【摘要】：轉基因作物的商業(yè)化種植為人類帶來了巨大的經(jīng)濟效益,同時轉基因作物的種植也引起了人們對生態(tài)環(huán)境安全性的關注。轉基因作物環(huán)境安全評價的一項重要內(nèi)容是對田間天敵昆蟲的影響。龜紋瓢蟲是棉田優(yōu)勢捕食性天敵,也是轉基因作物安全評價的重要指示性非靶標昆蟲。本文研究了Cry1B和Cry1Fa兩種新型Bt蛋白對龜紋瓢蟲的安全性。主要結果如下:1.明確了Cry1B和Cry1Fa蛋白對龜紋瓢蟲生物學特征的影響。和對照相比,飼喂0.5 mg·mL~(-1)的Cry1B和Cry1Fa蛋白后龜紋瓢蟲各個齡期的發(fā)育歷期、羽化率和羽化后蟲重均無顯著差異。說明龜紋瓢蟲取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對生物學特征沒有明顯影響。2.明確了龜紋瓢蟲取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對酶活的影響。與對照相比,龜紋瓢蟲取食0.25 mg·mL~(-1)、0.5 mg·mL~(-1)的Cry1B和Cry1Fa蛋白后對谷胱甘肽S-轉移酶(GST)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)的活性均沒有顯著影響;取食1.0 mg·mL~(-1)的Cry1B蛋白后谷胱甘肽-S-轉移酶(GST)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)的活性都顯著升高;取食1.0 mg·mL~(-1)的Cry1Fa蛋白后過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)活性均顯著升高。3.明確了龜紋瓢蟲取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對解毒、代謝相關基因的影響。不同濃度(0.25mg·mL~(-1)、0.5 mg·mL~(-1)、1.0 mg·mL~(-1))的Cry1B蛋白和Cry1Fa蛋白分別處理龜紋瓢蟲2齡和3齡幼蟲12 h、24 h、48 h后,與對照相比,龜紋瓢蟲某些解毒、代謝相關基因的表達量無顯著影響,某些解毒、代謝相關基因的表達量發(fā)生顯著影響。4.明確了龜紋瓢蟲取食Cry1B和Cry1Fa蛋白對體內(nèi)共生菌的影響。0.25 mg·mL~(-1)、0.5mg·mL~(-1)、1.0 mg·mL~(-1)的Cry1B和Cry1Fa蛋白分別處理龜紋瓢蟲2齡和3齡幼蟲12 h、24 h、48 h后,2齡幼蟲體內(nèi)的優(yōu)勢菌門為厚壁菌門Firmicutes、變形菌門Proteobacteria、擬桿菌門Bacteroidetes、放線菌門Actinobacteria、疣微菌門Verrucomicrobia和綠彎菌門Chloroflexi,與對照組一致;3齡幼蟲的優(yōu)勢菌門為厚壁菌門Firmicutes、變形菌門Proteobacteria、放線菌門Actinobacteria、擬桿菌門Bacteroidetes、酸桿菌門Acidobacteria,與對照組一致。
【圖文】：

圖 2.1 Cry1B 蛋白、Cry1Fa 蛋白、蔗糖和 E-64 對龜紋瓢蟲各齡期歷期的影響（h）re.2.1 Effects of Cry1B protein, Cry1Fa protein, sucrose and E-64 on the duration of each instars of prjaponica (h)Cry1B 蛋白和 Cry1Fa 蛋白對龜紋瓢蟲羽化率分析

9圖 2.2. Cry1B 蛋白、Cry1Fa 蛋白、蔗糖和 E-64 對龜紋瓢蟲羽化率的影響（%）gure 2.2. Effects of Cry1B protein, Cry1Fa protein , sucrose and E-64 on eclosion rate of propylea japonica（羽化率是昆蟲的生物學指標之一，所以研究取食 Bt 蛋白后龜紋瓢蟲羽化率的變化對轉的環(huán)境安全評價有重要意義。與蔗糖空白對照組相比，，Cry1B 蛋白和 Cry1Fa 蛋白對龜蟲的羽化率并沒有產(chǎn)生任何不利影響，它們的羽化率均接近 100%。E-64 蛋白酶抑制劑羽化率與蔗糖組相比，明顯低于蔗糖組。說明 Cry1B 蛋白和 Cry1Fa 蛋白對龜紋瓢蟲幼率沒有影響，結合發(fā)育歷期進一步說明了本實驗中的處理方案有效（圖 2.2）。
【學位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S476.2

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