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解磷真菌(PSF1)的篩選鑒定及其對土壤解磷效果研究

發(fā)布時間:2020-04-06 02:25
【摘要】:磷素施入土壤后很快被固定形成難溶性磷酸鹽,使土壤有效磷含量降低,解磷菌能夠?qū)⑼寥乐械碾y溶性磷轉(zhuǎn)化為可溶形態(tài),供植物吸收利用。盡管世界各地的科學(xué)家已經(jīng)分離篩選出了大量解磷菌,但不同解磷菌的解磷能力、適宜生長條件以及對作物的促生效果不盡相同,因此,需要開發(fā)更多種類、適應(yīng)條件廣并且對作物生長有益的解磷菌來滿足農(nóng)業(yè)需求。本研究從日光溫室番茄根際土壤中篩選解磷菌,并對解磷菌生長代謝的影響因素、溶解不同磷酸鹽的能力、在不同土壤中的生存情況和解磷效果、以及對作物生長的影響進(jìn)行研究,為解磷菌的合理施用、充分發(fā)揮其解磷作用提供理論依據(jù)。試驗主要結(jié)果如下:(1)篩選得到一株具有較高解磷能力的真菌,鑒定其為草酸青霉菌(Penicillium oxalicum),命名為PSF1。(2)草酸青霉菌PSF1可以利用葡萄糖、蔗糖、乳糖、半乳糖、可溶性淀粉等多種碳源和銨態(tài)氮、硝態(tài)氮、酰胺態(tài)氮等多種形態(tài)的氮源;在C/N 10:1~60:1、初始pH 7~10、培養(yǎng)溫度20~35℃環(huán)境中菌株P(guān)SF1都能夠正常生長代謝,保持較高的解磷能力。(3)草酸青霉菌PSF1對磷酸三鈣和磷礦粉的解磷能力分別為869.62、233.56 mg·L~(-1),對磷酸鐵和磷酸鋁的解磷能力分別為28.42、44.77 mg·L~(-1);在培養(yǎng)過程中菌株P(guān)SF1對磷酸三鈣、磷礦粉和磷酸鐵的解磷量與培養(yǎng)液pH之間存在極顯著負(fù)相關(guān)性,而對磷酸鋁的解磷量與培養(yǎng)液pH之間的相關(guān)性不顯著。(4)草酸青霉菌PSF1在棕壤、黑土、褐土中都可以正常生長,提高土壤速效磷含量;土壤相對含水量60%~90%、培養(yǎng)溫度20~30℃條件下菌株P(guān)SF1均能正常生長、發(fā)揮解磷能力;葡萄糖為碳源時,菌株P(guān)SF1生長情況最好,土壤滅菌條件下菌株P(guān)SF1生長情況更好。(5)盆栽試驗中,油菜收獲時接菌處理土壤速效磷含量比不接菌處理提高4.07%~31.57%。與不接菌處理相比,油菜鮮重、干重分別提高6.51%~26.84%、3.48%~27.89%,N、P、K含量分別提高1.80%~17.26%、9.02%~32.52%、6.18%~21.35%,葉綠素含量提高3.85%~19.91%。(6)有機載體處理土壤中草酸青霉菌PSF1的數(shù)量高于化肥處理,其中雞糞作為載體時菌株P(guān)SF1生長情況最好,高接菌量條件下土壤中菌株P(guān)SF1的數(shù)量高于低接菌量。
【圖文】:

序列,系統(tǒng)發(fā)育樹,序列同源性,菌株


解磷菌的篩選結(jié)果用篩選培養(yǎng)基平板分離所采集的解磷真菌,獲得 2 株能產(chǎn)生明顯解磷圈兩株真菌具有溶解難溶性磷酸鹽的能力。將這兩株真菌分別在無機磷液體7天后,測定培養(yǎng)液中的可溶性磷濃度,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其中一株真菌的解磷能力47.10 mg·L-1,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于另一株解磷菌,其解磷能力僅為 64.45 mg·L-1,將 PSF1,并進(jìn)一步對其進(jìn)行分子鑒定和解磷特性研究。解磷菌的鑒定結(jié)果菌株 PSF1 基因序列提交國際基因庫 GenBank,經(jīng)過同源性比較,結(jié)果顯示 序列與 GenBank 上已記錄的基因序列沒有完全相同的,與草酸青霉菌(Peum)的序列具有高度同源性,其中與草酸青霉菌 YLJ-87 相似度最高,高達(dá)EGA6 的 Neighbor-Joining 軟件進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建(圖 2-1),根據(jù)形 序列對比,鑒定 PSF1 為草酸青霉菌的一株新菌株,已送至中國微生物菌員會普通微生物中心保存,保藏號為 CGMCC No.11126。

菌落形態(tài),菌落形態(tài),不同時期,菌株


沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文2.3.3 解磷菌不同時期的菌落形態(tài)將解磷菌 PSF1 接種于磷酸三鈣固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),觀察記錄如下:菌株 PSF1 的初生菌絲為白色透明狀,3 d 后開始產(chǎn)生綠色孢子,聚集在中央,,周圍菌絲為白色;6 d后培養(yǎng)基上出現(xiàn)明顯的解磷透明圈,菌落中間有微凸,質(zhì)地緊密;10 d 后,外層為透明菌絲,菌落平坦,孢子飛散,多為暗綠色孢子,沒有層次,解磷圈擴大;15 d 后菌絲幾乎長滿整個平板,孢子顏色變得灰綠,整個培養(yǎng)基中的磷酸三鈣幾乎完全溶解,如圖 2-2所示。
【學(xué)位授予單位】:沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S154.3

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1 彭靜靜;高輝遠(yuǎn);;解磷菌的研究進(jìn)展及展望[J];泰山學(xué)院學(xué)報;2016年06期

2 尹小Z

本文編號:2615871


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