【摘要】：小菜蛾P(guān)lutella xylostella(L.)是危害十字花科蔬菜最嚴(yán)重的害蟲之一,也是抗性發(fā)展最快的害蟲之一,開發(fā)新的生物殺蟲制劑防治小菜蛾和延緩其抗藥性發(fā)展已成為我們當(dāng)前亟待解決的問題。昆蟲病原線蟲共生菌SY5是本課題組篩選得到的高毒力菌株,其殺蟲效果和田間防效顯著,是防治小菜蛾的理想生防菌。本論文利用16S rDNA基因測(cè)序技術(shù)對(duì)健康小菜蛾與取食共生菌SY5殺蟲毒素的小菜蛾中腸V3-V4區(qū)域進(jìn)行了微生物多樣性信息分析,利用RT-PCR和qRT-PCR技術(shù)對(duì)小菜蛾中腸共生菌SY5殺蟲毒素的靶標(biāo)受體基因進(jìn)行了篩選和鑒定,并測(cè)定了共生菌SY5對(duì)小菜蛾嗅覺行為和呼吸代謝的影響。本研究將為揭示共生菌SY5及其殺蟲毒素對(duì)小菜蛾的分子作用機(jī)制提供依據(jù),為共生菌SY5的開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ),對(duì)小菜蛾生物防治和抗性治理具有重要意義。主要研究結(jié)果如下:1.通過Miseq平臺(tái)對(duì)健康小菜蛾與取食共生菌SY5殺蟲毒素的小菜蛾3齡幼蟲中腸微生物16S rDNA的V3-V4區(qū)進(jìn)行測(cè)定,分析了微生物多樣性信息,結(jié)果表明與健康小菜蛾中腸微生物相比較,取食共生菌SY5毒素后的小菜蛾中腸微生物群落結(jié)構(gòu)、菌群的豐富度和多樣性發(fā)生了明顯改變。其中假單胞菌屬(Pseudomonas)、桿菌屬(Geobacillus)、腸桿菌屬(Enterobacter)、鏈球菌屬(Streptococcus)、明串珠菌屬(Leuconostoc)和不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)細(xì)菌含量均有所升高,且腸桿菌屬(Enterobacter)細(xì)菌升高最為明顯。2.利用RT-PCR技術(shù)篩選得到三個(gè)小菜蛾中腸共生菌SY5殺蟲毒素的靶標(biāo)受體基因,分別為PxCR_(10-11)基因、E-P.xy-cad I基因和E-P.xy-cad III基因,進(jìn)一步利用qRT-PCR技術(shù)對(duì)PxCR_(10-11)基因在健康小菜蛾和取食共生菌SY5毒素后小菜蛾中腸中的表達(dá)模式進(jìn)行研究,研究發(fā)現(xiàn)該基因在健康小菜蛾中腸中的表達(dá)量是取食毒素后小菜蛾中腸的2.5倍,二者之間存在顯著性差異(P0.05),初步認(rèn)為小菜蛾鈣粘蛋白PxCR_(10-11)基因可能是共生菌SY5殺蟲毒素在小菜蛾中腸的受體基因。3.利用昆蟲嗅覺分析儀探究共生菌SY5發(fā)酵液和殺蟲毒素對(duì)小菜蛾嗅覺行為的影響,結(jié)果表明,小菜蛾對(duì)共生菌SY5發(fā)酵液及殺蟲毒素?zé)o趨避行為。利用動(dòng)物昆蟲呼吸測(cè)試儀測(cè)定共生菌SY5發(fā)酵液及殺蟲毒素對(duì)小菜蛾呼吸代謝的影響,研究發(fā)現(xiàn)小菜蛾取食共生菌SY5發(fā)酵液和毒素后呼吸速率降低,呼吸節(jié)律發(fā)生紊亂。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S433.4;S476.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2645831