本文關(guān)鍵詞：斜紋夜蛾種群的遺傳調(diào)控　出處：《福建農(nóng)林大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：斜紋夜蛾(Spodoptera litura)從屬于鱗翅目,夜蛾科,是一種重要的世界性廣泛分布的農(nóng)業(yè)害蟲,國外地區(qū)主要分布在非洲、亞熱帶區(qū)域、地中海區(qū)域、東南亞及南亞區(qū)域,國內(nèi)主要分布在長江流域和黃河流域。目前針對斜紋夜蛾的防治還是以化學農(nóng)藥為主,但隨著害蟲抗藥性以及農(nóng)藥安全性問題的加劇,斜紋夜蛾新型防治方法的需求日漸明顯,昆蟲種群的遺傳調(diào)控技術(shù)是斜紋夜蛾害蟲防治的理想選擇。本研究基于昆蟲種群遺傳調(diào)控技術(shù)的原理,試圖從昆蟲轉(zhuǎn)基因技術(shù)和基因組編輯技術(shù)著手,期望構(gòu)建斜紋夜蛾種群遺傳調(diào)控體系。昆蟲轉(zhuǎn)基因技術(shù)是昆蟲遺傳調(diào)控技術(shù)的基礎(chǔ)。在本實驗中,我們構(gòu)建了基于piggyBac轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒。經(jīng)過對斜紋夜蛾產(chǎn)卵特性的深入探究,我們建立并優(yōu)化了斜紋夜蛾胚胎顯微注射平臺。在本研究中,我們注射了Oxitec4319, IE1-DsRed,3XP3-EGFP和IE1-DsRed-ovoP-1.2k-EGFP 4種轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒,在胚胎顯微注射48h后,能夠觀察到報告基因很強的瞬時表達效果,這說明這些報告基因可以在斜紋夜蛾胚胎中表達相應(yīng)的蛋白并發(fā)生作用。以上的工作為斜紋夜蛾轉(zhuǎn)基因研究奠定了理論基礎(chǔ)和實踐依據(jù)。基因組編輯技術(shù)是昆蟲遺傳調(diào)控的新方向,更是基因功能研究的新方法。CRISPR/Cas9技術(shù)為昆蟲基因組功能研究提供了有效的工具。最近由CRISPR/ Cas9系統(tǒng)介導的靶基因的突變已經(jīng)在雙翅目,鱗翅目和鞘翅目等昆蟲綱中的幾個目中得以實現(xiàn)。然而,由于缺乏基因組信息和胚胎顯微注射技術(shù),這一系統(tǒng)在農(nóng)業(yè)害蟲中的應(yīng)用卻鮮有報道。在本研究中,我們證明了CRISPR/Cas9系統(tǒng)能夠有效的引起鱗翅目害蟲斜紋夜蛾相應(yīng)基因的突變。我們成功的突變了斜紋夜蛾重要的胚胎發(fā)育的基因abd-A (Slabd-A)基因,并確定它在昆蟲腹節(jié)的形成方面發(fā)揮了顯著作用。直接注射Cas9 mRNA和Slabd-A特異的sgRNA至斜紋夜蛾胚胎中能夠成功獲得典型的abd-A缺陷表型,即在幼蟲期體節(jié)的異常和色素沉著的異位。基于PCR的分析表明,Cas9/sgRNA復合體能夠有效地誘導斜紋夜蛾靶標位點的突變。綜上所述,CRISPR/Cas9系統(tǒng)是在鱗翅目害蟲斜紋夜蛾的基因組操作方面是一個有力的工具,并為斜紋夜蛾的遺傳防治提供了新思路。
【學位授予單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：Q78;S433.4

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1 劉春貴,張春梅,儲柏;斜紋夜蛾在揚州地區(qū)危害草坪的初報[J];昆蟲知識;2001年03期

2 吳家美;斜紋夜蛾為害特點及防治[J];安徽科技;2005年11期

3 舒迎花;杜艷;王建武;;鉛脅迫對斜紋夜蛾生長發(fā)育與生殖的影響[J];應(yīng)用生態(tài)學報;2012年06期

4 周曉梅,黃炳球;斜紋夜蛾抗藥性及其防治對策的研究進展[J];昆蟲知識;2002年02期

5 許春遠;安徽斜紋夜蛾的初步觀察及其土法防治[J];昆蟲知識;1959年01期

6 張圭松,譚冬莊,吳婷芳;斜紋夜蛾在新疆發(fā)生簡況[J];昆蟲知識;1974年03期

7 詹秋文,蓋鈞鎰;大豆種質(zhì)資源對斜紋夜蛾(PRODENIA LITURA)抗性的鑒定[J];應(yīng)用與環(huán)境生物學報;2000年01期

8 姚文輝;斜紋夜蛾的生物學特性[J];華東昆蟲學報;2005年02期

9 朱俊洪;張方平;任洪剛;;四種食料植物對斜紋夜蛾生長發(fā)育及營養(yǎng)指標的影響[J];昆蟲知識;2005年06期

10 孔海龍;呂敏;祝樹德;;幼蟲密度對斜紋夜蛾抗病能力的影響[J];應(yīng)用昆蟲學報;2012年06期

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1 謝圣華;林珠鳳;吉訓聰;周傳波;梁延坡;;挑治技術(shù)在斜紋夜蛾綜合治理中的應(yīng)用[A];糧食安全與植�？萍紕�(chuàng)新[C];2009年

2 宋秀高;;斜紋夜蛾暴發(fā)的原因與防治技術(shù)[A];第十九屆全國植保信息交流暨農(nóng)藥械交易會論文集[C];2003年

3 李國榮;王玉美;張勝昔;華金平;;斜紋夜蛾—不容忽視的棉田害蟲[A];中國棉花學會2004年年會論文匯編[C];2004年

4 孫挺舉;房德文;朱琴高;;斜紋夜蛾的發(fā)生規(guī)律與防治措施[A];中國蠶學會第七屆二次理事會暨學術(shù)年會論文集[C];2005年

5 陳亮;李兵;浦冠勤;;斜紋夜蛾產(chǎn)生抗藥性的原因及其防治對策[A];中國蠶學會桑樹病蟲害防治學術(shù)研討會論文集[C];2008年

6 浦冠勤;姜德義;王軍;;警惕斜紋夜蛾的發(fā)生與危害[A];中國蠶學會桑樹病蟲害防治學術(shù)研討會論文集[C];2008年

7 劉德文;劉雄;諶超賢;;斜紋夜蛾暴發(fā)原因分析及防治[A];第二十一屆全國農(nóng)藥械“雙交會”論文集[C];2005年

8 李社平;向錦曾;;斜紋夜蛾微粒子蟲的初步研究[A];北京昆蟲學會成立四十周年學術(shù)討論會論文摘要匯編[C];1990年

9 ;三葉草坪斜紋夜蛾的發(fā)生和防治策略[A];2006年江蘇省病蟲防治綠皮書[C];2006年

10 林莉;何成興;戴勛;溫麗娜;田育天;胡保文;常劍;吳文偉;趙文軍;夏玉珍;徐益群;;煙草斜紋夜蛾生物學特性的研究[A];“創(chuàng)新驅(qū)動與現(xiàn)代植保”——中國植物保護學會第十一次全國會員代表大會暨2013年學術(shù)年會論文集[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 杭州藍天園林生態(tài)科技股份有限公司 羅會生;斜紋夜蛾防治技術(shù)[N];中國花卉報;2014年

2 許紅 彭傳華;警惕斜紋夜蛾危害水生蔬菜[N];湖北科技報;2001年

3 鎮(zhèn)江市蔬菜病蟲測報站 高小文;四代斜紋夜蛾和豇豆煤霉病發(fā)生偏重[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報;2005年

4 肖愛輝 李雪梅;秋玉米須防斜紋夜蛾危害[N];湖南科技報;2007年

5 王金輝;如何防治斜紋夜蛾[N];湖南科技報;2000年

6 水清;斜紋夜蛾怎么治[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報;2005年

7 劉志強;棉田斜紋夜蛾為害特點與防治[N];山東科技報;2008年

8 辛集市植保站 陳書喬;注意查治棉、薯田斜紋夜蛾[N];河北科技報;2011年

9 李群;警惕斜紋夜蛾暴發(fā)成災(zāi)[N];云南科技報;2008年

10 廣西玉林市三山園藝場 黃家南;抓緊防治玉米斜紋夜蛾[N];農(nóng)民日報;2012年

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1 范蕊;斜紋夜蛾誘導后大豆葉片蛋白質(zhì)組學分析及GmSAMS1的克隆和功能研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2010年

2 周嘉良;斜紋夜蛾耐藥性和生殖對重金屬鉛脅迫的響應(yīng)及分子機理[D];中山大學;2012年

3 黃水金;斜紋夜蛾的抗藥性及其機理研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2006年

4 劉惠芬;斜紋夜蛾核型多角體病毒Ⅱ型基因組DNA復制原點及ORF63基因分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2012年

5 王洪濤;B型煙粉虱取食誘導的煙草對斜紋夜蛾生長發(fā)育和繁殖的影響及機制[D];山東農(nóng)業(yè)大學;2011年

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1 王緯華;湖南煙草有害動物調(diào)查及其測報和防治研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2014年

2 婁琳琳;殺蟲劑對斜紋夜蛾UDP-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶活性的影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2014年

3 劉亮;寄主及寄主轉(zhuǎn)換對斜紋夜蛾免疫及抗SLNPV能力的影響[D];揚州大學;2015年

4 畢洪論;斜紋夜蛾種群的遺傳調(diào)控[D];福建農(nóng)林大學;2016年

5 楊海燕;水分脅迫和營養(yǎng)對斜紋夜蛾的影響及其機制初探[D];揚州大學;2008年

6 劉志才;廣東佛山地區(qū)斜紋夜蛾發(fā)生規(guī)律及防治研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學;2005年

7 許冬;斜紋夜蛾取食誘導棉花抑制性消減文庫的構(gòu)建及初步分析[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2008年

8 楊進;斜紋夜蛾在不同棉花品種上的種群動態(tài)及其與體內(nèi)解毒酶活性的關(guān)系研究[D];揚州大學;2008年

9 陳亮;斜紋夜蛾對有機磷農(nóng)藥抗性研究及乙酰膽堿酯酶基因克隆與分析[D];蘇州大學;2010年

10 劉沙沙;六種非作物寄主及寄主轉(zhuǎn)換對斜紋夜蛾的影響[D];揚州大學;2008年

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本文編號：1310151