發(fā)布時(shí)間：2020-06-19 13:43

【摘要】：灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)是引起多種植物真菌病害的病原菌,對(duì)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量影響很大。在葡萄貯藏期,每年因灰霉病造成的損失達(dá)到20%-30%。當(dāng)前化學(xué)藥劑的使用作為防治葡萄灰霉病的主要方法,不合理施用使環(huán)境產(chǎn)生大量的污染,農(nóng)藥殘留也影響著人們的身體健康。隨著植物病害生物防治研究日趨深入,大量生防菌和其代謝產(chǎn)物被篩選。具有抗逆性強(qiáng)、無(wú)毒無(wú)害等優(yōu)點(diǎn)的生防菌日漸得到人們的認(rèn)可和接受。已有報(bào)道利用木霉菌和啶酰菌可以較好地控制番茄、煙草等作物的灰霉病。然而有關(guān)利用生防芽孢桿菌控制葡萄灰霉病的研究相對(duì)較少。芽孢桿菌作為防治植物病害的生防菌,是一類(lèi)具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值的細(xì)菌,為農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供理論依據(jù)。因此,本研究通過(guò)采集我國(guó)新疆、山東、河北昌黎等葡萄園中葡萄根際的土壤,分離芽孢桿菌菌株,與葡萄灰霉病病原菌灰葡萄孢進(jìn)行對(duì)峙培養(yǎng),獲得具有生防效果的芽孢桿菌菌株,并采用形態(tài)學(xué)觀(guān)察及分子鑒定的方法,確定芽孢桿菌的分類(lèi)地位,最后通過(guò)生防芽孢桿菌菌粉+微量元素水溶肥聯(lián)用對(duì)設(shè)施葡萄灰霉病進(jìn)行防治,以期獲得對(duì)寄主植物無(wú)害高效的生防細(xì)菌菌株。主要取得結(jié)果為:(1)分離得到25株芽孢桿菌;通過(guò)供試菌株與灰葡萄孢離體的對(duì)峙培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)HT3、LLong對(duì)葡萄灰霉病具有明顯的抑制效果,表明HT3和LLong這2株芽孢桿菌可作為防治葡萄灰霉病的潛在拮抗菌株;(2)結(jié)合分子鑒定結(jié)果,確定HT3菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis),LLong菌株為蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus);(3)通過(guò)田間防治試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌HT3+微量元素水溶肥混用對(duì)葡萄灰霉病的防治效果較好,防效達(dá)到85.68%,其次是蠟樣芽胞桿菌LLong+微量元素水溶肥聯(lián)用,防效達(dá)到82.07%;與此相比化學(xué)藥劑腐霉利對(duì)葡萄灰霉病的防治效果均低于前兩者。本研究為葡萄灰霉病的防治提供科學(xué)依據(jù),并為葡萄灰霉病的生防制劑的研發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：河北科技師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S476.1;S436.631.1
【圖文】：

圖 2-1 4 類(lèi)芽孢桿菌菌落形態(tài)Fig. 2-1 Colony morphology of four types of BacillusA. HT3; B. BO2; C. DY; D. LLong2 不同芽孢桿菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定不同芽孢桿菌菌株在 Bioscreen 全自動(dòng)生長(zhǎng)曲線(xiàn)分析儀中得出：不同菌株在 24-48 h 菌株生長(zhǎng)達(dá)到穩(wěn)定期，孢子量達(dá)到最大。則選擇在 36 h 時(shí)與灰葡進(jìn)行對(duì)峙試驗(yàn)（圖 2-2，2-3，2-4）。

土壤里分離純化得到各種不同的芽孢桿菌，根據(jù)菌落形態(tài)、顏色和菌落，再劃線(xiàn)純化培養(yǎng)，篩選出 20 種芽孢桿菌。如圖 2-1 所示四類(lèi)落（圖 2-1）。圖 2-1 4 類(lèi)芽孢桿菌菌落形態(tài)Fig. 2-1 Colony morphology of four types of BacillusA. HT3; B. BO2; C. DY; D. LLong同芽孢桿菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)測(cè)定同芽孢桿菌菌株在 Bioscreen 全自動(dòng)生長(zhǎng)曲線(xiàn)分析儀中得出：不同菌4-48 h 菌株生長(zhǎng)達(dá)到穩(wěn)定期，孢子量達(dá)到最大。則選擇在 36 h 時(shí)與行對(duì)峙試驗(yàn)（圖 2-2，2-3，2-4）。

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本文編號(hào)：2720871