【摘要】：腐爛莖線蟲(Ditylenchus destructor)是一種危害程度極大的的植物病原線蟲,廣泛分布于歐洲、北美洲、澳洲、亞洲及非洲,很多國家將其列為檢疫性有害生物。在我國華北、東北和華東地區(qū)甘薯主產(chǎn)區(qū)造成毀滅性危害,嚴(yán)重制約了甘薯產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。在甘肅,腐爛莖線蟲是引起的麻口病是當(dāng)歸最重要的病害。近年來,又陸續(xù)有學(xué)者在馬鈴薯上發(fā)現(xiàn)腐爛莖線蟲。腐爛莖線蟲種群在寄生和致病性以及核糖體RNA的ITS區(qū)和28S D2-D3區(qū)都有差異,在形態(tài)特征值上不同種群間也有差異。在我國,針對(duì)腐爛莖線蟲的研究多為甘薯上的群體,對(duì)當(dāng)歸群體的寄生和致病性及遺傳分化等方面的研究較少。本文對(duì)甘肅定西地區(qū)當(dāng)歸腐爛莖線蟲病進(jìn)行調(diào)查,采樣分離線蟲后,在光學(xué)顯微鏡下通過形態(tài)學(xué)研究,結(jié)合rDNA-ITS測(cè)序分析對(duì)在當(dāng)歸、黨參和馬鈴薯等3種寄主植物上為害的9個(gè)莖線蟲種群進(jìn)行了形態(tài)鑒定和種內(nèi)分化的研究。主要研究結(jié)果如下:1.在2017年10月至11月,當(dāng)歸采收期內(nèi)通過五點(diǎn)取樣法對(duì)漳縣、岷縣和渭源縣的11個(gè)村鎮(zhèn)的30塊歸田的當(dāng)歸麻口病發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查。調(diào)查結(jié)果表明:發(fā)現(xiàn)這11個(gè)村鎮(zhèn)中以漳縣金鐘鎮(zhèn)的寺身底村的病情最為嚴(yán)重,發(fā)病率高達(dá)92.4%,病情指數(shù)87.25。而這11個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的的平均發(fā)病率也高達(dá)62.52%,病情指數(shù)40.81。2.通過顯微觀察,對(duì)分離自當(dāng)歸、黨參和馬鈴薯9個(gè)線蟲種群進(jìn)行形態(tài)鑒定和描述,將其主要特征值同國內(nèi)外文獻(xiàn)已報(bào)道的腐爛莖線蟲群體進(jìn)行對(duì)較。發(fā)現(xiàn)這9個(gè)群體同屬于腐爛莖線蟲,但來自不同寄主、不同地理的線蟲群體間的多項(xiàng)形態(tài)測(cè)計(jì)值存在差異。分析表明,腐爛莖線蟲種內(nèi)不同群體在形態(tài)特征上無間斷性,形態(tài)上不存在穩(wěn)定分化,不能根據(jù)形態(tài)特征對(duì)腐爛莖線蟲進(jìn)行種下生理型劃分。3.應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù),對(duì)收集的9個(gè)群體進(jìn)行rDNA-ITS基因擴(kuò)增和序列測(cè)定。所得序列經(jīng)Blast比對(duì),以2個(gè)起絨草莖線蟲的序列(DQ5209321.1、AY703063.1)作為外群,將供試的9個(gè)腐爛莖線蟲群體的ITS序列在Blast中比較得到與其同源性較高的16個(gè)ITS序列,應(yīng)用MEGA6軟件通過UPGMA方法構(gòu)建腐爛莖線蟲ITS區(qū)的系統(tǒng)發(fā)育樹圖。通過發(fā)育樹可見,來自漳縣的黨參群體ZXC和當(dāng)歸群體ZXA堿基序列一致,同源性為100%,并與已報(bào)道的中國甘薯上的A型群體(EF210366、EF088935、EF210372)的同源性較高,聚為一支。而來自岷縣的當(dāng)歸群體MXA-2與黨參群體MXC與來與在黃芪的F型(DQ471335)和甘薯上的F型群體(HQ235677)親緣性較高聚為一支。黑龍江馬鈴薯上的群體HLS與中國發(fā)現(xiàn)的D型群體(EF208213)聚為一小分支,親緣關(guān)系較近。來自渭源縣會(huì)川的當(dāng)歸上的群體HCA和來自岷縣當(dāng)歸上的群體MXA-1與美國馬鈴薯上C型群體具有較高的親緣性,聚為一支。而隴西黨參上的群體LXC與宕昌黨參上的群體TCC親緣性低且較已報(bào)道的各群體親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。4.選用了9個(gè)低毒藥劑,應(yīng)用直接觸殺法開展室內(nèi)藥劑篩選,在不同濃度梯度下測(cè)定藥劑對(duì)腐爛莖線蟲的毒殺作用進(jìn)行初步篩選,結(jié)果顯示以42%威百畝對(duì)腐爛莖線蟲的毒殺效果最好,在作用72h后的校正死亡率可達(dá)97.05%。其次為5%噻唑膦和41.2%路富達(dá)毒殺效果較好,分別在作用72小時(shí)后校正死亡率可達(dá)77.05%、61.93%,而其它藥劑的校正死亡率均在30%以下,無明顯毒殺效果。根據(jù)初步篩選的毒殺效果好的3種藥劑做毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)、LC50及95%置信區(qū)間,發(fā)現(xiàn)在同一濃度下,3種藥劑的毒力效果以5%噻唑膦毒力作用最好,其次為42%威百畝,41.2%路富達(dá)效果較差。
【圖文】：

圖 1 腐爛線蟲為害當(dāng)歸的癥狀Fig.1 The symptoms infected by Ditylenchus destructor on Angelica sinensis (Oliv.) Dielsa: 0 級(jí); b: 1 級(jí); c: 2 級(jí); d:3 級(jí); 發(fā)病情況分析由腐爛莖線蟲引起的當(dāng)歸麻口病發(fā)病情況見下表 2。在隨機(jī)調(diào)查的 11 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的 3田中，感病田塊達(dá)到 100%。從總體調(diào)查情況來看，岷縣、漳縣和渭源當(dāng)歸麻口病率在 18.54%~92.4%，病情指數(shù) 10.48~87.25。且在岷縣、漳縣、渭源縣 11 個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)中最為嚴(yán)重的為漳縣金鐘鎮(zhèn)的寺身底村，發(fā)病率高達(dá) 92.4%，病情指數(shù) 87.25。病情的為岷縣秦許鄉(xiāng)寧壩村，發(fā)病率為 18.54%，病情指數(shù)為 10.48。從發(fā)病率來看，發(fā)在 50%以上的有 8 個(gè)村，，70%以上的有 4 個(gè)村子。從病情指數(shù)來看病情，最為嚴(yán)重漳縣的 2 個(gè)村，病情指數(shù)在 74.1 以上。其次為岷縣的麻子川鄉(xiāng)綠葉村與十里鎮(zhèn)的

圖 2 腐爛線蟲為害馬鈴薯的癥狀Fig. 2 The symptoms infected by Ditylenchus destructor on Codonopsis pilosulaa: 發(fā)病初期; b: 發(fā)病中期; c: 發(fā)病后期馬鈴薯時(shí)造成的癥狀為表皮紙化變薄，易與組織剝離（圖 3-a，b），呈黃褐色。切開薯塊，皮下薯肉有 2-5mm 不等的褐白相間糠腐（圖織呈分界明顯。
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S432.45

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2694803