本文關(guān)鍵詞：堿性條件下蘇云金芽胞桿菌基礎(chǔ)代謝分析

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【摘要】：【目的】探索蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis)形成轉(zhuǎn)錄差異的堿性條件,明確B.thuringiensis在該條件下的基礎(chǔ)代謝途徑變化。【方法】采用半定量RT-PCR技術(shù)及實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),確定堿刺激下參考基因psp A存在表達(dá)差異的堿性處理?xiàng)l件。在該條件下提取RNA進(jìn)行Agilent定制B.thuringiensis表達(dá)譜芯片雜交,對(duì)芯片數(shù)據(jù)進(jìn)行差異表達(dá)分析、GO富集分析及生物途徑富集分析等�！窘Y(jié)果】通過(guò)檢測(cè)psp A表達(dá)變化,將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)中期的菌體加入終濃度為28 mmol/L的Na OH并誘導(dǎo)培養(yǎng)10min,作為B.thuringiensis響應(yīng)堿刺激的研究條件。富集分析表明碳代謝、脂肪酸合成代謝、氨基酸合成代謝途徑變化明顯。細(xì)胞糖酵解途徑至少19個(gè)酶促基因上調(diào)表達(dá),三羧酸循環(huán)中催化α-酮戊二酸轉(zhuǎn)化為蘋(píng)果酸的大部分酶蛋白編碼基因上調(diào)2倍以上�！窘Y(jié)論】本研究發(fā)現(xiàn)在堿性條件下B.thuringiensis基礎(chǔ)代謝明顯增強(qiáng),細(xì)胞可能通過(guò)大量合成酸性物質(zhì)如乳酸、蘋(píng)果酸等來(lái)提高細(xì)胞對(duì)于堿性環(huán)境的適應(yīng)能力。
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;東北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31530095)~~
【分類號(hào)】：S476.1
【正文快照】： 蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis)是昆蟲(chóng)病原菌,由于其能產(chǎn)生殺蟲(chóng)伴胞晶體(Cry和Cyt毒素蛋白),已成為農(nóng)業(yè)領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的微生物農(nóng)藥。在活體實(shí)驗(yàn)中B.thuringiensis晶胞混合物毒殺大蠟螟(Galleria mellonella)活性明顯高于晶體蛋白[1],說(shuō)明營(yíng)養(yǎng)體可能影響晶體蛋白的殺蟲(chóng)

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