【摘要】：栽培柑橘由砧木和接穗嫁接而成。柑橘常用砧木枳對(duì)缺鐵敏感,不適于在堿性土上栽培。本課題組前期在陜南城固柑橘產(chǎn)區(qū)發(fā)現(xiàn)以枳雀為砧木的溫州蜜柑對(duì)堿性土表現(xiàn)良好的適應(yīng)性,該砧木具有極強(qiáng)的耐缺鐵能力,可作為一種新型的砧木資源加以推廣應(yīng)用。植物耐缺鐵除了其內(nèi)在適應(yīng)機(jī)制外,土壤微生物對(duì)植物鐵吸收也起著重要作用。因此本課題以缺鐵敏感砧木枳與耐缺鐵砧木枳雀為材料,通過(guò)城固柑橘產(chǎn)區(qū)堿性土盆栽實(shí)驗(yàn),探究土壤滅菌對(duì)兩種砧木鐵吸收的影響;利用細(xì)菌16S高通量測(cè)序技術(shù)研究?jī)煞N砧木根系微生物的差異;最后采用細(xì)菌稀釋平板培養(yǎng)篩選促進(jìn)柑橘鐵吸收的潛在有益菌,為探究微生物與柑橘鐵吸收之間的關(guān)系提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1滅菌和非滅菌條件下枳與枳雀鐵吸收的差異比較為了探究土壤微生物對(duì)枳與枳雀鐵吸收的影響,對(duì)來(lái)自城固產(chǎn)區(qū)的土壤進(jìn)行滅菌處理。結(jié)果表明:不論滅菌與否,枳雀均未表現(xiàn)缺鐵黃化癥狀;而枳均表現(xiàn)出明顯的缺鐵黃化癥狀,其根系全鐵含量顯著下降,且栽培在滅菌土中的枳黃化更早。該研究進(jìn)一步證明了相比枳,枳雀本身具有極強(qiáng)的耐缺鐵能力,滅菌處理在一定程度影響兩種砧木對(duì)鐵的吸收。2枳和枳雀根系微生物群落差異比較對(duì)城固柑橘產(chǎn)區(qū)的枳砧溫州蜜柑和枳雀砧溫州蜜柑的根系微生物進(jìn)行16s rRNA高通量測(cè)序并比較差異。結(jié)果表明:兩種砧木根際土中微生物數(shù)量均顯著大于根內(nèi);枳雀根際和根內(nèi)的微生物多樣性與枳無(wú)顯著性差異;兩種砧木根系微生物主要屬于變形菌門(mén)和放線(xiàn)菌門(mén);在兩種砧木根系之間相對(duì)豐度差異顯著的微生物共16個(gè)屬,其中11個(gè)屬在枳雀中的相對(duì)豐度顯著高于枳,另5個(gè)屬則相反;在枳雀中相對(duì)豐度高于枳的微生物屬,主要是與鐵吸收相關(guān)的微生物如產(chǎn)高鐵載體菌、根瘤菌、礦物風(fēng)化菌、耐高鹽堿菌,可能與枳雀耐缺鐵有關(guān)。3促進(jìn)柑橘鐵吸收的潛在有益菌的篩選采用培養(yǎng)法-細(xì)菌稀釋平板培養(yǎng)枳雀和枳根際微生物,篩選出差異細(xì)菌并進(jìn)行鑒定。結(jié)果表明:假單胞菌為柑橘砧木根系優(yōu)勢(shì)菌種,其中莫爾氏假單胞菌(Pseudomonas moorei)和變形假單胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)只在枳雀中檢測(cè)到,而類(lèi)產(chǎn)堿假單胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenes)在兩種砧木中都存在。在滅菌土中接種三種類(lèi)型的混合假單胞菌可明顯改善枳缺鐵黃化癥狀,說(shuō)明這類(lèi)微生物在柑橘鐵吸收中發(fā)揮重要作用,可為深入研究柑橘鐵吸收機(jī)制及相關(guān)微生物肥的研發(fā)提供原材料。
【圖文】：

華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018 屆碩士研究生學(xué)位（畢業(yè)）論文與方法材料與枳雀：枳為柑橘生產(chǎn)實(shí)踐中常用砧木，但因其在堿性土中不缺鐵黃化癥狀，而枳雀為砧木的柑橘生長(zhǎng)良好，如圖 1 所示， 26 日拍攝于陜西城固柑橘園。枳、枳雀的種子在光照培養(yǎng)箱題組總結(jié)的方法（周高峰 2013）。

圖 2 技術(shù)路線(xiàn)圖Fig. 2 Technical road2.3 實(shí)驗(yàn)方法2.3.1 枳與枳雀土壤滅菌盆栽實(shí)驗(yàn)用采自陜西城固原公鎮(zhèn)山坡橘園的 70 kg 土壤進(jìn)行土培試驗(yàn)，取一半土壤進(jìn)行120 ℃滅菌處理 25 min。2016 年 6 月 1 日，將長(zhǎng)勢(shì)一致的枳與枳雀 120 d 實(shí)生苗分別種植于滅菌土與非滅菌土中，共 4 個(gè)處理，每個(gè)處理設(shè)置 3 次重復(fù)，，共 12 盆，每一盆種 8 株枳或枳雀的實(shí)生苗。每周澆 2-3 次超純水，并觀察植物生長(zhǎng)狀況，待枳出現(xiàn)黃化癥狀后對(duì)土壤與植株分別進(jìn)行采樣，采樣時(shí)間為 2016 年 7 月 20 日，采集的樣品將進(jìn)行處理并測(cè)定相應(yīng)指標(biāo)。
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：S666;S154.3

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