【摘要】：灰飛虱(SBPH)Laodelphax striatellus(Fallen),對中國的水稻、小麥和玉米造成嚴(yán)重危害。抗生素類殺菌劑井岡霉素由于毒性低,殘留低,成本低等特點,可以有效防治水稻紋枯病。而在水稻生長期灰飛虱(SBPH)和水稻紋枯病(RSB)總是同時期出現(xiàn)。其中的關(guān)鍵科學(xué)問題是井岡霉素如何有效的控制了田間水稻紋枯病同時控制了灰飛虱的種群。本試驗通過井岡霉素與對照處理灰飛虱進行蛋白質(zhì)組學(xué)分析,篩選出灰飛虱經(jīng)井岡霉素處理后下調(diào)表達的關(guān)鍵蛋白,以闡明井岡霉素抑制灰飛虱生殖的分子機制,同時為田間精準(zhǔn)用藥提供了參考依據(jù)。1、井岡霉素與對照處理間灰飛虱的比較蛋白質(zhì)組學(xué)分析本試驗進行了井岡霉素處理過的灰飛虱蛋白組分析,篩選出井岡霉素處理灰飛虱與對照差異表達的蛋白,以闡明井岡霉素抑制灰飛虱生殖的分子機制,同時揭示井岡霉素噴霧處理抑制灰飛虱生殖的原因。(JGM)井岡霉素處理組vs(Control)對照處理組共分析得到95個顯著表達差異蛋白(其中62個上調(diào),33個下調(diào))。并將差異蛋白參照數(shù)據(jù)庫對比注釋與富集分析獲得關(guān)鍵的生物學(xué)信息,挑選出井岡霉素處理(JGM)vs對照(Control)組中和脂肪酸和蛋白質(zhì)代謝關(guān)系密切且顯著下調(diào)的葡萄糖脫氫酶GDH作為候選蛋白進一步研究。2、干擾葡萄糖脫氫酶基因?qū)绎w虱生殖的影響根據(jù)灰飛虱GDH已知片段序列克隆得到GDH全長序列。分別通過RNAi飼喂dsGDH和井岡霉素噴霧處理灰飛虱雌蟲,JGM處理組GDH表達量顯著低于Control處理組(↓72%)、Control+dsGDH處理組比Control處理組也顯著下降(↓74%)。同時JGM處理組和Control+dsGDH處理組顯著影響了灰飛虱雌蟲產(chǎn)卵量(分別下降35.7%和48.6%)。生化試驗表明井岡霉素處理和dsGDH處理總脂肪和脂肪酸的含量及體重明顯比對照的雌蟲下降。此外,兩個處理的雌蟲卵巢解剖均沒有觀察到明顯的卵細胞。
【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S433
【圖文】：

圖２差異蛋白質(zhì)的條形圖。Ｘ軸：比較組的名稱；Ｙ軸：差異蛋白數(shù)量。紅色柱：上調(diào)；綠色柱：下調(diào)。逡逑邐邐邋邐表邋３．下調(diào)蛋白（ＣｏｎｔｒｏｌＶＳＪＧＭ）邐逡逑Ｃｏｖｅ邋Ｕｎｉｑｕｅ邐Ｆｏｌｄ逡逑

４．３定量重復(fù)分析逡逑ＣＶ為標(biāo)準(zhǔn)偏差（ＳＤ）與平均值的比值。使用ＣＶ值來評估重現(xiàn)性，ＣＶ越低，重復(fù)性逡逑越好（圖３）。逡逑ＣＶ邋ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ逡逑：逡逑§：…ｍｅａｎｃｖ邋：邋０．０７７逡逑＿邐１０％：邐０．７６９逡逑２０％邋：邋０．９４０逡逑３０％邋：邋０．９７９邐々逡逑＾邐Ｈ邐４０％邋：邋０．９９２邋－Ｓ邋＼逡逑Ｈ邐５０％邋：邋０．９９６邐茺逡逑ｇ＊邐ｏ邐６０％邋：邋０．９９８邐ｐ逡逑ｔ邐§－邐■邐７０％：邐０．９９９邐１逡逑＇邐８０％邋：邋０．９９９邐。逡逑１邐９０％邋：邋０．９９９邋＿0逡逑１００％：邋１．０００邋＾逡逑＞１００％邋：邋１．０００逡逑Ｉ邋Ｉ邐Ｓ逡逑■邋■逡逑。１邋Ｈ邋ｉｌ邋—卿邐Ｌ０逡逑１０％邐２０％邐３０％邐４０％邐５０％邐６０％邐７０％邐８０％邐９０％邐１００％邐＞１００％逡逑％ｖａｒｔａｔｉｏｎ逡逑圖３復(fù)制中的ＣＶ分布。Ｘ軸是重復(fù)樣品的蛋白質(zhì)比率之間的偏差。Ｙ軸是在某一角度的蛋白質(zhì)包含逡逑定量蛋白質(zhì)的百分比。逡逑４．４已鑒定蛋白質(zhì)ＧＯ注釋逡逑為了識別使用ｉＴＲＡＱ技術(shù)鑒定的蛋白質(zhì)的功能，我們進行了基因本體注釋。在灰飛逡逑虱樣品中鑒定出總共的４７４９個蛋白中，有２３１４個映射到基因功能分類數(shù)據(jù)庫中，對應(yīng)的逡逑生物進程、細胞組成和分子功能三個項（ｏｎｔｏｌｏｇｙ）分別有１６２４、１１６３和１９９６個蛋白質(zhì)，逡逑被分到５２個ＧＯ項中，生物進程２２個，細胞組成１６個，分子功能１４個。逡逑蛋白質(zhì)生物進程分類的基礎(chǔ)表明，被注釋的蛋白質(zhì)主要參與細胞進程（２０．５９％），代逡逑謝進程（１９．６２％）

我們發(fā)現(xiàn)大多數(shù)類別與細胞部分相關(guān)（２３．６９％），細胞器（１５．１３％），大分子復(fù)合物逡逑（１１．３４％）（圖５）。在分子功能的基礎(chǔ)上，我們研究中的蛋白質(zhì)涉及催化活性（４５．０４％），逡逑結(jié)合（３９．６８％），結(jié)構(gòu)分子活性（５．５５％）（圖６）。逡逑

【參考文獻】

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本文編號：2780008