【摘要】：轉(zhuǎn)基因植物進(jìn)行商業(yè)化種植的20多年以來(lái),創(chuàng)造了巨大的農(nóng)藝、環(huán)境、經(jīng)濟(jì)、健康和社會(huì)效益。在轉(zhuǎn)基因作物大面積推廣的今天,其生態(tài)安全性也成了社會(huì)各界日益關(guān)注的問(wèn)題,尤其是轉(zhuǎn)基因植物對(duì)非靶標(biāo)生物的影響。本研究使用Bt蛋白經(jīng)喂食對(duì)蚯蚓進(jìn)行染毒處理,分析比較經(jīng)染毒的蚯蚓在生理指標(biāo)、酶活性、腸道微生物以及體腔細(xì)胞的DNA損傷程度的變化,從而評(píng)價(jià)Bt蛋白的安全性。本實(shí)驗(yàn)的主要研究結(jié)果如下:(1)使用選定的Bt蛋白喂食蚯蚓,蚯蚓在第7d體重有明顯增長(zhǎng),且成活率都在99%以內(nèi)。第7d及第14d,喂食Bt蛋白的蚯蚓的體重增長(zhǎng)率,產(chǎn)卵量以及成活率較對(duì)照組無(wú)明顯差異,說(shuō)明Bt蛋白對(duì)蚯蚓的生長(zhǎng)發(fā)育沒(méi)有顯著抑制作用。(2)對(duì)喂食Bt蛋白蚯蚓體內(nèi)的兩種防御酶SOD、CAT,三種解毒酶POD、GST和AchE,分解有機(jī)物的纖維素酶酶活性測(cè)定分析表明:喂食Bt蛋白的蚯蚓體內(nèi)酶活性與對(duì)照組的蚯蚓體內(nèi)的酶活性指標(biāo)并無(wú)顯著差異,Bt蛋白對(duì)蚯蚓的酶活性無(wú)顯著影響。(3)應(yīng)用彗星實(shí)驗(yàn)對(duì)蚯蚓體腔細(xì)胞DNA的損傷進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果表明:各處理組的體腔細(xì)胞的Olive尾距、尾長(zhǎng)及尾部DNA含量值與對(duì)照組之間無(wú)顯著差異,且在Bt蛋白濃度增加時(shí),蚯蚓的體腔細(xì)胞的DNA損傷并未呈現(xiàn)出較好的劑量-效應(yīng)關(guān)系,因此Bt蛋白并未加強(qiáng)對(duì)蚯蚓的體腔細(xì)胞DNA的損傷程度。(4)采用Biolog方法通過(guò)多樣性指數(shù)Shannon、優(yōu)勢(shì)度指數(shù)Simpson以及均勻度指數(shù)McIntosh對(duì)喂食Bt蛋白的蚯蚓腸道菌群的多樣性進(jìn)行了分析,結(jié)果表明:與對(duì)照組相比各組蚯蚓的腸道菌群在菌群的物種多樣性、優(yōu)勢(shì)菌群以及群落均一度等方面均無(wú)顯著差異,因此Bt蛋白對(duì)蚯蚓腸道菌群微生物無(wú)顯著影響。
【圖文】：

蚯蚓的體重有了明顯的增加，喂食 Bt 蛋白的蚯蚓的體重增長(zhǎng)率與著差異。在第 14d 時(shí)，部分組的蚯蚓體重增長(zhǎng)率較第 7d 時(shí)有所降低，分析卵所致，蚯蚓大量產(chǎn)卵后體重有所下降，但是體重增長(zhǎng)率在各組之間并沒(méi)有說(shuō)明 Bt 蛋白對(duì)蚯蚓的生長(zhǎng)無(wú)顯著影響。蚯蚓的產(chǎn)蚓繭數(shù)在第 7d 以及第 14d性差異，表明 Bt 蛋白對(duì)蚯蚓的產(chǎn)卵行為無(wú)顯著影響。為進(jìn)一步對(duì)本次實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了下一步的生化研究。 蛋白對(duì)蚯蚓生化反應(yīng)指標(biāo)的測(cè)定個(gè)處理設(shè)置 3 個(gè)重復(fù)，飼養(yǎng)至第 14d 時(shí)，于每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)挑取 3 條蚯蚓，要 9 條蚯蚓分別對(duì)其進(jìn)行總蛋白含量、6 種酶活性、DNA 損傷程度以及腸道的檢測(cè)。t 蛋白對(duì)蚯蚓體內(nèi)的蛋白含量的影響

山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文使用 Bt 蛋白 Cry1Ab 在喂食濃度為 1mg/kg 及 10mg/kg 的蚯蚓體內(nèi)均可以的 Bt 蛋白，使用 Bt 蛋白 Cry1F 及 Cry3B 在喂食濃度為 10mg/kg 的蚯蚓體少量的 Bt 蛋白。結(jié)果證明蚯蚓已對(duì) Bt 蛋白進(jìn)行取食，且在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)還解排出體外。 蛋白對(duì)蚯蚓體內(nèi)的超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響物體在受到外界的有毒物質(zhì)的脅迫時(shí)，為及時(shí)清除體內(nèi)的有毒物質(zhì)，生物 活性升高，從而防止有毒物質(zhì)對(duì)生物體的損傷。當(dāng)蚯蚓受到有毒物質(zhì)脅迫動(dòng)防御系統(tǒng)對(duì)有毒物質(zhì)進(jìn)行防御，提高防御酶活性以更高效地清除體內(nèi)多保護(hù)機(jī)體免受外界不良影響的損傷。如圖 3-2 所示，喂食 Bt 蛋白的蚯蚓的照稍有增高，但均維持在 35U-37U 之間。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S188

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10 楊愛(ài)馥;周遵春;于U，

本文編號(hào)：2710696