發(fā)布時間：2020-08-17 15:14

【摘要】：中華通草蛉chrysoperla sinica(Tjeder)是棉田中常見的捕食性昆蟲天敵,在我國分布廣泛,種群數(shù)量龐大。為探討其內(nèi)生菌對宿主昆蟲的生理功能和微生態(tài)學(xué)意義,了解中華通草蛉在不同發(fā)育階段的分布規(guī)律,其體內(nèi)微生物組成是否會隨著發(fā)育時期而發(fā)生改變,以及與不同屬草蛉(大草蛉)體內(nèi)微生物組成是否存在差異,對進一步了解其體內(nèi)的微生物對于宿主的生殖和發(fā)育以及環(huán)境適應(yīng)性具有重要意義,并為中華通草蛉的人工培養(yǎng)等提供理論基礎(chǔ)。本研究主要是利用16SrDNA基因序列,構(gòu)建內(nèi)生菌16SrDNA克隆文庫,研究了棉田中中華通草蛉種群體內(nèi)微生物菌群結(jié)構(gòu),將不同雌雄的中華通草蛉以及棉田中常見的大草嶺體內(nèi)的微生物進行對比,并采用高通量測序技術(shù)對不同發(fā)育階段的中華通草蛉體內(nèi)微生物多樣性進行研究,取得主要研究結(jié)果如下:1.中華通草蛉內(nèi)生菌類群主要分3大:γ變形菌γ-Proteobacteria、α變形菌α-Proteobacteria和β變形菌β-Proteobacteria。按照屬劃分,中華通草蛉成蟲內(nèi)生細菌主要包含沃爾巴克氏體Wolbachia sp.、立克次氏體Rickettsia sp.、腸桿菌屬Enterobacter sp.、Uncultured Methyloversatilis sp.、沙雷氏菌Serratieae sp.、泛生菌屬Pantoea sp.和歐文氏菌Erwinia sp。僅在雌蟲中存在Cosenzaea sp.,雄蟲中存在醋酸桿菌屬Acetobacter sp.、Asaia sp.、Rosenbergiella sp.、檸檬酸桿菌屬Citrobacter sp.。并得到中華通草蛉內(nèi)生菌的優(yōu)勢菌群為沃爾巴克氏體Wolbachia pipientis,在雌雄成蟲中分別占23.2%和18.4%。次優(yōu)勢菌為立克次氏體Rickettsia sp.、腸桿菌屬Enterobacter sp.的細菌結(jié)果證明中華通草蛉存在多種內(nèi)生菌,雌雄群體中內(nèi)生菌菌群間存在差異。2.通過構(gòu)建大田大草蛉內(nèi)生菌16SrDNA克隆文庫,得到在大草蛉體內(nèi)有不動桿菌屬Acinetobacter sp.、泛生菌屬Pantoea sp.、腸桿菌屬Uncultured Enterobacter sp.、克雷伯氏菌屬klebsiella sp以及Escherichia coli屬的細菌,大草蛉以及中華通草蛉體內(nèi)都有泛生菌屬Pantoea sp.、腸桿菌屬Uncultured Enterobacter sp.,選取中華通草蛉的次優(yōu)勢菌屬腸桿菌并與大草蛉中的腸桿菌測序結(jié)果進行同源性分析,腸桿菌屬的細菌在中華通草蛉以及大草蛉中具有較高的同源性。3.通過提取七個不同發(fā)育階段中華通草蛉基因組DNA,對16SrRNA V3-V4區(qū)測序,共獲得用于物種分類的OUT123條,涵蓋了8門、16綱、29目、62科、89個屬的細菌。微生物多樣性分析表明,在不同發(fā)育階段,中華通草蛉內(nèi)生菌具有較高的細菌多樣性,其多樣性指數(shù)存在差異,不同發(fā)育階段其體內(nèi)優(yōu)勢菌分布呈現(xiàn)出動態(tài)變化。菌群分類發(fā)現(xiàn),變形菌門(Proteobacteria)在宿主生活史中是主要的細菌菌門,其相對豐度占群落的29%-98.41%。在不同生長發(fā)育階段的樣品菌群豐度最高的菌屬中,立克次氏體(Rickettsia)菌屬出現(xiàn)在中華通草蛉的整個生長發(fā)育階段,因此初步推測這種內(nèi)生細菌是通過垂直傳播的方式進行分布的。綜上所述:本文分別研究了中華通草蛉雌雄成蟲體內(nèi)細菌的組成,研究證實雌雄成蟲體內(nèi)的微生物菌群存在差異。并將中華通草蛉與大草蛉體內(nèi)細菌組成進行對比,泛生菌屬Pantoea sp.、腸桿菌屬Uncultured Enterobacter sp.是大草蛉以及中華通草蛉的公有菌屬,結(jié)果證明這兩種菌屬都可在不同宿主體內(nèi)生存。并將不同宿主體內(nèi)的腸桿菌屬用DNAMAN進行比對,發(fā)現(xiàn)體內(nèi)的腸桿菌具有很高的同源性。對中華通草蛉整個生活史中的微生物多樣性進行研究,結(jié)果表明不同發(fā)育階段體內(nèi)微生物多樣性存在差異。
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S476.2
【圖文】：

13圖 2-1 基于中華通草蛉雌成蟲內(nèi)生菌 16SrDNA 序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig 2-1 Bacterial phylogenetic tree of females of Chrysoperla sinica (Tjeder) based on 16SrDNA sequen

17圖 3-1 基于中華通草蛉雄成蟲內(nèi)生菌 16SrDNA 序列的系統(tǒng)發(fā)育樹-1 Bacterial phylogenetic tree of male of Chrysoperla sinica (Tjeder) based on 16SrDNA s

24圖 4-1 基于大草蛉成蟲內(nèi)生菌 16SrDNA 序列的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig 4-1 Bacterial phylogenetic tree of Chrysopa pallens based on 16SrDNA sequence

【參考文獻】

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本文編號：2795487