本文選題：棉鈴蟲 + ABCG　； 參考：《昆蟲學(xué)報》2017年03期

【摘要】：【目的】長期種植轉(zhuǎn)Bacillus thuringiensis(Bt)基因作物使一些靶標(biāo)害蟲產(chǎn)生了Bt抗性,有研究表明小菜蛾P(guān)lutella xylostella的white基因表達(dá)下調(diào)使其產(chǎn)生了Cry1Ac抗性,由于Pxwhite蛋白與ABC轉(zhuǎn)運蛋白ABCG1同屬于ABCG亞家族,我們推測棉鈴蟲Helicoverpa armigera ABCG1基因(HaABCG1)的表達(dá)下調(diào)可能與棉鈴蟲對Cry1Ac毒素的抗性有關(guān)。【方法】克隆并分析HaABCG1的開放閱讀框(open reading frame,ORF),通過構(gòu)建HaABCG1基因的表達(dá)載體檢測HaABCG1蛋白在TnH_5細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位;通過細(xì)胞毒力實驗驗證HaABCG1蛋白與Cry1Ac毒素的關(guān)系;利用RNAi技術(shù)驗證HaABCG1表達(dá)下調(diào)是否會降低棉鈴蟲對Cry1Ac毒素的敏感性。【結(jié)果】棉鈴蟲ABCG1基因的開放閱讀框長1 896 bp,編碼蛋白含631個氨基酸殘基,分子質(zhì)量估計為69.63 k D。離體昆蟲細(xì)胞表達(dá)的HaABCG1蛋白主要定位在細(xì)胞的核膜和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。通過RNA干擾和生物測定實驗發(fā)現(xiàn)HaABCG1下調(diào)表達(dá)不能使棉鈴蟲在Cry1Ac毒素濃度為0.05μg/m L的人工飼料上正常生長,3 d后處理組和對照組棉鈴蟲幼蟲的體重變化無顯著差異。經(jīng)過細(xì)胞毒力實驗證明HaABCG1蛋白不介導(dǎo)Cry1Ac毒素對TnH_5細(xì)胞的毒力,它既不是Cry1Ac毒素的受體,也不是其他3種Bt毒素Cry1Ca,Cry2Aa和Cry1Fa的受體�！窘Y(jié)論】HaABCG1基因表達(dá)下調(diào)與棉鈴蟲對Cry1Ac的抗性不相關(guān),HaABCG1不是Cry1Ac毒素的受體。這是首次報道ABCG1基因不參與棉鈴蟲的Cry1Ac抗性。
[Abstract]:[objective] long term cultivation of transgenic Bacillus thuringiensis BT) crops resulted in BT resistance of some target pests. Some studies have shown that the down-regulation of white gene expression in Plutella xylostella resulted in Cry1Ac resistance. Pxwhite protein and ABC transporter ABCG1 belong to ABCG subfamily. We speculated that the down-regulation of Helicoverpa armigera ABCG1 gene expression in Helicoverpa armigera might be related to the resistance of Helicoverpa armigera to Cry1Ac toxin. [methods] the open reading frame of HaABCG1 was cloned and analyzed. HaABCG1 protein was detected by constructing the expression vector of HaABCG1 gene. Subcellular localization in TnH_5 cells; The relationship between HaABCG1 protein and Cry1Ac toxin was verified by cytotoxicity test. RNAi technique was used to verify whether the down-regulation of HaABCG1 expression could decrease the sensitivity of Helicoverpa armigera to Cry1Ac toxin. [results] the open reading frame of ABCG1 gene of Helicoverpa armigera was 1 896 BP, encoding protein containing 631 amino acid residues, and the molecular weight was estimated to be 69.63 KD. The HaABCG1 protein expressed by insect cells in vitro was mainly located in the nuclear membrane and endoplasmic reticulum. By RNA interference and bioassay, it was found that the down-regulated expression of HaABCG1 could not make the larval weight change of Helicoverpa armigera after 3 days of normal growth on the artificial diet with Cry1Ac toxin concentration of 0.05 渭 g / mL, no significant difference was found between the control group and the control group. The cytotoxicity test proved that HaABCG1 protein does not mediate the virulence of Cry1Ac toxin to TnH_5 cells, and it is not the receptor of Cry1Ac toxin. [conclusion] the down-regulation of HaABCG1 gene expression is not related to the resistance of Helicoverpa armigera to Cry1Ac. HaABCG1 is not the receptor of Cry1Ac toxin. This is the first time that ABCG1 gene is not involved in Cry1Ac resistance of Helicoverpa armigera.
【作者單位】： 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲害生物學(xué)國家重點實驗室;夏津縣農(nóng)業(yè)局;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院深圳農(nóng)業(yè)基因組研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31321004)
【分類號】：S433

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本文編號：1850477