七星瓢蟲(chóng)是優(yōu)良的天敵昆蟲(chóng),可憑滯育特性抵御逆境脅迫,提高種群生存能力。為研究七星瓢蟲(chóng)的滯育分子機(jī)制,構(gòu)建抑制性消減雜交文庫(kù),經(jīng)反向Northern斑點(diǎn)雜交技術(shù)進(jìn)一步篩選,得到231個(gè)差異點(diǎn)。blastx/n比對(duì)后,正、反向文庫(kù)分別得到差異表達(dá)基因64和54個(gè),GO分類和PATHWAY分析表明,差異表達(dá)基因參與的生物過(guò)程涉及滯育的信號(hào)傳導(dǎo)、生物合成、初級(jí)代謝和次級(jí)代謝等。文庫(kù)中發(fā)現(xiàn)多種基因,為進(jìn)一步篩選、克隆、分析滯育相關(guān)基因提供線索。著重討論了與抗寒性相關(guān)的28 k D抗干燥應(yīng)激蛋白、卵巢發(fā)育相關(guān)的Cullin 3蛋白,能量代謝相關(guān)的異檸檬酸脫氫酶的生物學(xué)功能,進(jìn)而推測(cè)其與七星瓢蟲(chóng)滯育的相關(guān)性。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試試劑
    1.2 供試?yán)ハx(chóng)
    1.3 七星瓢蟲(chóng)總RNA提取及雙鏈c DNA合成
    1.4 SSH-c DNA文庫(kù)的構(gòu)建
    1.5 反向Northern斑點(diǎn)雜交進(jìn)一步確認(rèn)差異陽(yáng)性克隆
2 結(jié)果與分析
    2.1 樣品總RNA濃度和完整性檢測(cè)報(bào)告
    2.2 文庫(kù)消減效率檢測(cè)
    2.3 抑制性消減雜交文庫(kù)插入片段的PCR鑒定
    2.4 SSH文庫(kù)反向Northern斑點(diǎn)雜交
    2.5 生物信息學(xué)分析
3 討論

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