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煙葉殘?jiān)虘B(tài)培養(yǎng)混合菌制備微生物菌肥

發(fā)布時(shí)間:2020-07-27 16:24
【摘要】:煙草生產(chǎn)過程中會(huì)產(chǎn)生約25%的廢棄煙葉以及不合格的新鮮煙葉,直接廢棄造成資源的極大浪費(fèi)。本研究以干煙葉或鮮煙葉提取活性成分后的殘?jiān)鼮榕囵B(yǎng)基,研究了細(xì)菌A混合菌株和細(xì)菌A混合菌株-細(xì)菌B-霉菌A混菌固態(tài)培養(yǎng)制備菌肥的條件,考察了殘留乙醇和萃余液的影響,最終確定了實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的混菌制備工藝。以提取過活性成分的廢棄煙葉殘?jiān)鼮榕囵B(yǎng)基,篩選得到能在煙葉固態(tài)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌A,考察菌株混合時(shí)間和混合方式、煙葉原料性質(zhì)、料層厚度、含水量等因素對(duì)固態(tài)培養(yǎng)的影響,進(jìn)行單因素條件優(yōu)化。得到干煙葉殘?jiān)虘B(tài)培養(yǎng)細(xì)菌A菌肥的工藝條件為:500 mL錐形瓶裝60 g煙葉殘?jiān)?其含水量為飽和含水量58%,接種量10%,培養(yǎng)溫度37?C,培養(yǎng)時(shí)間11天~12天,芽孢數(shù)達(dá)10~122 cfu/g以上。以提取過活性成分的廢棄煙葉殘?jiān)鼮榕囵B(yǎng)基,篩選得到能在煙葉固態(tài)培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌B和霉菌A。單因素考察三種菌(細(xì)菌B、細(xì)菌A和霉菌A)的接種比例、培養(yǎng)溫度、料層厚度等對(duì)混合菌固態(tài)培養(yǎng)的影響。得到干煙葉殘?jiān)虘B(tài)培養(yǎng)混菌菌肥的工藝條件:細(xì)菌A/細(xì)菌B/霉菌A的種子單獨(dú)培養(yǎng),按細(xì)菌B:細(xì)菌A:霉菌A=6:3:1的初始比例接種10%于固態(tài)培養(yǎng)基中,室溫15℃~25℃,250 mL錐形瓶中裝干煙葉35 g(飽和含水量58%),料層厚度3.5 cm。培養(yǎng)10天后,煙葉中每種菌的芽孢均達(dá)到10~(11)cfu/g。放大至500 m L,裝70 g干煙葉,料層厚度為4.5 cm,室溫15℃~20℃,培養(yǎng)10天,煙葉中每種菌的芽孢數(shù)均達(dá)到10~9 cfu/g。煙葉原料預(yù)處理時(shí)以乙醇為溶劑,提取活性組分后有萃余液,因而考察了殘留乙醇和萃余液添加對(duì)混菌固態(tài)培養(yǎng)的影響。煙葉殘?jiān)袣埩舻囊掖?1%~3%)抑制三種菌的生長(zhǎng),但在室溫(8℃~15℃)時(shí)培養(yǎng)8天總芽孢數(shù)仍能達(dá)到10~6 cfu/g;用50%~60%的萃余液配制培養(yǎng)基,室溫(8℃~15℃)混菌培養(yǎng)7天后,細(xì)菌A的芽孢數(shù)達(dá)到10~8 cfu/g;以提取活性組分后的新鮮煙葉殘?jiān)鼮樵线M(jìn)行混菌固態(tài)培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)該原料更適合細(xì)菌A的固態(tài)培養(yǎng),室溫(8℃~15℃)培養(yǎng)7天,細(xì)菌A芽孢數(shù)可達(dá)10~9 cfu/g。在不保持濕度的條件下,10 g干燥殘?jiān)芍苽浜考s50%的濕菌肥約20 g。1噸廢棄煙葉經(jīng)煙堿和香料成分提取后可獲得500 kg干燥殘?jiān)?可制備濕菌肥(含水量50%)約1噸。
【學(xué)位授予單位】:大連理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:TQ446

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2772081

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