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小菜蛾ABCC2基因的克隆與表達特征分析

發(fā)布時間:2019-07-23 13:21
【摘要】:在室內采用浸葉法測定湘北三個蔬菜產區(qū)(岳陽鲇魚須鎮(zhèn);常德滄港鎮(zhèn);益陽沙頭鎮(zhèn))的田間小菜蛾對7種藥劑的抗藥性。實驗結果表明,小菜蛾對高效氯氰菊酯抗性達到極高水平(抗性倍數為257.13);對阿維菌素,和茚蟲威抗性屬于高抗水平(抗性倍數為135.15和103.08);對溴蟲腈,甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽屬于中抗水平;對氯蟲苯甲酰胺和蘇云金桿菌相對敏感。因此,湘北地區(qū)的小菜蛾防治應該注重溴蟲腈,甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽,氯蟲苯甲酰胺和蘇云金桿菌交替使用,停止高效氯的使用,以便延緩抗藥性的產生與發(fā)展。ABCC2基因在昆蟲體內起著轉運內源和外源有毒物的重要作用。本文利用RT-PCR和RACE技術首次克隆了小菜蛾(Plutella xylostella)的ABCC2基因cDNA全長(GenBank登錄號:KM103521)。測序結果表明該基因全長4260bp,開放閱讀框(ORF)長4044 bp,編碼1347個氨基酸,5’-UTR長132 bp,3'-UTR長84 bp。分析蛋白質氨基酸序列,包含9個跨膜區(qū)域,沒有發(fā)現(xiàn)信號肽,具有ABC轉運體家族典型的TMD1-NBD1-TMD2-NBD2結構域排列順序;包含Walker A, Walker B和ABC signature等ABC轉運蛋白高度保守基序。采用實時熒光定量RT-PCR技術測定了小菜蛾ABCC2基因的表達特征以及小菜蛾ABCC2基因對不同藥劑處理、不同種群之間的表達量差異。結果表明:不同齡期小菜蛾ABCC2基因相對表達量有差異,其中幼蟲期的表達量不斷升高,成蟲表達量最高,分別是3齡的4.27、4齡的2.20倍、蛹期的9.98倍。4齡幼蟲的ABCC2基因在中腸中的表達量最高,分別是馬氏管、脂肪體、精巢的4.51倍、9.12倍、16.88倍,在頭和體壁的表達量最低。三種殺蟲劑不同致死濃度處理過的小菜蛾幼蟲ABCC2基因的表達量都與致死濃度呈正相關,小菜蛾茚蟲威抗性品系中ABCC2的表達量是敏感品系小菜蛾的6.7倍。結果表明小菜蛾ABCC2基因過量表達可能與小菜蛾抗藥性相關。
【學位授予單位】:湖南農業(yè)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:S433.4

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2 蘇曉t,

本文編號:2518181


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