【摘要】：南方根結(jié)線蟲(Meloidogyne incognita)是世界范圍內(nèi)最重要的病原線蟲之一。內(nèi)生細菌作為一種可靠的生物防治資源,是目前認為安全有效的控制根結(jié)線蟲的資源。前期研究表明,植物內(nèi)生蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus BCM2菌株對南方根結(jié)線蟲具有良好的防治作用,本文則將探索BCM2調(diào)控番茄根系分泌物對南方根結(jié)線蟲侵染的作用機制,為以內(nèi)生細菌防治根結(jié)線蟲提供理論基礎(chǔ)及依據(jù)。本研究通過收集BCM2定殖的番茄根系分泌物,利用水瓊脂平皿實驗和雙盆實驗發(fā)現(xiàn)其對南方根結(jié)線蟲二齡幼蟲的驅(qū)避作用,并通過GC-MS分析BCM2定殖于番茄根內(nèi)對根系分泌物的影響,尋找接種BCM2番茄和不接種的番茄根系分泌物的主要差異活性物質(zhì);分析這些活性物質(zhì)對南方根結(jié)線蟲卵孵化、二齡幼蟲存活、運動的驅(qū)避性及防效的影響,研究它們對番茄種子萌發(fā)率和幼苗生長發(fā)育的影響。1.發(fā)現(xiàn)內(nèi)生蠟樣芽孢桿菌BCM2定殖番茄根部可改變番茄根系分泌物組成,導(dǎo)致一些分泌物質(zhì)的含量增加,進而驅(qū)避南方根結(jié)線蟲。明確對線蟲有驅(qū)避作用的物質(zhì)分別是3,3-二甲基辛烷、正十三烷和2,4-二叔丁基苯酚,對南方根結(jié)線蟲孵化抑制率、致死率以及排斥性均呈現(xiàn)劑量反應(yīng),即隨濃度增高,孵化抑制率越高,致死性越高,排斥性越強。在盆栽實驗中對線蟲的防效同樣體現(xiàn)濃度梯度效應(yīng),三種物質(zhì)均可一定程度的減少根結(jié)線蟲的侵染,3,3-二甲基辛烷、正十三烷和2,4-二叔丁基苯酚分別在80 mmol/L、100 mmol/L以及6 mmol/L達到與化學(xué)殺線蟲劑噻唑膦無顯著差異的防治效果,分別達到81.03%、71.40%和71.91%。2.在10~100 mmol/L濃度范圍內(nèi),3,3-二甲基辛烷和正十三烷對番茄種子萌發(fā)有抑制作用,且隨濃度升高抑制作用增強。2,4-二叔丁基苯酚對番茄種子萌發(fā)的影響表現(xiàn)為“低促高抑”,在3 mmol/L濃度下種子萌發(fā)率達到最高。在一定濃度下三種物質(zhì)對番茄幼苗生長參數(shù)(株高、地上鮮重、地上干重、葉綠素含量)基本無影響。3,3-二甲基辛烷和正十三烷在20 mmol/L濃度下對番茄幼苗根系活力有抑制作用,且隨濃度升高抑制作用增強。2,4-二叔丁基苯酚在4 mmol/L濃度下對番茄幼苗根系活力有抑制作用,且隨濃度升高抑制作用增強。3.在田間病圃條件下,2,4-二叔丁基苯酚對南方根結(jié)線蟲具有顯著的防治效果。6 mmol/L以及8 mmol/L濃度下的2,4-二叔丁基苯酚處理與化學(xué)殺蟲劑噻唑膦無顯著差異,分別使番茄根結(jié)指數(shù)降低50.57%和51.45%,根際土壤線蟲數(shù)減少32.41%和49.36%,同時使番茄增產(chǎn)35.75%和83.74%,明顯促進番茄的生長。
【圖文】：

圖 2.1 Meloidogyne incognita J2 驅(qū)避性實驗裝置Fig. 2.1 Schematic of the water agar plates for the Meloidogyne incognita J2 phobotaxis assay雙盆法：按 1.6 方法培育雙盆的番茄苗，一邊施加 10 mLBCM2 定殖的根系分泌物，另一邊施入 10 mL 未接種 BCM2 的根系分泌物（CK）；每 3 d 處理一次，連續(xù)處理 3 次，第一次施加完畢后于中間加入 1 mLJ2 懸液(約 1000 條)。40 d 后調(diào)查線蟲侵染情況。每個處理重復(fù) 3 次。1.11 根系分泌物差異活性成分的檢測與鑒定為了檢驗BCM2定殖對番茄根系分泌物組成的影響，采用氣相色譜儀Agilent7890A 對環(huán)己烷萃取后的番茄根系分泌物進行檢測。柱型號：HP-5 毛細管色譜柱，規(guī)格：30 m×0.32 mm×0.25 μm。柱溫 240℃，升溫程序：從 60℃以 10℃/min的速度升至 140℃，，保持 2 min；以 15℃/min 的速度升至 220℃，保持 2 min；以

第二章 BCM2 調(diào)控番茄根系分泌物變化對南方根結(jié)線蟲的影響及其成分鑒定表 2.1 雙盆中 BCM2 的定殖對 Meloidogyne incognita J2 侵染及番茄植株的生長的影響Table 2.1. Effect of colonization by BCM2, on Meloidogyne incognita J2 and growth oftomato plants infected with M. incognita in a paired linked twin-pot assay處理組 對照組 變化率(%)00 g 土壤 6.31±7.93** 16.75±13.83 -62.3數(shù)/ g 根 7.19±3.05* 13.07±7.58 -45.0數(shù)/ g 根 11.04±5.71** 26.70±18.77 -58.7(cm) 18.00±3.32 16.09±2.97 11.9鮮重(g) 4.00±0.98 3.29±0.70 21.6干重(g) 0.67±0.13 0.62±0.09 8.1
【學(xué)位授予單位】：南京師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：S432.45

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本文編號：2611252