【摘要】：鏈霉菌(Streptomyces)是一類具有廣泛的應用價值和經(jīng)濟價值的微生物類群,它在不同的自然生態(tài)環(huán)境中分布廣泛,種類繁多,具有不同的代謝功能。微生物菌劑能夠緩解使用化學農(nóng)藥所引起的農(nóng)田土壤惡化、土壤板結、肥力下降等環(huán)境污染問題,并且能夠促進作物生長,改善產(chǎn)品品質,因此中國微生物菌劑的生產(chǎn)及應用呈不斷上升的趨勢。新劑型的不斷研制、工藝設備的不斷革新及應用推廣面積的增大,使中國微生物菌劑的生產(chǎn)又進入了一個新的發(fā)展時代。本實驗室自主篩選得到一株菌株SN16,經(jīng)前期試驗發(fā)現(xiàn),菌株SN16對層出鐮刀菌(Fusarium proliferatum)、串珠鐮刀菌(Fusarium moniliforme)等有較好的拮抗作用。通過形態(tài)學、生理生化鑒定以及16S rDNA序列分析,將其鑒定為黃赭色鏈霉菌(Streptomyces silaceus)。本研究首先對鏈霉菌SN16發(fā)酵條件進行單因素實驗優(yōu)化,篩選出利于鏈霉菌SN16發(fā)酵的氮源、碳源和適宜其發(fā)酵的pH。再利用響應面試驗設計(response surface methodology,RSM),以發(fā)酵后鏈霉菌SN16干重為響應值,對鏈霉菌的搖床發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進行優(yōu)化。確定最優(yōu)的液體發(fā)酵條件為酵母浸粉1.05g,可溶性淀粉19.83g,pH為6.96。菌株SN16在此液體發(fā)酵培養(yǎng)基進行發(fā)酵后,其干重的實測值為0.704±0.022g,與預測值間差距小。為了制備鏈霉菌SN16菌劑,確定了鏈霉菌SN16最佳的固態(tài)發(fā)酵工藝。其中,固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基為80%的小米粉和20%的麥麩,發(fā)酵條件為初始含水量50%,接種量10%,pH自然,培養(yǎng)7d。固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化后,菌株SN16原粉的活菌數(shù)達到9.43×108cfu/g。為了提高黃赭色鏈霉菌菌劑的生物穩(wěn)定性,通過對載體、保護劑和分散劑等助劑進行優(yōu)化,確定黃赭色鏈霉菌SN16菌劑的最佳配方,利用小麥、小白菜和煙草等幼苗的盆栽試驗驗證黃赭色鏈霉菌SN16菌劑的應用效果。結果表明,黃赭色鏈霉菌SN16最佳配方為:黃赭色鏈霉菌SN16原粉20%,1mg/m L海藻酸鈉溶液24%,10mg/mL羧甲基纖維素鈉(CMC)溶液24%,硅藻土32%。在這種配方下,4℃保存60d后,該菌劑的生物量是2.45×108cfu/g;常溫保存下60d,后其生物量能達到0.94×108 cfu/g。用黃赭色鏈霉菌SN16發(fā)酵液處理小麥種子,對小麥種子的萌發(fā)具有促進作用。經(jīng)稀釋1000倍的發(fā)酵液處理后的小麥種子,與對照相比,其發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)分別提高2.76%、8.67%和14.83%。同樣,用該稀釋倍數(shù)的發(fā)酵液對青梗小白菜進行處理,與對照相比,其發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)分別提高1.00%、1.66%和4.94%。盆栽實驗表明,2%的黃赭色鏈霉菌SN16菌劑對小麥幼苗的根長、鮮重、干重起到顯著的促進作用,分別比對照組提高了15.77%、68.42%、101.90%。在0.5%的菌劑處理下的小白菜幼苗的長勢均比其它處理和對照的效果明顯,小白菜幼苗的株高和鮮重分別比對照組提高90.05%和297.37%。在1%的菌劑處理下,煙草幼苗的最大葉長和最大葉寬分別比對照組提高127.23%和129.65%。
【圖文】：

000-2016年中國正式登記微生物菌劑產(chǎn)品的組成

000-2016年中國正式登記的生物肥料產(chǎn)品數(shù)量年度分布
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：TQ446

【參考文獻】

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本文編號：2574764