【摘要】：轉基因植物進行商業(yè)化種植的20多年以來,創(chuàng)造了巨大的農藝、環(huán)境、經濟、健康和社會效益。在轉基因作物大面積推廣的今天,其生態(tài)安全性也成了社會各界日益關注的問題,尤其是轉基因植物對非靶標生物的影響。本研究使用Bt蛋白經喂食對蚯蚓進行染毒處理,分析比較經染毒的蚯蚓在生理指標、酶活性、腸道微生物以及體腔細胞的DNA損傷程度的變化,從而評價Bt蛋白的安全性。本實驗的主要研究結果如下:(1)使用選定的Bt蛋白喂食蚯蚓,蚯蚓在第7d體重有明顯增長,且成活率都在99%以內。第7d及第14d,喂食Bt蛋白的蚯蚓的體重增長率,產卵量以及成活率較對照組無明顯差異,說明Bt蛋白對蚯蚓的生長發(fā)育沒有顯著抑制作用。(2)對喂食Bt蛋白蚯蚓體內的兩種防御酶SOD、CAT,三種解毒酶POD、GST和AchE,分解有機物的纖維素酶酶活性測定分析表明:喂食Bt蛋白的蚯蚓體內酶活性與對照組的蚯蚓體內的酶活性指標并無顯著差異,Bt蛋白對蚯蚓的酶活性無顯著影響。(3)應用彗星實驗對蚯蚓體腔細胞DNA的損傷進行了檢測,結果表明:各處理組的體腔細胞的Olive尾距、尾長及尾部DNA含量值與對照組之間無顯著差異,且在Bt蛋白濃度增加時,蚯蚓的體腔細胞的DNA損傷并未呈現出較好的劑量-效應關系,因此Bt蛋白并未加強對蚯蚓的體腔細胞DNA的損傷程度。(4)采用Biolog方法通過多樣性指數Shannon、優(yōu)勢度指數Simpson以及均勻度指數McIntosh對喂食Bt蛋白的蚯蚓腸道菌群的多樣性進行了分析,結果表明:與對照組相比各組蚯蚓的腸道菌群在菌群的物種多樣性、優(yōu)勢菌群以及群落均一度等方面均無顯著差異,因此Bt蛋白對蚯蚓腸道菌群微生物無顯著影響。
【圖文】：

蚯蚓的體重有了明顯的增加，喂食 Bt 蛋白的蚯蚓的體重增長率與著差異。在第 14d 時，部分組的蚯蚓體重增長率較第 7d 時有所降低，分析卵所致，蚯蚓大量產卵后體重有所下降，但是體重增長率在各組之間并沒有說明 Bt 蛋白對蚯蚓的生長無顯著影響。蚯蚓的產蚓繭數在第 7d 以及第 14d性差異，表明 Bt 蛋白對蚯蚓的產卵行為無顯著影響。為進一步對本次實驗進行了下一步的生化研究。 蛋白對蚯蚓生化反應指標的測定個處理設置 3 個重復，飼養(yǎng)至第 14d 時，于每個重復中隨機挑取 3 條蚯蚓，要 9 條蚯蚓分別對其進行總蛋白含量、6 種酶活性、DNA 損傷程度以及腸道的檢測。t 蛋白對蚯蚓體內的蛋白含量的影響

山東農業(yè)大學碩士學位論文使用 Bt 蛋白 Cry1Ab 在喂食濃度為 1mg/kg 及 10mg/kg 的蚯蚓體內均可以的 Bt 蛋白，使用 Bt 蛋白 Cry1F 及 Cry3B 在喂食濃度為 10mg/kg 的蚯蚓體少量的 Bt 蛋白。結果證明蚯蚓已對 Bt 蛋白進行取食，且在實驗結束時還解排出體外。 蛋白對蚯蚓體內的超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響物體在受到外界的有毒物質的脅迫時，為及時清除體內的有毒物質，生物 活性升高，從而防止有毒物質對生物體的損傷。當蚯蚓受到有毒物質脅迫動防御系統(tǒng)對有毒物質進行防御，提高防御酶活性以更高效地清除體內多保護機體免受外界不良影響的損傷。如圖 3-2 所示，喂食 Bt 蛋白的蚯蚓的照稍有增高，但均維持在 35U-37U 之間。
【學位授予單位】：山東農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S188

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本文編號：2710696