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橘小實(shí)蠅半胱氨酸蛋白酶基因克隆及表達(dá)模式

發(fā)布時(shí)間:2018-03-13 10:51

  本文選題:橘小實(shí)蠅 切入點(diǎn):半胱氨酸蛋白酶 出處:《中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年01期  論文類(lèi)型:期刊論文


【摘要】:為了深入了解半胱氨酸蛋白酶基因的作用和尋求害蟲(chóng)防治新的分子靶標(biāo),利用RT-PCR和RACE技術(shù),從橘小實(shí)蠅Bactrocera dorsalis(Hendel)體內(nèi)克隆獲得半胱氨酸蛋白酶基因Bdcyp的c DNA全長(zhǎng)序列(Gen Bank登錄號(hào):KU904503),采用生物信息學(xué)軟件分析了Bdcyp編碼蛋白的特性,利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)其在不同發(fā)育階段和不同組織的表達(dá)量。橘小實(shí)蠅Bdcyp的c DNA全長(zhǎng)為1 955 bp,開(kāi)放閱讀框?yàn)? 653 bp,編碼551個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量和等電點(diǎn)分別為62 900和6.11。Bdcyp具有半胱氨酸蛋白酶的典型特征,即信號(hào)肽、3個(gè)催化活性區(qū)域(Cys-His-Asn)以及2個(gè)保守的ERFNIN和GNFD特征基序。系統(tǒng)發(fā)育分析表明Bdcyp編碼的蛋白質(zhì)與橄欖實(shí)蠅半胱氨酸蛋白酶親緣關(guān)系最近。Bdcyp在三齡幼蟲(chóng)、蛹和成蟲(chóng)期均有表達(dá),其在蛹中期的表達(dá)量最高;表達(dá)部位主要在幼蟲(chóng)脂肪體,其次為氣管和表皮,而在中腸的表達(dá)量最低。這些結(jié)果為進(jìn)一步研究Bdcyp基因功能提供了依據(jù)。
[Abstract]:In order to understand the role of cysteine protease gene and seek new molecular targets for pest control, RT-PCR and RACE techniques were used. The c DNA full-length sequence of cysteine protease gene Bdcyp was cloned from Bactrocera dorsalis Hendel.Gen#en3# accession number: KU904503 was obtained. The characteristics of Bdcyp encoded protein were analyzed by bioinformatics software. Real time quantitative PCR technique was used to detect the expression of Bdcyp in different developmental stages and tissues. The total length of c DNA of Bdcyp was 1 955 BP, and the open reading frame was 1 653 BP, encoding 551 amino acids. The predicted molecular weight and isoelectric point of protein were 62,900 and 6.11.Bdcyp, respectively, with typical characteristics of cysteine protease. That is, signal peptide, three catalytic active regions Cys-His-Asn) and two conserved characteristic motifs of ERFNIN and GNFD. Phylogenetic analysis showed that the protein encoded by Bdcyp was most closely related to cysteine protease in olive-fly. Both pupae and adult had the highest expression in the middle stage of pupae, mainly in larval fat body, followed by trachea and epidermis, and lowest in midgut. These results provided the basis for further study on the function of Bdcyp gene.
【作者單位】: 貴陽(yáng)學(xué)院生物與環(huán)境工程學(xué)院//有害生物控制與資源利用貴州省高校特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;西南大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院//昆蟲(chóng)學(xué)及害蟲(chóng)控制工程重慶市市級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:貴州省特色重點(diǎn)學(xué)科基金(ZDXK[2015]11) 貴陽(yáng)學(xué)院高層次人才科研啟動(dòng)費(fèi)(校人才2014003) 中央高;究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專(zhuān)項(xiàng)資金(XDJK2013A017) 貴州省高層次創(chuàng)新型人才培養(yǎng)(黔科合人才[2016]4020)
【分類(lèi)號(hào)】:S433

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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6 袁伊e,

本文編號(hào):1606067


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