黃瓜棒孢葉斑病是由多主棒孢(Corynespora cassiicola)侵染引起的,是近期威脅黃瓜生產(chǎn)的重要流行病害,造成黃瓜的大面積減產(chǎn),尋找有效的防治措施是促進(jìn)當(dāng)前黃瓜種植產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的主要任務(wù)。目前關(guān)于黃瓜棒孢葉斑病的防治方法主要還是采用化學(xué)防治,但由于該病原菌易變異,且長期頻繁地施加化學(xué)試劑如殺菌劑等,又會導(dǎo)致該病原菌產(chǎn)生抗藥性,更會引發(fā)食品安全和環(huán)境問題,因此黃瓜生產(chǎn)特別需要低毒、無害、環(huán)境友好型的防治方法。放線菌是一種分布廣、種類多、功能性強(qiáng)的微生物,所以近年來常選用放線菌防治植物病害。本研究以黃瓜根際土壤及伴生小麥根際土壤為分離對象,采用多種培養(yǎng)基對放線菌進(jìn)行分離純化,通過抗黃瓜棒孢葉斑病原真菌及其他植物病原真菌和抗細(xì)菌活性篩選得到一株活性較好的鏈霉菌Streptomyces NEAU-J2,通過離體葉片和盆栽試驗(yàn)研究了該菌株對黃瓜棒孢葉斑病的防治效果并對其次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離,。同時(shí),對得到的另一株活性放線菌新種進(jìn)行多相分類學(xué)研究。本試驗(yàn)主要結(jié)果如下:(1)通過五種培養(yǎng)基(GS、HV、AAG、CPA、DPA)共分離出262株放線菌,其中119株分離自黃瓜根際土壤,其余143株分離自伴生小麥根際土壤。(2)通過抗黃瓜棒孢葉斑病病原菌活性初篩和復(fù)篩后,有32株放線菌對黃瓜棒孢葉斑病病原菌抑制率達(dá)到20%以上,其中有16株抑制率達(dá)到了40%以上;選取了抑菌活性最好的10株放線菌進(jìn)行廣譜的抑菌活性測定,發(fā)現(xiàn)菌株NEAU-J2具有較好的廣譜抑菌作用。(3)黃瓜離體葉片和盆栽試驗(yàn)表明,用NEAU-J2孢子懸液及發(fā)酵濾液分別處理黃瓜葉片后,對黃瓜棒孢葉斑病有很好的防治效果。其中發(fā)酵濾液對黃瓜棒孢葉斑病的防效最好,在離體葉片和盆栽試驗(yàn)中的防效分別為81.2%和82.1%。(4)通過培養(yǎng)特性分析,菌株NEAU-J2培養(yǎng)特征與鏈霉菌屬吻合,初步確定菌株NEAU-J2屬于鏈霉菌屬。此外功能特征分析表明,NEAU-J2發(fā)酵液對黃瓜棒孢葉斑病的抑制作用具有良好的紫外線穩(wěn)定性,且菌株NEAU-J2可以產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶,單位菌落透明圈直徑為16.2mm。(5)對菌株NEAU-J2的次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離,初步得到三個(gè)已報(bào)道的化合物,分別為17-O-demethyl-geldanamycin、pteridic acid hydrate和pteridic acid F,其中pteridic acid hydrate對黃瓜棒孢葉斑病的抑制作用最好,當(dāng)pteridic acid hydrate濃度為5 mg?mL~(-1)時(shí),對黃瓜棒孢葉斑病的抑制率為56.3%。(6)本試驗(yàn)通過對黃瓜棒孢葉斑病抑制率最好的10株放線菌測序發(fā)現(xiàn)了一株放線菌新種NEAU-D10,采用多相分類學(xué)方法分別從分子水平、形態(tài)學(xué)水平、化學(xué)分類水平、生理生化水平及全基因組分析對其進(jìn)行研究。確定這株放線菌屬于鏈霉菌屬,并將其命名為Streptomyces inhibens。
【學(xué)位單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S436.421.19;S476.1

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本文編號：2814976