重要作用,同時(shí)吸引線蟲的細(xì)菌揮發(fā)物在線蟲生防中有著潛在的應(yīng)用價(jià)值。本文開(kāi)展三方面的研究?jī)?nèi)容:首先,以秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)和全齒復(fù)活線蟲(Panagrellus redivivus)為靶標(biāo),從各種生境來(lái)源的細(xì)菌中篩選出一批誘吸線蟲的細(xì)菌資源;其次,通過(guò)解析16S rRNA基因序列,從而確定吸引線蟲細(xì)菌的分類地位;最后,經(jīng)由GC-MS分析和純品驗(yàn)證,鑒定誘吸線蟲的細(xì)菌有機(jī)揮發(fā)物的類型。主要結(jié)果歸納如下:1.揮發(fā)物誘吸線蟲的細(xì)菌篩選從來(lái)自三七內(nèi)生菌、山葵內(nèi)生菌以及溶洞細(xì)菌的450株細(xì)菌中,以秀麗隱桿線蟲和全齒復(fù)活線蟲為靶標(biāo),應(yīng)用培養(yǎng)皿分區(qū)劃線法篩選,獲得對(duì)秀麗隱桿線蟲具有強(qiáng)誘吸活性(CI ≥ 0.5)的菌株有17株,中等誘吸活性(0.3 ≤CI0.5)的菌株57株,弱誘吸活性(0.1 ≤CI0.3)的菌株有77株。即共計(jì)有154株菌株對(duì)秀麗隱桿線蟲具有誘吸性。其中,52株分離自植物內(nèi)生菌,102株分離自溶洞土壤。對(duì)全齒復(fù)活線蟲具有強(qiáng)誘吸活性(CI ≥ 0.5)的菌株72株,中等誘吸活性(0.3 ≤CI0.5)的菌株46株,弱誘吸活性(0.1 ≤CI0.3)的菌株有44株。即共計(jì)有167株菌株對(duì)全齒復(fù)合線蟲具有誘吸性。其中,66株來(lái)自植物內(nèi)生菌,101株來(lái)自溶洞土壤。2.揮發(fā)物吸引線蟲的細(xì)菌多樣性分析從揮發(fā)物誘吸線蟲的細(xì)菌中選取有誘吸性的75株為代表,基于16S rRNA基因序列分析確定其分類地位。結(jié)果顯示,這75株菌株主要分布在3個(gè)類群:放線菌門、變形菌門、和厚壁菌門。其中,放線菌門的細(xì)菌共有45株,占總數(shù)的60%;在放線菌門中,優(yōu)勢(shì)菌屬為鏈霉菌屬(Streptomyces),包含5個(gè)種,共計(jì)13株菌。3.細(xì)菌誘吸線蟲的揮發(fā)物組分分析選出8株對(duì)秀麗隱桿線蟲誘吸性最強(qiáng)的菌株,分別進(jìn)行GC/MS和純品驗(yàn)證,鑒定出誘吸線蟲的細(xì)菌揮發(fā)物共11種:2-辛酮、甲基壬基甲酮、2-十四酮、2-癸酮、二甲基二硫、2-十三烷酮、2-壬酮、苯甲醚、2,5-二甲基乙基苯酚、環(huán)十五酮、2-庚酮。其中,2-十三烷酮在0.25 mg/mL濃度下的誘吸活性最強(qiáng)。
【學(xué)位單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S432.45
【部分圖文】：

Ｉ?１??ｎ?ｊｙｉ??圖２：?土壤稀釋涂布１?Ｏ＇４濃度的平板細(xì)菌菌落生長(zhǎng)情況??Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｃｏｌｏｎｉｅｓ?ｂｙ?ｓｐｒｅａｄｉｎｇ?１０￣４?ｄｉｌｕｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ｓｏｉｌ?ｓａｍｐｌｅ?ｏｎ?ｍｅｄｉｕｍ?

３．２吸引線蟲的細(xì)菌資源評(píng)估??應(yīng)用培養(yǎng)皿分區(qū)劃線的方法測(cè)定了?４５０株細(xì)菌對(duì)線蟲的誘吸效果。其中的２５０??株用于吸引秀麗隱桿線蟲的篩選（表１，圖４）：強(qiáng)誘吸活性（Ｃ泛０．５）的菌株有??１７株，占總數(shù)的１１．３０％；中等誘吸活性（０．３丈１＜０．５）的菌株有５７株，占總數(shù)??的２２．８％；弱誘吸活性（０．１丈１＜０．３的菌株有７７株，占總數(shù)的３０．１％；無(wú)誘吸性??（ＣＩＣ０．１）的菌株有９６株，占總數(shù)的３８％。??４５０株菌株的２００株用于吸引全齒復(fù)活線蟲的篩選（表１，圖４）：強(qiáng)誘吸活性??（ＣＩ２０．５）的菌株有７２株，占總數(shù)的３６．７３％；中等誘吸活性（０．３￡ＣＩ＜０．５）的菌??株有４６株，占總數(shù)的２３．４７％；弱誘吸活性（０．匕ＣＩＣ０．３）的菌株有４４株，占總??數(shù)的２２．４５％；無(wú)誘吸性（ＣＩＳ０．１）的菌株有３２株，占總數(shù)的１６．３％。??６０％??３０．１％??５０％?－??４〇％?３６＾｜％??３０％?■秀１！隱＇桿線蟲??＂?２：＾｜°?２２Ｊ％ｌ－４７％?＿?「全齒線蟲??２０％?１＾３％??１１?ｔｍ??０％??ｉ－?！?ｉ?ｒ??ＣＫ０．１?０．１＜ＣＩ＜０．３?０．３＜ＣＫ０．５?Ｃｌ＞０．５??圖４：誘吸線蟲的細(xì)菌菌株??Ｆｉｇｕｒｅ４：?Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｓｔｒａｉｎｓ?ａｔｔｒａｃｔｉｎｇ?ｎｅｍａｔｏｄｅｓ??在篩選的菌株中
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本文編號(hào)：2851100