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稻田土壤厭氧氨氧化協(xié)同鐵還原為途徑的氣態(tài)氮素?fù)p失過程及其機(jī)理的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-07-14 08:47
【摘要】:土壤中厭氧氨氧化協(xié)同鐵還原過程,被稱為鐵氨氧化反應(yīng)(Feammox),是厭氧條件下土壤氮素去除的新途徑。施肥作為一種重要的農(nóng)藝措施,其對(duì)鐵氨氧化過程的影響及作用機(jī)制亟待研究。本研究在以南方長(zhǎng)期施肥的稻田土壤為研究對(duì)象,進(jìn)行室內(nèi)土壤泥漿化培養(yǎng)試驗(yàn),采用15N同位素標(biāo)記結(jié)合定量PCR的方法,表征鐵氨氧化反應(yīng)速率及微生物的響應(yīng),并以生物質(zhì)炭為載體,對(duì)驅(qū)動(dòng)該反應(yīng)的深層“電子傳遞體”調(diào)控機(jī)制進(jìn)行探究。本研究從鐵氨氧化反應(yīng)速率表征入手,揭示微觀層面各要素的貢獻(xiàn),最后進(jìn)行微生物驅(qū)動(dòng)的調(diào)控機(jī)制驗(yàn)證,完成了“施肥導(dǎo)致鐵氨氧化速率差異”這一科學(xué)問題“現(xiàn)象-原因-本質(zhì)”的探索,為理解施肥條件下稻田土壤氮循環(huán)過程提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支撐。研究概述如下:(1)通過田間不同施肥土壤樣本的高通量測(cè)序,得出長(zhǎng)期施肥過程能夠顯著提高土壤中鐵氨氧化功能微生物和鐵還原相關(guān)微生物豐度,表明施肥后土壤中可能存在極大的鐵氨氧化潛勢(shì)。(2)進(jìn)行室內(nèi)土壤培養(yǎng)試驗(yàn),量化四種不同施肥土壤中鐵氨氧化反應(yīng)速率強(qiáng)弱,探究相關(guān)微生物群落組成和分布,預(yù)測(cè)其對(duì)稻田生態(tài)系統(tǒng)氮損失貢獻(xiàn)率,結(jié)果表明不施肥土壤中經(jīng)由鐵氨氧化過程的氮素?fù)p失量為3.64 kgN ha-1 year-1,而在施肥土壤中這一損失量高達(dá)15.97-24.91 kgN ha-1 year1,功能微生物酸微菌科A6和有機(jī)質(zhì)輸入觸發(fā)的“電子傳遞體”機(jī)制是導(dǎo)致其差異的主要原因。(3)以生物質(zhì)炭為載體,在不同鐵源存在的情況下,驗(yàn)證以上土培試驗(yàn)過程中“電子傳遞體”機(jī)制對(duì)反應(yīng)的影響,“微生物-電子穿梭體-鐵氧化物”主導(dǎo)的電子傳遞體系,能構(gòu)建微生物及其受體之間電子傳遞的閉環(huán),是調(diào)控鐵氨氧化反應(yīng)過程的內(nèi)在驅(qū)動(dòng)機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】:浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S154.3;S153
【圖文】:

循環(huán)過程,土壤氮素


圖1.1邋土壤氮素循環(huán)過程(Ruiz邋Uriguen;2014)逡逑Figure邋1.1邋Nitrogen邋cycling邋in邋soils逡逑

氨氧化,純培養(yǎng)


圖1.2鐵氨氧化的不同反應(yīng)通路逡逑Figure邋1.2邋Different邋pathways邋in邋Feammox邋reaction逡逑1.3邋土壤氣態(tài)氮損失相關(guān)微生物驅(qū)動(dòng)機(jī)制逡逑在微生物學(xué)領(lǐng)域,純培養(yǎng)的方法是研究微生物生理學(xué)和遺傳學(xué)特性行之有效逡逑的經(jīng)典方法。然而,在復(fù)雜的土壤條件下,能直接純化培養(yǎng)的微生物只占土壤總逡逑量的0.3%,因此,基于富集培養(yǎng)的研究方法會(huì)低估土壤微生物的多樣性(Amann逡逑etaL,1995)。借助分子生物學(xué)手段(定量PCR;克隆測(cè)序;高通量測(cè)序等)探究土逡逑壤微生物的多樣性,能夠打破傳統(tǒng)純培養(yǎng)方法的限制,已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于氮循環(huán)逡逑微生物的研究中(表1.1)。該方法能夠從核糖體RNA的水平上研究土壤微生物群逡逑落的特征,并能夠表征某些編碼特定蛋白的功能基因的豐度及活性。逡逑

功能基因,不同施肥處理,豐度,微生物


邋i邋i逡逑圖2.2不同施肥處理下,土壤反硝化微生物功能基因豐度逡逑Figure邋2.2邋Abundance邋of邋denitrification邋iunctional邋genes邋{narG,邋nirS,邋nirK,逡逑nosZ)邋in邋soil邋sanples邋with邋different邋fertilizer邋treatments逡逑20逡逑

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