本文選題：土壤放線菌篩選 + 分離純化��； 參考：《上海師范大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：從上海南方農(nóng)藥研究中心得到一批長川霉素產(chǎn)生菌的誘變菌株,對(duì)它們分別進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行一系列處理,然后測試各部分的生物活性,以抑菌活性強(qiáng)弱和菌株斜面生長情況作為篩選指標(biāo),最終篩選到了一株土壤放線菌Ⅲ-172,其代謝產(chǎn)物對(duì)植物病原真菌具有較強(qiáng)的抑制作用。本文對(duì)土壤放線菌Ⅲ-172的抑菌活性組分進(jìn)行了分離純化及活性研究。在進(jìn)行發(fā)酵之前,對(duì)某些培養(yǎng)條件簡單做了一下優(yōu)化,比如說確定發(fā)酵時(shí)間以及有機(jī)萃取相。經(jīng)過活性比較,確定菌株的最佳發(fā)酵時(shí)間為7天,最佳的有機(jī)萃取溶劑是正丁醇。接著用優(yōu)化的培養(yǎng)條件對(duì)土壤放線菌Ⅲ-172進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),全程結(jié)合植物病原真菌的生物活性的跟蹤測試,以長川霉素做為比對(duì)標(biāo)準(zhǔn),通過冷凍高速離心、有機(jī)溶劑分層萃取和浸取、硅膠柱層析、薄層層析、旋蒸濃縮、高效液相色譜分析與制備等一系列的分離純化方法,逐漸對(duì)其發(fā)酵代謝產(chǎn)物中的活性組分進(jìn)行分離純化。在展開劑比例為CH2Cl2:CH3OH=10:1,Rf值為0.43左右,薄層層析板上出現(xiàn)了活性條帶5。對(duì)條帶5進(jìn)行高效液相色譜分析,在流動(dòng)相是10%的甲醇,保留時(shí)間為24-26 min之間時(shí),分離得到了一個(gè)獨(dú)立的活性峰。接著就進(jìn)行高效液相色譜制備,把制備出來的抑菌的活性化合物命名為Ⅲ-172-Ⅰ-a。經(jīng)高效液相色譜分析儀測試,化合物的純度為92.9%。緊接著對(duì)其進(jìn)行質(zhì)譜與核磁共振分析。通過UV、ESI-MS、1H-NMR、13C-NMR等一系列的譜圖對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,解析出化合物的分子量為138.1,分子式為C8H10O2。查找相關(guān)資料,了解了該化合物的一些基本性質(zhì),比如熔點(diǎn)為85℃,沸點(diǎn)為310℃,在水,乙醇,乙醚,丙酮等物質(zhì)中都可以溶解。最后還通過生物活性測定,確定了其對(duì)病原指示菌Po的最低抑菌濃度MIC為31.25ppm。提取出來的化合物Ⅲ-172-Ⅰ-a對(duì)常見的病原指示菌Po有較強(qiáng)的抑制活性。測試了最低抑菌濃度MIC,這使得其以后能更經(jīng)濟(jì)地應(yīng)用到農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。
[Abstract]:A number of mutagenic strains of Changchuan mycin producing bacteria were obtained from the Southern Pesticide Research Center in Shanghai. They were fermented and cultured separately, and the fermentation broth was treated by a series of treatments, and then the biological activities of each part were tested.A soil actinomycetes 鈪，

本文編號(hào)：1757010