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具有ACC脫氨酶活性促生細菌的篩

發(fā)布時間:2020-04-04 22:17
【摘要】:本研究從西北地區(qū)旱地成年棗樹植株根際土壤以及根內分離篩選出具有ACC(1-氨基環(huán)丙烷-1羧酸)脫氨酶活性的促生細菌,采用形態(tài)學特征、生理生化指標和16S rDNA基因序列同源性分析等方法對菌株進行鑒定,并將具有高效ACC脫氨酶活性的促生菌回接至1年生紅棗(Zizyphus jujuba)嫁接苗,研究干旱脅迫下菌株對植株生長和生理特性的影響,探討菌株提高植株耐旱的作用機制,獲得的主要研究結果如下:1.利用以ACC為唯一氮源的培養(yǎng)基,對西北地區(qū)旱地成年棗樹植株根際及根內細菌進行分離、篩選,獲得18株具有較高ACC脫氨酶活性的細菌,其ACC脫氨酶活性在4.13~2820μmolα-KA/(mgPr·h)之間。同時,分別以比色法、液體振蕩培養(yǎng)法和固氮培養(yǎng)基對所得菌株進行促生特性的測定,表明所得菌株產生的IAA的濃度為0~41.51μg/mL,有效磷含量為3.13~534.86μg/mL,且基本均具有固氮能力。2.根據菌落形態(tài)、生理生化及其16S rDNA分子鑒定,確定所得菌株分別為普城沙雷氏菌(Serratia plymuthica)、熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、Pseudomonas koreensis、Pseudomonas brassicacearum、惡臭假單胞菌(Pseudomonas putida)、Pseudomonas lini、Pseudomonas taiwanensis、Bacillus filamentosus。3.采用天然耐藥性標記法對篩選出的促生菌株G3(Pseudomonas koreensis)、G8(Pseudomonas brassicacearum)和N5(Bacillus filamentosus)進行標記,得到穩(wěn)定的抗藥性突變菌株。通過盆栽試驗,研究3株標記菌株在棗樹根際的定殖情況。結果表明,菌株的數量在接種后均有不同程度的下降。其中G3′下降明顯,在接種后10天,菌株數量下降為7.10×10~3cfu/g,并在接種20天后,菌株數量趨于穩(wěn)定。G8′在接種后下降,并在接種20d后菌,株數量保持穩(wěn)定。N5′菌株數量在接種30天時,有小幅上升,為1.65×10~6cfu/g,之后趨向穩(wěn)定。4.在不同程度的水分條件下,接種菌劑均可不同程度的提高植株凈光合速率和葉綠素含量。植株脯氨酸含量、可溶性糖含量、SOD酶活性、POD酶活性和根系活力,與對照相比,顯著增加。接種菌劑葉片相對電導率和丙二醛含量均表現(xiàn)出不同程度的降低,但是對植株相對含水量無明顯影響。5.綜合上述分析表明,接種具有ACC脫氨酶活性的促生菌劑可通過增加凈光合速率、脯氨酸含量、可溶性糖含量、SOD酶活性和POD酶活性,降低相對電導率和丙二醛的含量,緩解植株的干旱脅迫。其中,菌劑G8對緩解植株干旱效果顯著。
【圖文】:

脫氨酶,菌株,棗樹,共分離


圖 2-1 各菌株 ACC 脫氨酶活性Figure 2-1 ACC deaminase activity of each strain從干旱地區(qū)棗樹根際和根內共分離出 18 株具有 ACC 脫氨酶活性菌株。其 AC活性表現(xiàn)出顯著差異。由圖 2-1 可知,G2、G6、N3、N4 和 N6 的 ACC 脫氨酶于 800μmolα-KA/(mgPr·h),分別為 1489.99μmolα-KA/(mgPr·h),7.12μmolα-KA/(mgPr·h)、885.02μmolα-KA/(mgPr·h)、1175.88μmolα-KA/(mgPr·7.60μmolα-KA/(mgPr·h),,而其他菌株的 ACC 脫氨酶酶活性均小于.82μmolα-KA/(mgPr·h)。2 菌株促生特性2.1 菌株產 IAA 的測定結果由圖 2-2 可知,篩選出的所有菌株除 G5,N8 和 N9 以外,均產 IAA,由于菌12

菌株,濃度,含磷量,溶磷


圖 2-2 各菌株產 IAA 的濃度Figure 2-2 The concentration of IAA produced by each strain.2 菌株溶磷能力依據液體培養(yǎng)基中有效磷含量來判斷菌株的解磷能力。由圖 2-3 可見,篩選出具有解磷能力,但解磷能力具有顯著差異。G3、G4、N6、N8、N9 和 N11 分有效含磷量均顯著低于 60μg/mL。其他菌分解得到有效含磷量均在 200μg/mL G2、G5、G6、G8、G9、N3、N4 和 N5 分解產生的有效含磷量顯著高于 400μ這 8 株菌株的解磷能力最強。
【學位授予單位】:西北農林科技大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:S665.1;S154.3

【參考文獻】

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本文編號:2614139

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