核盤菌(Sclerotinia sclerotiorum)和指狀青霉菌(Penicillium digitatum)都屬于危害極大的死體營養(yǎng)型植物病原真菌,核盤菌引起油菜、花生、大豆等作物的菌核病,指狀青霉菌引起柑橘綠霉病的發(fā)生。目前丙環(huán)唑在我國僅以混劑形式登記用于油菜菌核病的防治,對(duì)柑橘綠霉病的防治尚未登記。本論文主要研究了丙環(huán)唑?qū)吮P菌和指狀青霉菌的生物活性和對(duì)生理方面的影響,對(duì)科學(xué)利用丙環(huán)唑防治這兩種病原菌具有一定的理論和實(shí)踐指導(dǎo)意義。測(cè)定了丙環(huán)唑?qū)Σ勺园不帐〉暮吮P菌的有效中濃度(EC_(50))值,建立了核盤菌對(duì)丙環(huán)唑的相對(duì)敏感性基線。2008年(N=75)和2014年(N=75)菌株EC_(50)值的頻率分布均符合正態(tài)分布,K-S正態(tài)檢驗(yàn)P值分別為0.119和0.502。2008年和2014年菌株的EC_(50)平均值分別為0.338±0.174μg/mL(SD)和0.315±0.135μg/mL(SD),兩年之間無顯著差異(P=0.375)。40μg/mL丙環(huán)唑?qū)ε柙杂筒司瞬”Ｗo(hù)作用防效為82.4%,80μg/mL的丙環(huán)唑?qū)ε柙杂筒松暇瞬〉闹委熥饔梅佬?0.7%。光學(xué)顯微鏡觀察顯示在含0.4μg/mL丙環(huán)唑的PDA上生長的菌絲與對(duì)照相比頂端分支增多,節(jié)間縮短。丙環(huán)唑可以顯著(P0.05)提高核盤菌菌絲細(xì)胞膜的通透性和菌絲細(xì)胞內(nèi)甘露聚糖的含量。丙環(huán)唑?qū)?18株指狀青霉菌EC_(50)自然對(duì)數(shù)值的頻率分布表明18株菌株已對(duì)丙環(huán)唑產(chǎn)生抗藥性,抗性頻率為15.25%,抗性倍數(shù)為2.7~6.5倍。丙環(huán)唑相對(duì)敏感菌株的EC_(50)平均值為0.104±0.039μg/mL(SD)。丙環(huán)唑和抑霉唑?qū)χ笭钋嗝咕腅C_(50)值之間相關(guān)性顯著(R~2=0.7537,P0.001)。200和400μg/mL丙環(huán)唑浸果處理后的柑橘儲(chǔ)存40 d對(duì)綠霉病的防效分別為63.1%和84.3%。40和100μg/mL丙環(huán)唑浸果處理顯著(P0.05)降低孢子產(chǎn)量和孢子的致病力。碘化丙啶對(duì)孢子染色觀察結(jié)果顯示在含有0.1μg/mL丙環(huán)唑的PDA上形成的孢子細(xì)胞膜完整性破壞率為25.6%。孢子萌發(fā)過程中丙環(huán)唑?qū)е骆咦蛹?xì)胞內(nèi)活性氧累積。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)經(jīng)丙環(huán)唑處理的菌絲細(xì)胞壁增厚。與敏感菌株HBWH-22(EC_(50)=0.049μg/mL)和HBWH-26(EC_(50)=0.051μg/mL)相比,抗性菌株JXGZ-2(EC_(50)=0.429μg/mL)和JXGZ-179(EC_(50)=0.675μg/mL)丙環(huán)唑作用靶標(biāo)酶基因CYP51的序列沒有發(fā)現(xiàn)突變或重復(fù)序列插入,但CYP51基因的相對(duì)表達(dá)量分別是敏感菌株的1.57倍(P=0.029)和1.63倍(P=0.007)。
【學(xué)位單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：TQ455.4;S432.44
【部分圖文】：

O2，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖1-1所示，丙環(huán)唑原藥為淡黃色粘稠液體，易溶于有機(jī)溶劑。丙環(huán)唑具有很好的內(nèi)吸輸導(dǎo)作用，可以被根莖葉吸收并傳導(dǎo)，其主要作用機(jī)制為抑制病原菌麥角甾醇合成從而影響細(xì)胞膜的正常結(jié)構(gòu)與功能。丙環(huán)唑的殺菌譜非常廣，對(duì)大多數(shù)的真菌都有理想的防治效果（李新杰和劉曉鵬 2005）。丙環(huán)唑1990年就開始在我國用于小麥全蝕病的防治（張炳炎等 1994），根據(jù)我國農(nóng)藥信息網(wǎng)（http://www.icama.org.cn/hysj/index.jhtml）上登記情況顯示丙環(huán)唑已經(jīng)應(yīng)用于水稻紋枯病、稻瘟病、稻曲病、銹病，小麥白粉病、根腐病，香蕉葉斑病，蓮藕葉斑病，蘋果樹褐斑病，玉米大斑病、小斑病，馬鈴薯早疫病，油菜菌核病等病害的防治中。丙環(huán)唑抗性發(fā)展比較緩慢

華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019 屆碩士研究生（畢業(yè)）論文新鮮菌絲的 PDA 切成約 1 cm 1 cm 大小的菌塊，用鑷子輕，在光學(xué)顯微鏡下觀察菌絲形態(tài)。環(huán)唑?qū)吮P菌菌絲甘露聚糖含量的影響參照陳志穎等（2016）甘露聚糖含量測(cè)定的方法，稍有改動(dòng)作：稱取 0.040 g 甘露聚糖標(biāo)準(zhǔn)品，用 400mL 的無菌水溶 的甘露聚糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。用移液槍分別吸取 0、0.2、0.3、0.9 mL的上述甘露聚糖標(biāo)準(zhǔn)溶液于10mL具塞試管中，以無菌%苯酚溶液，渦旋振蕩，使反應(yīng)體系充分混勻，立刻加入 5 液后將試管放在沸水中水解 20 min，取出冷卻至室溫，在波值，以甘露聚糖含量為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲

2.2.1 核盤菌對(duì)丙環(huán)唑的相對(duì)敏感性基線丙環(huán)唑?qū)?2008 年和 2014 年各 75 株核盤菌菌株 EC50頻率分布見圖 2-2A，丙環(huán)唑?qū)Σ捎?008年的75株核盤菌菌株EC50值的頻率分布通過統(tǒng)計(jì)軟件SPSS（ver. 20）KS 正態(tài)性檢驗(yàn)符合正態(tài)分布（P = 0.119），EC50值的分布范圍為 0.067~0.756 μg/mL，平均值為 0.338 μg/mL 0.174（SD）。丙環(huán)唑?qū)?2014 年 75 株核盤菌菌株的 EC50值通過統(tǒng)計(jì)軟件 SPSS（ver. 20）KS 正態(tài)性檢驗(yàn)同樣符合單峰正態(tài)分布（P = 0.502），EC50值的分布范圍為 0.094~0.551 μg/mL，平均值為 0.315 μg/mL 0.135（SD）。t檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)兩個(gè)年份菌株的 EC50值之間差異不顯著（P = 0.375），說明兩年的核盤菌菌株對(duì)丙環(huán)唑都是相對(duì)敏感的，沒有出現(xiàn)敏感性下降現(xiàn)象。丙環(huán)唑?qū)?2008 年和 2014年核盤菌菌株 EC50對(duì)數(shù)值的頻率分布如圖 2-2B，KS 正態(tài)性檢驗(yàn)更加趨向單峰正態(tài)分布（P = 0.830，P = 0.909）。本試驗(yàn)中丙環(huán)唑?qū)蓚�(gè)年份的核盤菌菌株 EC50值的頻率分布可以作為核盤菌對(duì)丙環(huán)唑的相對(duì)敏感基線。
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 賀立紅;汪躍華;蘭霞;;拮抗酵母菌對(duì)指狀青霉菌的抑菌作用[J];仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院學(xué)報(bào);2010年04期

2 柏云;朱曉紅;仲敬榮;褚明福;;鈾離子的微生物吸附回收技術(shù)[J];核化學(xué)與放射化學(xué);2011年04期

3 李紅葉 ,謝清云 ,宋愛環(huán);抑霉唑敏感與抗性指狀青霉菌株CYP51基因序列比較[J];菌物系統(tǒng);2003年01期

4 ;生物防治[J];生物技術(shù)通報(bào);1990年07期

5 郭好禮;;用哈棲木霉(Trichoderma harzianum)的細(xì)胞壁分解酶從指狀青霉(Penicillium digitatum)的菌絲中制備原生質(zhì)體[J];生物技術(shù)通報(bào);1986年02期

6 楊勝利,趙國強(qiáng),于國強(qiáng),韓紹印,丁蘭萍,宋愛云,宮亞歐;指狀青霉提取物對(duì)大腸桿菌infA基因的致突變研究[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);1999年02期

7 黃文彬;;納他霉素對(duì)采后柑桔病菌抑菌效果的研究[J];現(xiàn)代園藝;2019年23期

8 李百健;曾榮;黃長干;陳金印;;植物殺菌劑的篩選[J];西南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年10期

9 閔曉芳;鄧伯勛;陳麗鋒;余慧;;柑橘采后致病青霉的鑒定[J];果樹學(xué)報(bào);2007年05期

10 梅松;;書庫防霉[J];河南圖書館季刊;1982年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 王英;基于連續(xù)的Ugi/Staudinger/氮雜Wittig反應(yīng)合成新型氮雜環(huán)[D];華中師范大學(xué);2014年

2 王龍;（催化型氦雜）Wittig反應(yīng)的研究及其在具有生物活性雜環(huán)化合物合成中的應(yīng)用[D];華中師范大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 段亞茹;柑橘指狀青霉環(huán)境pH信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子PalF基因的功能分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

2 張俊;丙環(huán)唑?qū)吮P菌和指狀青霉菌抑制作用的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2019年

3 張?jiān)艥?基于指狀青霉多組學(xué)數(shù)據(jù)的全基因組代謝模型構(gòu)建與耐藥過程模擬[D];華中師范大學(xué);2017年

4 張靜;貯藏過程中兩種類型柑橘角質(zhì)層變化及其對(duì)指狀青霉侵染的作用[D];湖南大學(xué);2018年

5 王瀾;根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)柑橘指狀青霉突變體庫的擴(kuò)建及其致病性分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2018年

6 王笑;檸檬烯對(duì)指狀青霉孢子萌發(fā)的作用初探[D];湘潭大學(xué);2015年

7 謝清云;指狀青霉（Penicillium Digitatum）對(duì)抑霉唑抗性及分子機(jī)理研究[D];浙江大學(xué);2002年

8 吳雅蘭;幾種芳香物質(zhì)對(duì)柑橘采后主要致病菌的作用[D];湘潭大學(xué);2017年

9 劉志濤;環(huán)境pH值對(duì)柑橘指狀青霉致病力的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2017年

10 牛玉慧;柑橘指狀青霉中兩種新型dsRNA病毒的分離鑒定與特性研究[D];華中師范大學(xué);2017年

本文編號(hào)：2848567