【摘要】：三七為多年生宿根傳統(tǒng)藥材,具有巨大的藥用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值;但由于其生境的特殊性,三七常常受到多種病害的侵襲;其中免耕和化學(xué)農(nóng)藥及化學(xué)肥料的施用等措施所致的土壤微生失衡是導(dǎo)致病害頻繁發(fā)生的重要因素之一。細(xì)菌作為土壤微生物中的一個(gè)重要類群,亦在三七健康與發(fā)病中發(fā)揮著重要的作用。因此,研究三七種植土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)及變化,發(fā)現(xiàn)病原細(xì)菌和有益的活性細(xì)菌,對(duì)于三七細(xì)菌性病害的發(fā)生和預(yù)防具有重要的指導(dǎo)意義。論文采用MiSeq高通量測(cè)序技術(shù),對(duì)采自昆明市石林縣長(zhǎng)湖鎮(zhèn)和紅河州彌勒市虹溪鎮(zhèn)的三七種植地土壤細(xì)菌的多樣性進(jìn)行了分析。石林三七種植地土樣中細(xì)菌分布于40門,104綱,204目,389科,746屬(其中包含未分類單元);虹溪三七種植土樣中細(xì)菌分布于39門,102綱,198目,371科,716屬(其中包含未分類單元)。總體來說,石林三七種植地中細(xì)菌的多樣性較好于虹溪地。在門水平上,兩三七種植地土壤中的優(yōu)勢(shì)類群以及優(yōu)勢(shì)類群的比重基本相同。在目水平上,石林、虹溪兩種植地表現(xiàn)出較大的群落差異,Rhizobiales、Gemmatimonadales、Acidobacteriales、Xanthomonad、Burkholderiales為兩地共同的優(yōu)勢(shì)目,Xanthomonadeles、Rhizobiales、Acidobacteriales、Burkholderiales在虹溪種植地的相對(duì)豐度高于石林種植地,Gemmatimonadales、Sphingomonadales、Micrococcales、Sphingobacteriales在石林種植地的相對(duì)豐度均明顯高于虹溪種植地。石林三七種植地從移栽到第二年的11月份,其細(xì)菌多樣性總體呈現(xiàn)出隨種植時(shí)間增長(zhǎng)而降低的趨勢(shì)。虹溪三七種植地在移栽的第一年至第二年5月份,其細(xì)菌多樣性均無(wú)明顯變化,而到第二年的8月份至11月份,其細(xì)菌多樣性指數(shù)呈現(xiàn)出略增加的趨勢(shì),總體則表現(xiàn)為隨種植時(shí)間的增長(zhǎng)其土壤細(xì)菌多樣性增加。采用平板對(duì)峙法和發(fā)酵液稀釋擴(kuò)散法對(duì)分離的三七種植土壤細(xì)菌進(jìn)行抗三七主要病原真菌的活性篩選,共得到212株拮抗菌株。其中,有86株對(duì)一種病原真菌表現(xiàn)出活性;對(duì)兩種致病菌表現(xiàn)出拮抗活性的有95株;同時(shí)對(duì)三種病原真菌具有拮抗活性的有31株,占總活性菌的14.6%。菌株P(guān)H10001、PH10006在平板對(duì)峙培養(yǎng)中和在發(fā)酵液共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中對(duì)三種三七的主要病原菌Fusarium oxysporum、F.solani、F.flocciferum均表現(xiàn)出很強(qiáng)的拮抗活性,是可用于三七病害的生物防治。活性細(xì)菌多樣性分析結(jié)果表明在兩樣點(diǎn)中,拮抗菌株主要集中在芽孢桿菌屬(Bacillus)和假單胞菌屬(Pseudomonas)。在賴氏菌屬(Leifsonia)、微球菌屬(Micrococcus)、紅球菌屬(Rhodococcus)、地桿菌屬(Terrabacter)、北里孢菌屬(Kitasatospora)、迪茨氏菌屬(Dietzia)、鞘氨醇桿菌屬(Sphingobacterium)、噬幾丁質(zhì)菌屬(Chitinophaga)等屬也少量分離得到。選用6種三七田間常施農(nóng)藥,評(píng)估了其對(duì)活性細(xì)菌菌株生長(zhǎng)的影響。其中,農(nóng)藥福美雙對(duì)拮抗菌株的生長(zhǎng)普遍存在影響,檢測(cè)福美雙在不同濃度下對(duì)6株拮抗菌株的影響,發(fā)現(xiàn)在濃度為10μg/ml-400μg/ml時(shí)對(duì)菌株P(guān)H10001、PH10002、PH10003、PH10012、PH10032的生長(zhǎng)菌均有抑制性作用。這些結(jié)果表明,殺真菌的農(nóng)藥對(duì)土壤細(xì)菌也具有很大的影響。
【學(xué)位授予單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S154.3;S567.236
【圖文】：

石林（SL）、虹溪（HX）兩三七種植地48個(gè)樣本物種豐富度稀釋曲線

石林三七種植土樣細(xì)菌在門水平的分布

石林三七種植土樣細(xì)菌在目水平的分布

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2763084