本文關(guān)鍵詞：扶桑綿粉蚧脂質(zhì)合成相關(guān)基因的特性和功能研究

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【摘要】：扶桑綿粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley,是一種食性廣,入侵性強(qiáng)的世界性害蟲,已經(jīng)在許多國(guó)家對(duì)多種經(jīng)濟(jì)作物和園藝植物產(chǎn)生嚴(yán)重危害。脂肪酸及其衍生物在昆蟲能量供給、信息素合成、表皮形成、環(huán)境適應(yīng)性等方面具有重要作用。本研究以扶桑綿粉蚧為研究對(duì)象,對(duì)不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行了分析,經(jīng)對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行篩選、序列拼接和序列注釋,獲得了大量的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)。篩選到了脂質(zhì)合成相關(guān)的基因,對(duì)其在扶桑綿粉蚧各個(gè)齡期的的表達(dá)量差異進(jìn)行分析,并對(duì)一些脂肪酸合成、延伸和脂肪醇合成關(guān)鍵基因進(jìn)行差異分析和qRT-PCR驗(yàn)證。同時(shí)在轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上,利用RACE技術(shù)克隆了扶桑綿粉蚧超長(zhǎng)鏈脂肪酸延伸酶(Elongase of very long chain fatty acid,ELOVL)和脂酰輔酶還原酶(Fatty acyl-CoA reductase,FAR)的全長(zhǎng)cDNA。并分析基因特性和螺蟲乙酯的誘導(dǎo)特性。本研究為解析扶桑綿粉蚧脂質(zhì)合成機(jī)制提供了基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:1.分析了扶桑綿粉蚧不同發(fā)育階段的轉(zhuǎn)錄組,并鑒定了脂質(zhì)合成關(guān)鍵基因。對(duì)6個(gè)發(fā)育階段進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組高通量測(cè)序,獲得360,978,854條原始reads,經(jīng)拼接獲得132,753條unigenes。利用已知數(shù)據(jù)庫(NR數(shù)據(jù)庫、Uniprot數(shù)據(jù)庫、COG數(shù)據(jù)庫、Pfam數(shù)據(jù)庫和EST數(shù)據(jù)庫)對(duì)unigenes進(jìn)行注釋,57,200條unigenes獲得了注釋信息。對(duì)KEGG注釋到的脂肪酸合成基因進(jìn)行聚類分析,發(fā)現(xiàn)扶桑綿粉蚧2齡若蟲和3齡若蟲、雌成蟲和雌成蟲產(chǎn)卵期脂肪酸合成的相關(guān)基因的表達(dá)模式相近。對(duì)脂質(zhì)合成關(guān)鍵酶表達(dá)分析和qRT-PCR驗(yàn)證:發(fā)現(xiàn)脂肪酸合成、延伸和脂肪醇關(guān)鍵酶基因在扶桑綿粉蚧若蟲期的表達(dá)量顯著高于成蟲期。2.克隆了扶桑綿粉蚧的Elovl全長(zhǎng)cDNA,并分析了其基因特性。用RACE技術(shù)獲得一條Elovl全長(zhǎng)基因,命名為PsElovl7。開放閱讀框?yàn)?52bp,編碼283個(gè)氨基酸;軟件預(yù)測(cè)顯示,該蛋白含有6個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。同其他物種ELOVL7比對(duì)發(fā)現(xiàn)KXXE/DXXDT、HXXHH、HXXMYXYY、TXXQXXQ多個(gè)保守區(qū)域。進(jìn)化樹分析顯示,扶桑綿粉蚧與豌豆長(zhǎng)管蚜、麥雙尾蚜有較近的親緣關(guān)系。qRT-PCR顯示,PsElovl7在扶桑綿粉蚧1齡若蟲中顯著高表達(dá)。3.克隆了扶桑綿粉蚧的Far全長(zhǎng)cDNA,并研究了其基因表達(dá)和功能。用RACE技術(shù)獲得兩條FAR全長(zhǎng)基因,分別命名為PsFar Ⅰ和PsFar Ⅱ。開放閱讀框分別為1584bp和1515bp,分別編碼527和504個(gè)氨基酸。軟件預(yù)測(cè)顯示,PsFAR I、PsFAR II皆含有2個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)存在TGXXGG、YXXXK兩個(gè)保守區(qū)域,分別為NADPH結(jié)合模體和活性模體。對(duì)扶桑綿粉蚧不同發(fā)育階段的FAR表達(dá)進(jìn)行qRT-PCR測(cè)定,發(fā)現(xiàn)PsFar Ⅰ和PsFar Ⅱ在不同發(fā)育階段的表達(dá)存在差異。在1齡若蟲時(shí)期的表達(dá)量顯著高于其他齡期。在1齡若蟲中,PsFar Ⅰ表達(dá)量顯著高于PsFar Ⅱ。PsFar Ⅰ在雄成蟲的表達(dá)量較高,而PsFar Ⅱ在雄蟲中表達(dá)量顯著低于其他齡期。螺蟲乙酯處理扶桑綿粉蚧7d,PsFar Ⅰ的表達(dá)量隨著螺蟲乙酯濃度的增加而增加,PsFar Ⅱ的表達(dá)無顯著差異。
【學(xué)位授予單位】：浙江農(nóng)林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S433

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1 高霞;何曉霞;張勇;劉剛;王清文;張吉昌;;扶桑綿粉蚧入侵陜西省的危險(xiǎn)性分析[J];陜西農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年03期

2 張明真;;扶桑綿粉蚧的發(fā)生與防治措施[J];福建農(nóng)業(yè)科技;2012年11期

3 秦廷奎;;臺(tái)灣芒粉蚧(同翅目:粉蚧科)——中國(guó)大陸新記錄[J];貴州農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào);1991年01期

4 李正藍(lán),尹可署;烤煙根粉蚧的發(fā)生與防治[J];昆蟲知識(shí);2001年03期

5 萬新才;劉曉芬;萬長(zhǎng)征;蔣佩蘭;;甘蔗灰粉蚧生物學(xué)特性觀察與防治[J];江西植保;2010年02期

6 張潤(rùn)志;;扶桑綿粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley[J];應(yīng)用昆蟲學(xué)報(bào);2011年02期

7 柳浩;陳永強(qiáng);;扶桑綿粉蚧生物學(xué)特性及防治的研究現(xiàn)狀[J];中國(guó)植保導(dǎo)刊;2012年05期

8 苗廣飛;黃超;;安徽省扶桑綿粉蚧疫情發(fā)生與防治[J];安徽農(nóng)學(xué)通報(bào);2013年08期

9 王子清;蟻粉蚧屬一新種記述(同翅目:粉蚧科)[J];昆蟲學(xué)報(bào);1985年04期

10 韓桂彪;中國(guó)綿粉蚧屬（Phenacoccus　Ckll．）的分類研究[J];山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);1994年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 胡熙熹;肖鐵光;;扶桑綿粉蚧研究進(jìn)展[A];華中昆蟲研究（第八卷）[C];2012年

2 覃振強(qiáng);任順祥;吳建輝;;劍麻新菠蘿灰粉蚧生物學(xué)特性研究[A];第二屆全國(guó)生物入侵學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要集[C];2008年

3 朱藝勇;黃芳;呂要斌;;溫度對(duì)扶桑綿粉蚧生長(zhǎng)發(fā)育的影響[A];植�？萍紕�(chuàng)新與病蟲防控專業(yè)化——中國(guó)植物保護(hù)學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

4 黃玲;劉慧;歐高財(cái);周社文;肖鐵光;陳常銘;;扶桑綿粉蚧天敵Aenasius bambawalei Hayat生物學(xué)研究[A];第三屆全國(guó)生物入侵大會(huì)論文摘要集——“全球變化與生物入侵”[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 ;如何防治月季粉蚧[N];中國(guó)花卉報(bào);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 萬靜;粉蚧科-齡若蟲分類初步研究(半翅目:蚧總科)[D];北京林業(yè)大學(xué);2015年

2 武英達(dá);八種粉蚧（半翅目：蚧總科：粉蚧科）蠟腺及其蠟泌物超微結(jié)構(gòu)研究[D];北京林業(yè)大學(xué);2016年

3 魏亦寒;蘇州地區(qū)扶桑綿粉蚧監(jiān)測(cè)與防控技術(shù)研究[D];蘇州大學(xué);2016年

4 王玉生;我國(guó)常見粉蚧類害蟲雙基因條形碼鑒定技術(shù)研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2016年

5 趙春玲;交配行為及共生菌對(duì)扶桑綿粉蚧胚前發(fā)育的影響[D];浙江師范大學(xué);2016年

6 任競(jìng)妹;粉蚧科昆蟲DNA條形碼鑒定技術(shù)及數(shù)據(jù)庫的建立[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

7 宋偉;溫度和寄主對(duì)扶桑綿粉蚧個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

8 李曉龍;扶桑綿粉蚧脂質(zhì)合成相關(guān)基因的特性和功能研究[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2016年

9 王震杰;扶桑綿粉蚧共生微生物的分子鑒定及分析[D];浙江師范大學(xué);2014年

10 高原;班氏跳小蜂生殖策略及對(duì)扶桑綿粉蚧寄生效能的研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2014年

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